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适合于柑橘叶片和果皮双向电泳的样品制备方法

文献类型： 会议论文

第一作者： 曾继吾

作者： 曾继吾 1 ; 邓贵明 1 ; 姜波 1 ; 钟云 1 ; 周碧容 1 ; 易干军 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院果树研究所,广州 540640

关键词： 柑橘果皮;植物蛋白;蛋白提取;双向电泳

会议名称： 中国园艺学会热带南亚热带果树分会第三届学术研讨会

主办单位： 中国园艺学会

页码： 443-450

摘要： 从植物样品中获得高纯度的样品总蛋白,是开展植物蛋白质组学及后续研究的基础。本研究以春甜橘果皮和叶片为材料,比较了Tris-HC1提取法、尿素/硫脲提取法(Thi/Urea)、三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA)和酚抽提法(Phe)4种方法对柑橘总蛋白的提取效果。结果表明,4种方法分离效果存在较大差异,在叶片中分别得到1304、1129、1532和688个蛋白点;在果皮中分别得到1282、389、1292和616个蛋白点。不论是以柑橘叶片还是果皮为材料,Thi/Urea和Phe法获得的蛋白点数偏少,2-DE分析时电泳图存在严重的横向条纹,TCA法和Tris-HC1所得图谱则背景干净,条纹较少，而TCA法和Tris-HC1相比,TCA法的2-DE 图谱效果更好,蛋白点清晰、均匀、基本没有条纹,而且蛋白点更多,说明TCA法不仅能很好地去除柑橘果皮、叶片中存在的大量干扰物质,而且还能得到稳定的蛋白点。通过对比蛋白的产率、一维SDS-PAGE和2-DE效果表明，三氯乙酸／丙酮沉淀法(TCA)是比较适合于柑橘叶片、果皮蛋白的提取方法。

分类号： Q946.1

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