文献类型: 会议论文
第一作者: 王洪星
作者: 王洪星 1 ; 张雨良 2 ; 王健华 2 ; 章绍延 2 ; 熊国如 1 ; 刘志昕 3 ;
作者机构: 1.海南大学环境与植物保护学院,海南 儋州 571737
2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海南 海口 571101
3.中国热带农业科学院热带生物技术研究所/农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海南 海口
关键词: 甘蔗;黄叶病毒;高梁花叶病毒;实时荧光聚合酶链式反应;检测效果
会议名称: 中国作物学会甘蔗专业委员会第15次学术研讨会
主办单位: 中国作物学会甘蔗专业委员会
页码: 217-222
摘要: 基于已报道的甘蔗黄叶病毒(Sugarcane Yellow Leaf Virus,ScYLV)cp基因和高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)NSP基因序列设计特异性引物,建立了针对这两种病毒的实时荧光定量PCR(real time-quantitative,RT-qPCR)检测方法.在此基础之上,利用扩增产物TM值的不同,建立了可区分ScYLV与SrMV的多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光定量PCR方法,两种病毒扩增产物的TM值分别为80.8-82.8℃和84.6-86.6℃.检测数据显示:SrMV和ScYLV均有各自的特异性的峰值出现,而健康植株无特异性峰值;在单独检测中的检出水平可分别达到500copy/μL和250copy/μL;两种病毒TM值的批内变异系数分别为0.03%和0.02%,批间变异系数分别为2.06%和3.12%.综上所述,所建立的多重SYBRGreen-Ⅰ实时荧光定量PCR方法在对以上两种病毒的检测中具有较好的特异性、敏感性和稳定性.
分类号: S435.661
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