您好,欢迎访问中国热带农业科学院 机构知识库!

应用多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光定量PCR检测甘蔗黄叶病毒和高粱花叶病毒

文献类型: 会议论文

第一作者: 王洪星

作者: 王洪星 1 ; 张雨良 2 ; 王健华 2 ; 章绍延 2 ; 熊国如 1 ; 刘志昕 3 ;

作者机构: 1.海南大学环境与植物保护学院,海南 儋州 571737

2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海南 海口 571101

3.中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海南 海口

关键词: 甘蔗;黄叶病毒;高梁花叶病毒;实时荧光聚合酶链式反应;检测效果

会议名称: 中国作物学会甘蔗专业委员会第15次学术研讨会

主办单位: 中国作物学会甘蔗专业委员会

页码: 217-222

摘要: 基于已报道的甘蔗黄叶病毒(Sugarcane Yellow Leaf Virus,ScYLV)cp基因和高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)NSP基因序列设计特异性引物,建立了针对这两种病毒的实时荧光定量PCR(real time-quantitative,RT-qPCR)检测方法.在此基础之上,利用扩增产物TM值的不同,建立了可区分ScYLV与SrMV的多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光定量PCR方法,两种病毒扩增产物的TM值分别为80.8-82.8℃和84.6-86.6℃.检测数据显示:SrMV和ScYLV均有各自的特异性的峰值出现,而健康植株无特异性峰值;在单独检测中的检出水平可分别达到500copy/μL和250copy/μL;两种病毒TM值的批内变异系数分别为0.03%和0.02%,批间变异系数分别为2.06%和3.12%.综上所述,所建立的多重SYBRGreen-Ⅰ实时荧光定量PCR方法在对以上两种病毒的检测中具有较好的特异性、敏感性和稳定性.

分类号: S435.661

  • 相关文献

[1]海南50个甘蔗品种黄叶病毒的分子鉴定. 沈林波,何美丹,冯小艳,王文治,蔡文伟,冯翠莲,张树珍. 2018

[2]以ScYLV和SrMV为材料进行常见PCR引物优化设计. 王洪星,张雨良,罗志文,杨文君,刘志昕. 2014

[3]甘蔗黄叶病毒CP蛋白基因ihpRNA表达载体构建及烟草转化. 张雨良,熊国如,王健华,张树珍,官梅花,杨文君. 2014

[4]甘蔗黄叶病毒实时荧光RT-PCR检测体系研究. 王洪星,龚殿,张雨良,王健华,刘志昕. 2014

[5]应用多重RT-PCR检测甘蔗黄叶病毒和高粱花叶病毒. 王洪星,张雨良,罗志文,杨文君,龚殿,孙玉娟,张树珍. 2014

[6]应用多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光定量PCR检测甘蔗黄叶病毒和高粱花叶病毒. 王洪星,张雨良,王健华,章绍延,熊国如,刘志昕. 2012

[7]高梁花叶病毒Hcpro、CP和P胪D基因酵母双杂交载体构建及自激活验证. 张雨良,黄启星,张树珍,王健华,余乃通,刘志昕. 2012

[8]应用多重SYBR Green-I实时荧光定量PCR检测甘蔗黄叶病毒和高梁花叶病毒. 王洪星,张雨良,王健华,章绍延,熊国如,刘志昕. 2012

[9]海南甘蔗种植的气候适宜性分析及区划. 刘建波,彭懿,陈秋波. 2009

[10]甘蔗抗旱高产栽培技术. 谢浩才. 2010

[11]甘蔗基因组DNA小量提取与大量提取方法研究. 吴转娣,昝逢刚,赵丽宏,罗遵喜,张树珍. 2009

[12]甘蔗谷胱甘肽硫转移酶基因SoGST-1α的克隆与表达分析. 徐磊,姚艳丽,胡小文,邢淑莲,刘洋. 2015

[13]甘蔗茎RNA提取方法研究(摘要)(英文). 陈萍,罗挺,蔡文伟. 2010

[14]桉农间作系统中甘蔗生长发育指标研究. 林培群,杨怀,余雪标,曹磊. 2009

[15]甘蔗中耕施肥机发展探讨. 黄敞,刘海滨,王迎,董学虎,周国胜,李明,韦丽娇,邓怡国,葛畅. 2014

[16]圆盘式茎秆切割器研究进展. 薛忠,宋德庆,郭向明,黄正明,王刚,邓干然,张劲. 2014

[17]甘蔗茎RNA提取方法研究. 陈萍,罗挺,蔡文伟. 2010

[18]海南省甘蔗种植机技术现状及技术展望. 游潇,张培,陈召,韦丽娇. 2019

[19]甘蔗体内的蔗糖转运与运输途径. 王俊刚,赵婷婷,张树珍,杨本鹏,蔡文伟. 2008

[20]甘蔗己糖转运蛋白基因ShHXT6的亚细胞定位及表达. 马晓雯,赵婷婷,王俊刚,张树珍,杨本鹏. 2016

作者其他论文 更多>>