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色素相关基因作为直观标记的花粉介导植物转基因方法

专利类型： 中国发明申请

专利权人： 山西省农业科学院生物技术研究中心

发明人： 孙毅;吴树彪;赵欣梅;崔贵梅;杜建中;王晓清;郝曜山;王亦学;张红梅;王长彪;尚勇进;王铭;陈哲;张欢欢;董艳辉;赵佳;赵兴华

专利号： CN201410170783.8

摘要： 一种色素相关基因作为直观标记的花粉介导植物转基因方法，目的是根据转化处理种子颜色变化直观地对转化种子进行选择，简化筛选步骤，缩短获得转化子的周期；本发明方法以携带色素相关外源基因及其启动子的农杆菌Ti质粒、大肠杆菌质粒或其它DNA载体为基因供体，以植物的雄配子体花粉为受体，在经过通气和低温处理的0.15‑1.5 mol的蔗糖溶液中使花粉与DNA片段混合，通过超声波辅助对花粉悬浮液的作用使外源基因转移到受体花粉中；然后将处理花粉授到植物柱头上，并在籽粒成熟时予以收获；在随后的生长季根据种子颜色变化对转化处理后收获的种子进行初步选择，使种子发芽，并对成苗株样本DNA进行PCR扩增及Southern杂交等分子检测验证，进一步确定转化株。

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