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乙醛脱氢酶基因表达载体的构建及表达条件筛选

文献类型： 中文期刊

作者： 张传丽 1 ; 高明侠 1 ; 董玉玮 1 ; 王陶 1 ; 李同祥 1 ; 高兆建 1 ;

作者机构： 1.徐州工程学院江苏省食品资源开发与质量安全重点建设实验室;徐州工程学院江苏省食品安全生物芯片检测技术工程实验室

关键词： 酿酒酵母;pET30a-ALDH;诱导表达;表达条件;ALDH

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2018 年 07 期

页码： 40-42

收录情况： 北大核心

摘要： 通过PCR扩增得到酿酒酵母乙醛脱氢酶基因ALDH长约1.6 kb的开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,并将该序列与pET30a(+)载体相连,得到pET30a-ALDH重组质粒,使其在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达;对含有pET30a-ALDH重组质粒的工程菌进行表达条件分析,发现当异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)浓度为1.0 mmol/L、诱导温度为28℃、诱导表达时间为6 h时,ALDH酶相对活性达到最高,为30.2 U/m L。

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