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鳗鲡一氧化氮合酶钙调蛋白结合区cDNA克隆及镉对鳗鲡一氧化氮、钙调蛋白的影响研究

文献类型: 会议论文

第一作者: 谢骏

作者: 谢骏 1 ; 中山大学 2 ; 王广军 1 ; 江涌 3 ; 余德光 1 ; 林浩然 3 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院,珠江水产研究所,广东,广州,510380

2.水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物重点实验室,广东,广州,510275

3.中山大学,水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物重点实验室,广东,广州,510275

关键词: 鳗鲡;一氧化氮;一氧化氮合酶;钙调蛋白;基因克隆;镉

会议名称: 国家“863”计划资源环境技术领域第三届海洋生物高技术论坛

主办单位: 中国21世纪议程管理中心

页码: 634-639

摘要: 采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从日本鳗鲡(Anguillajaponica)头肾组织、性腺和脑垂体总RNA中扩增出编码一氧化氮合酶(Nitricoxidesynthase,NOS)钙调蛋白(CaM)结合区基因cDNA片段,克隆至大肠杆菌DH5α中.测定结果表明,编码鳗鲡nNOS的钙调蛋白结合区碱基与哺乳类动物、其它鱼类的同源性分别为:82﹪~88﹪、85﹪~93﹪;推测的氨基酸序列与哺乳类动物、其它鱼类同源性分别为:92﹪~95﹪、93﹪~99﹪.对推导出的鳗鲡nNOSCaM结合区进行疏水性和同源性分析结果表明,与哺乳动物有非常高的相似性.在此基础上,利用试剂盒测定了将日本鳗鲡暴露于浓度为30μg/L的镉溶液中2周后,一氧化氮(NO)和钙调蛋白的变化情况,结果表明,镉竞争性抑制了体内钙与CaM的结合,降低了一氧化氮合酶的活性,降低了NO的产生.

分类号: S965.223

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