文献类型： 会议论文
第一作者： 包慧芳
作者： 包慧芳 1 ; 崔春生 1 ; 王炜 2 ; 崔卫东 1 ; 王陶 2 ;
作者机构： 1.新疆农科院微生物应用研究所 乌鲁木齐 830091
2.新疆特殊环境微生物工程技术研究中心 乌鲁木齐 830091
关键词： 放线菌酮;酮抗性基因;定点突变法;产朊假丝酵母
会议名称： 中国科协第六届青年学术年会卫星会议-新疆第六届青年学术年会暨首届博士生论坛
主办单位： 新疆自治区科协
页码： 1440-1442
摘要： 本研究根据产朊假丝酵母L41基因序列，设计四条引物，以产朊假丝酵母基因组DNA为模板，利用套叠PCR和高保真聚合酶将L41基因第五十六位脯氨酸密码了突变为谷氨酰胺密码子，即可获得放线菌酮基因，为产朊假丝酵母转化体系的建立奠定良好的基础。研究中采用Pyrobest DNA Polymerase进行PCR扩增，其特点为可信度极高，而且与Taq DNAPolymerase具有相同的扩增效率。与Taq DNA Polymerase相比，即使不用Hot start法，非特异性带也可得到有效的控制，尤为重要的是，因为其具备3'-5' Exonuelease活性，在PCR扩增产物的3端不加碱基A，这使得套叠PCR大大提高了准确性。
分类号： Q939.130.3
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