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草菇基因文库的构建(英文)

文献类型： 中文期刊

作者： 陈明杰 1 ; 赵绍惠 2 ; 张树庭 2 ;

作者机构： 1.上海市农业科学院食用菌研究所

2.香港中文大学生物系

关键词： 草菇;基因文库;转化

期刊名称： 食用菌学报

ISSN： 1005-9873

年卷期： 1994 年 1 卷 02 期

页码： 16-20

摘要： 应用基因重细技术,我们建立丁一个草菇总DNA的部分基因文库。通过限制性内切酶Sau 3AI部分酶切纯化的草菇总DNA,得到小于4kb的DNA片段。这些DNA片段插入到经Bam HI酶切及碱性磷酶酯酶处理的pUC18质粒,转化感受态细胞DH5α。在此研究中。我们比较了两种转化方法(氯化钙转化法和电转化法)的转化效率,电转化法的转化效率高于氯化钙转化法数千倍,达到2×10(2)CFU/μg DNA。在此实验中DNA重组率是64%,这个草菇总DNA的部分基因文库由8000个克隆组成,平均每个克隆含有1.5kb的草菇DNA。此基因文库含有15%的草菇总DNA。可作为分子标记用于DNA指纹图谱分析及作为遗传学标记用于RFLPs的遗传图谱分析。

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