文献类型: 中文期刊
作者: 孙小涵 1 ; 张雪寒 1 ; 张碧成 1 ; 张强 1 ; 何孔旺 1 ;
作者机构: 1.吉林农业大学动物科学技术学院;江苏省农业科学院兽医研究所
关键词: 口蹄疫病毒;VP1;肝片吸虫Fh8;可溶性表达
期刊名称: 中国兽医学报
ISSN: 1005-4545
年卷期: 2018 年 04 期
页码: 727-730
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 口蹄疫病毒(foot and mouth disease virus,FMDV)的结构蛋白VP1难以实现体外的高效表达。本研究为获得良好免疫原性的VP1蛋白,选用肝片吸虫Fh8小肽段作为新型融合表达标签,构建重组Fh8-VP1免疫原,以期获得大肠杆菌中的高效表达。分别合成VP1的20~40aa和129~169aa之间的核苷酸片段,并用2个甘氨酸(GG)连接2个片段,合成的核苷酸片段(ΔVP1)克隆入Fh8标签之后,构建重组菌BL21(DE3)/pColdⅠ-Fh8-ΔVP1,SDSPAGE分析蛋白表达形式,Western blot方法检测重组His-Fh8-ΔVP1的抗原性。结果显示,成功构建重组质粒BL21(DE3)/pColdⅠ-Fh8-ΔVP1,并在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,且以包涵体形式存在于菌体蛋白,可与猪源FMDV阳性血清发生特异性反应。
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