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环丙氨嗪完全抗原的合成及免疫原性鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 郉云瑞 1 ; 姚静静 2 ; 邢广旭 2 ; 柴书军 2 ; 孙亚宁 2 ; 胡骁飞 3 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

2.;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室

3.;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室;

关键词: 环丙氨嗪;完全抗原;多抗血清;酶联免疫吸附法

期刊名称: 食品安全质量检测学报

ISSN: 2095-0381

年卷期: 2018 年 01 期

页码: 68-73

摘要: 目的合成并鉴定环丙氨嗪(cyromazine,CA)人工抗原。方法采用碳二亚胺法(1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDC)将环丙氨嗪与牛血清蛋白(bovine serum albumin,BSA)和鸡卵清蛋白(ovalbumin,OVA)分别偶联;采用紫外分光光度法(ultraviolet spectrophotometry,UV)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和动物免疫对人工抗原进行鉴定。经过4次免疫,间接ELISA测定小鼠血清抗体效价,间接竞争ELISA测定血清灵敏性。结果 UV法和SDS-PAGE法结果初步显示半抗原环丙氨嗪和载体蛋白偶联成功;小鼠血清效价均在1:6400以上,2号小鼠多抗血清半数抑制浓度IC_(50)为27.5 ng/mL。结论本研究成功合成了环丙氨嗪的人工抗原,为环丙氨嗪单克隆抗体制备奠定基础。

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