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大肠杆菌0157:H7单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的研制

文献类型: 会议论文

第一作者: 夏兴霞

作者: 夏兴霞 1 ; 王永山 1 ; 孟祥升 1 ; 张雪寒 1 ; 何孔旺 2 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京 210014

2.江苏省农业科学院兽医研究所农

关键词: 大肠杆菌;单克隆抗体;胶体金;免疫层析检测;试纸条

会议名称: 2011年中国微生物学会学术年会暨中国微生物学会第十次全国会员代表大会

主办单位: 中国微生物学会;福建省微生物学会

页码: 210-211

摘要: 用E.coli O157:H7菌体免疫BALB/c鼠,,制备免疫脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得了16株分泌单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。其中,1D3、2E7和2H7三株为0157:H7特异单克隆抗体,Ig亚类分别为IgMK、IgG2bK和IgG2bK,腹水抗体ELISA效价分别为103、105和106。用胶体金标记纯化的单克隆抗体2E7,制备金标抗体玻璃纤维素膜;将纯化的2H7和羊抗鼠IgG分别作为检测和对照捕捉抗体包被于硝酸纤维素膜(NC)上;组装成双抗夹心法0157:H7胶体金免疫层析检测试纸条。用该试纸条可特异检测0157:H7,敏感度为106cFU/ml,与相同单克隆抗体2H7和2E7建立的0157:H7夹心ELISA检测方法的敏感度相当,试纸条简便快速,在1-5min内可得出检测结果,便于0157:H7的临床快速诊断与现场检测样品的快速筛查。

分类号: R378.21

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