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基于环介导等温扩增与伏安检测技术的快速、廉价基因甄别方法

文献类型: 会议论文

第一作者: 张旭志

作者: 张旭志 1 ; 吕志林 1 ; 李秋芬 1 ; 马绍赛 1 ; 崔毅 1 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛市南京路106号,266071

关键词: 环介导等温扩增;伏安检测技术;电化学

会议名称: 第十一届全国电分析化学会议

主办单位: 中国仪器仪表学会;中国化学会

页码: 599-600

摘要: 结合环介导等温扩增(LAMP)和电化学伏安检测技术,实验建立一种目标 基因甄别新方法。成功的LAMP 反应将把游离态的三磷酸2-脱氧鸟苷(dGTP, 反应物之一)组装到链状产物DNA 中去,结果引起该物质在碳纳米管阵列电极 上氧化电流的显著下降。因此,这种伏安响应变化可以用来表征LAMP 结果, 进而指示出模板DNA 中目标基因的信息。大肠埃希氏菌普通菌株中的malB 基 因作为实例得到验证:30 分钟LAMP 生化反应和约2 分钟的微分脉冲伏安检测 操作后,8.0 阿克模板DNA 中该基因的定性信息得到准确甄别,结果与传统的 凝胶电泳法及荧光染料法所得结果完美一致(如图1 所示)。这种新方法具有操 作简单、响应快、无需扩后处理、无需辅助试剂、费用低(检测过程几乎没有费 用)等明显优点。此外,较之于近年来发展迅猛的其它基于电化学检测技术的模 式,本方法无需电极表面的DNA 探针修饰步骤,因此更易于仪器小型化及现场 应用。 致谢 b c

分类号: O657.1

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