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猪圆环病毒Ⅰ型ORF1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

文献类型: 会议论文

第一作者: 马红艳

作者: 马红艳 1 ; 蒙古农业大学 2 ; 孙丽华 1 ; 蒋智勇 1 ; 郝永清 3 ; 乌尼 3 ; 宋长绪 1 ;

作者机构: 1.广东省农科院兽医研究所,广东,广州,510640

2.内蒙古,呼和浩特,0100183

3.蒙古农业大学,内蒙古,呼和浩特,0100183

关键词: 猪疾病;圆环病毒;PCV1;ORF1;基因克隆;肠道杆菌;大肠杆菌;重组质粒

会议名称: 中国畜牧兽医学会养猪分会2006年学术年会暨第四次全国会员代表大会

主办单位: 中国畜牧兽医学会

页码: 346-350

摘要: 根据GenBank中猪圆环病毒Ⅰ型(PCV1) ORF1基因序列,设计合成了一对引物,对PCV1 ORF1基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF1基因(939bp)克隆入pMD18-T载体,筛选获得重组质粒命名为pMD-ORF1.测序分析表明,克隆的ORF1与澳大利亚分离株AY754015.1核苷酸序列同源性高达99.6%.与其他PCV1核苷酸序列同源性为99.6%~98.8%,推导的氨基酸序列同源性为99.4%~98.4%.将ORF1双酶切产物插入原核表达载体PET-41a,得到重组子命名为PET-ORF1.用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western blot分析,结果表明PCV1 ORF1在PET-41a中获得了高效融合表达,其表达蛋白分子量约为67.6 ku.

分类号: S858.28`S852.659.2

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