文献类型： 会议论文
第一作者： 宋帅
作者： 宋帅 1 ; 李春玲 1 ; 杨冬霞 1 ; 李淼 1 ; 岳磊 1 ;
作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所,广东省兽医公共卫生实验室,广东广州,510640
关键词： 副猪嗜血杆菌;基因缺失;分子标记;自杀载体
会议名称： 中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会
主办单位： 中国畜牧兽医学会
页码： 637-640
摘要： 为了构建副猪嗜血杆菌hhdB基因无抗性标记缺失自杀载体,根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌hhdB基因上、下游同源臂序列(hhdB-up、hhdB-down)设计并合成2对特异性引物,PCR扩增hhdB-up和hhdB-down序列,经重叠PCR的方法将hhdB-up和hhdB-down序列进行拼接(hhdB-up+down),此拼接序列的两端引入了NotⅠ和SalⅠ限制性酶切位点,经相应酶切后将hhdB-up+down序列定向克隆到自杀性质粒载体pEMOC2中。结果表明:成功获得可在大肠杆菌E.β2155中稳定遗传的hhdB基因无抗性标记缺失自杀载体(pEMOC2ΔhhdB),从而为构建副猪嗜血杆菌hhdB基因无抗性标记缺失菌株奠定基础。
分类号： S858.28:S852.612
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