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鸡大肠杆菌traT基因扩增及traT-DIG基因探针的应用

文献类型: 获奖成果

作者:

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获奖名称: 科学技术奖

获奖等级: 三等奖

关键词: 肠;杆菌;大肠杆菌;扩增;肠杆菌;鸡;鸡大肠杆菌;探针;大肠;基因探针;基因扩增;基因

第一完成单位: 北京市农林科学院畜牧兽医研究所

获奖时间: 2002

摘要:   鸡致病性大肠杆菌可引起不同品种、不同日龄鸡的大肠杆菌病,对我国养殖业已造成严重的经济损失。本课题对分离自病死鸡实质脏器和外界环境中的大肠杆菌菌株人工感染4日龄雏鸡,根据雏鸡的死亡率、病变、及细菌分离结果,建立了鸡大肠杆菌人工感染模型和致病力评价方法,根据感染结果将菌株分为强致病力、中等致病力和无致病力菌株。 大肠杆菌的致病力与存在于其质粒中的traT基因密切相关,本课题根据菌株traT基因的序列,设计出一对引物,优化PCR反应各实验条件,扩增出traT基因的核心序列,经乙醇、酚:氯仿提纯后标记地高辛(Digoxin,DIG),制备出检测鸡大肠杆菌致病性的基因探针——traT-DIG,该探针特异性强,与鸡白痢、禽伤寒、副伤寒沙门氏菌不发生交叉反应。利用研制的基因探针对从我国不同地区集约化鸡场病死鸡分离的大肠杆菌进行致病性检测,同时与大肠杆菌人工感染实验进行对比实验,结果表明:两种方法对菌株的致病力评价结果基本一致。   用基因探针检测鸡大肠杆菌致病力方法的建立,可避免以实验动物评价菌株致病力的麻烦,对大肠杆菌流行病学的研究提供快速准确的方法,更科学地指导大肠杆菌病的防制。 病性基因

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