文献类型： 会议论文
第一作者： 张雨良
作者： 张雨良 1 ; 黄启星 2 ; 张树珍 1 ; 王健华 2 ; 余乃通 1 ; 刘志昕 2 ;
作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南 海口 571101
2.农业部热带作物生物学与遗传资源利用重点实验室,海南 海口 571101
关键词： 甘蔗;高粱花叶病毒;基因片段;酵母双杂交;载体构建;自激活验证
会议名称： 中国作物学会甘蔗专业委员会第15次学术研讨会
主办单位： 中国作物学会甘蔗专业委员会
页码： 199-203
摘要： 采用同源克隆技术获得侵染甘蔗的高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)的Hcpro、CP、PIPO基因片段.将以上基因片段连接至pGBKT7载体,分别构建酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-Hcpro、pGBKT7-CP和pGBKT7-PIPO,经PCR、酶切及测序鉴定证明重组诱饵载体构建成功后,将重组质粒导入Y2H Gold酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用.结果表明,含重组诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,表明重组诱饵质粒表达产物对酵母细胞无毒性.含重组诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Leu、SD/-Trp/-Ade和SD/-Trp/-His营养缺陷平板上不能生长,表明重组诱饵质粒表达产物对ADE2、HIS3报告基因无自激活作用.研究结果为下一步利用酵母双杂交系统检测与高粱花叶病毒Hcpro、CP、PIPO蛋白相互作用的甘蔗蛋白提供了基础.
分类号： S435.661
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