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利用反向遗传学技术获得适应RK13细胞的兔出血症病毒

文献类型： 会议论文

第一作者： 刘光清

作者： 刘光清 1 ; 倪征 1 ; 云涛 1 ; 张玉颖 1 ; 盛祖恬 1 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所,农业部病毒学与生物技术重点实验室,浙江,杭州,310021

关键词： 兔出血症病毒;反向遗传学;全长cDNA;RK13细胞

会议名称： 中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会

主办单位： 中国畜牧兽医学会

页码： 626-630

摘要： 本研究在前期构建的兔出血症病毒(Rabbithemorrhagicdiseasevirus,RHDV)全长cDNA分子的基础上,利用SP6RNA聚合酶系统,在体外转录合成了病毒RNA.然后用转染试剂将病毒RNA导入RK13细胞,12h后可见明显致细胞病变(CPE),用间接免疫荧光方法在RK13细胞中也检测到了病毒抗原的产生.将收获的细胞培养物再次接种RK13细胞,仍然能产生明显病变,其半数组织感染量(TCID50)可达104.6/ml.最后大量收取细胞培养物,经差速离心法纯化病毒后,在电镜下可观察到RHD病毒粒子.上述实验结果证明我们利用反向遗传学技术首次获得了可适应于RK13培养的RHDV,为将来研究RHDV的分子致病机理和新型疫苗等提供了有利的工具.

分类号： S858.291

  • 相关文献

[1]利用反向遗传学技术获得适应RK13细胞的兔出血症病毒. 刘光清,倪征,云涛,张玉颖,杜青云,盛祖恬,梁华丽,华炯刚,李双茂,陈剑平. 2006

[2]兔出血症病毒在体外诱导细胞凋亡. 倪征,魏威,刘光清,陈柳,余斌,云涛,华炯钢,李双茂. 2009

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[5]TILLING技术在植物功能基因组及育种中的应用(英文). 汪得凯,孙宗修,陶跃之. 2006

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[7]松材线虫actin基因全长cDNA的克隆. 沈卫锋,牛宝龙,翁宏飚,何丽华,刘岩,齐晓朋,孟智启. 2007

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[9]抗兔出血症病毒抗体的抗独特型抗体的杂交瘤细胞的建立(英文). 盛祖恬,周明龙,唐建东,肖振国,杜念兴,杜青云,何秉耀. 1995

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