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通过荧光实时定量PCR建立转基因小麦生长期内根际土壤中镰刀菌拷贝数的方法

专利类型： 中国发明申请

专利权人： 江苏省农业科学院

发明人： 史建荣;王秀宇;林凡云;祭芳;董飞;曹欢

专利号： CN201110419678.X

摘要： 本发明涉及一种通过荧光实时定量PCR建立转基因小麦生长期内根际土壤中镰刀菌(Fusarium.sp)拷贝数的方法，是在田间建立对角线5点采样取土点并标记定位，在播种前和生育期分别在上述各采样取土点采集根际土壤样本；将各采样取土点采集的土壤样本提取总DNA，并将样本的总DNA溶于ddH2O中，以镰刀菌特异性通用引物对SEQ ID No.2和SEQ ID No.3对每个时期的样本DNA进行PCR扩增，获得大小在418 bp的特异性片段；由荧光定量PCR仪根据荧光信号的变化及标准曲线直接测出相应的镰刀菌拷贝数；将不同时期土壤样本中镰刀菌拷贝数汇总，形成转基因小麦生长期内根系土壤中镰刀菌拷贝数。

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