文献类型： 中文期刊

作者： 臧莹安 ¹ ; 陈国开 ² ; 庞木生 ² ; 宋帅 ² ; 李淼 ² ; 李春玲 ² ;

作者机构： 1.仲恺农业工程学院动物科学系

2.仲恺农业工程学院动物科学系;广东省农业科学院兽医研究所;广东省兽医公共卫生公共实验室

关键词： 副猪嗜血杆菌;hhdA基因;hhdB基因;克隆;序列分析

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2012 年 32 卷 11 期

页码： 1662-1668

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用预先设计好的hhdA和hhdB基因的PCR扩增引物,扩增不同血清型的副猪嗜血杆菌分离株中的hhdA和hhdB基因,将扩增产物与克隆载体pMDTM18-T连接,转化入感受态细胞DH5α,通过PCR、双酶切及序列测定,测序结果表明:扩增的16株HPS菌中有11株能扩增出hhdA基因,其中10株有测序结果,该10株菌的hhdA基因全基因序列有7种长度,分别为1 754、1 755、1 758、1 759、1 760、1 761和1 762bp。另外,16株HPS菌中有9株能扩增出hhdB基因,该9株菌的hhdB基因全基因序列有7种长度,分别为1 628、1 637、1 639、1 640、1 641、1 646和1 647bp。对于相同血清型的不同菌株来说,它们的2段目的基因序列长度两两不一致。强毒株中,71%的菌株均能扩增出hhdA和hhdB基因;中毒型菌株也基本可以扩增出hhdA和hhdB基因;而无毒型菌株均没有扩增出目的基因。同源性比对可知:所分离菌株的hhdA之间和hhdB基因之间,以及它们分别与GenBank中副猪嗜血杆菌SH0165的hhdA和hhdB基因之间序列同源性都在98%以上,说明所分离的菌株中均含有hhdA和hhdB基因序列。同源系统进化树分析可知,hhdA和hhdB基因在分离菌菌株间具有良好的保守性,可作为研制HPS新型疫苗的候选基因。