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牛Toll样受体实时荧光定量PCR检测方法的建立

农业生物技术学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:建立检测牛Toll样受体(TLRs)mRNA表达水平的SYBR GreenΙ实时荧光定量PCR方法。根据GenBank中BoTLR-2、3、4、5、7、8和10的基因序列,在其保守区设计并合成各自特异性引物,以牛3-磷酸甘油脱氢酶基因(GAPDH)为内参,建立实时荧光定量PCR方法。结果表明,在1×102~1×109copies/μL范围内,BoTLRs和GAPDH基因的Ct值与阳性质粒的浓度均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.991。溶解曲线分析表明,产物为特异的单峰,具有较高的灵敏度和特异性。重复性结果表明,TLRs和GAPDH基因阳性质粒,最小检出浓度达到100和10copies/μL,组内、组间变异系数值均保持在3.5%以内。临床样品检测结果表明,TLR3和TLR8mRNA水平在诱导培养早期较高,在4h达到高峰,而TLR4和TLR7水平与之相反,在诱导培养后期较高,在24h达到高峰,表明本研究所建立的检测方法成功用于临床样品的检测,为在mRNA水平对BoTLRs的定量分析提供技术平台。

关键词: Toll样受体 外周血单核细胞 实时荧光定量RT-PCR SYBR-GreenⅠ

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不同施肥及密度处理下大豆籽粒干物质积累动态及产量表现

江苏农业科学 2011 北大核心 CSCD

摘要:研究了新疆高产大豆品种新大豆1号和石大豆1号在不同种植密度及施肥水平处理下,籽粒干物质的积累动态及产量表现。结果表明:对于参试的2个大豆品种在本试验所设置的各处理组合中,最适宜施肥量及种植密度组合均为施纯氮180 kg/hm2、留苗15万株/hm2;植株籽粒干物质积累量及最终的产量形成均集中在植株的中、上层籽粒。

关键词: 大豆 品种 籽粒 干物质积累 产量表现

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基于高光谱数据提取棉花冠层特征信息的研究

棉花学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:采用ASD Field Spec Pro VNIR 2500型高光谱仪获取了不同生育时期棉花冠层的高光谱遥感数据,通过光谱分析技术研究了棉花冠层结构与其光谱数据之间的关系。结果表明,不同品种、不同密度、不同配置方式及不同生长状况间棉花的冠层光谱存在着较明显的差异,棉花冠层光谱反射率与其叶绿素含量、叶面积和生物量及生长发育阶段、健康状况和物候现象等因素密切相关。可见,运用高光谱遥感技术快速、有效、非接触、非破坏性地获取棉花冠层信息,对解释、预测和设计理想棉花群体意义重大,同时为新疆精准种植棉花和科学调控水肥提供了科学依据。

关键词: 高光谱遥感 棉花 冠层特征信息

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施钾量对新春22号小麦生理特性及产量的影响

西北农业学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:为确定新疆准噶尔地区小麦高产优质的适宜施钾量,以新春22号为材料,研究施钾水平对小麦生理特性及产量的影响。结果表明,增施钾肥能提高小麦叶片叶绿素含量,减少各生育期MDA含量。在小麦灌浆期,施钾处理较对照SOD、POD活性均有所提高。钾肥施用量过低或过高均会影响小麦相关生理过程的正常进行。小麦不同生育期硝酸还原酶活性均与其同一时期及后一时期的MDA含量呈显著正相关;小麦拔节期叶绿素含量与灌浆期SOD、POD活性呈极显著正相关;拔节期、成熟期叶绿素含量与其同时期的MDA含量呈显著负相关。钾肥施用量在225 kg.hm-2时,新春22号小麦产量和品质均下降;施用量在300kg.hm-2时,产量达到最高,但品质较低;而施用量在75~150 kg.hm-2时,不仅能使产量有所提高,并且能保证其品质,实现优质高产。

关键词: 小麦 生理特性 产量

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GA_3对葡萄果实糖积累及蔗糖代谢酶的影响

西北农林科技大学学报(自然科学版) 2011 北大核心 CSCD

摘要:【目的】研究GA3处理对葡萄果实发育过程中糖积累及代谢的影响。【方法】以3年生"红地球"葡萄(Vitis vinifera L.cv.Red Globe)为试材,用不同质量浓度(10,20和30mg/L)的GA3在花前、花后2次喷施葡萄果穗,测定其对葡萄果实生长发育、糖积累规律及蔗糖代谢酶活性的影响。【结果】1)GA3处理增加了果实纵、横径,果形指数略有降低,单果质量、穗质量增大,可溶性固形物含量增加;2)葡萄以积累己糖为主,GA3处理提高了糖积累速率,尤其是果糖的积累速率,但并没有改变糖积累总的变化规律;3)果实发育前期酸性转化酶(AI)和中性转化酶(NI)活性增加,后期蔗糖合成酶(SS)活性增加,其中以20mg/L GA3处理的效果最为显著。【结论】外源GA3处理可通过改变果实内部相关酶的活性,来参与葡萄糖积累及代谢的调控。

关键词: GA3 葡萄 果实生长发育 糖积累 糖代谢 酶活性

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3种可溶性膳食纤维对大鼠血脂的影响

食品科学 2011 北大核心 CSCD

摘要:以SD大鼠为实验动物,饲喂高脂饲料,同时灌胃可溶性的番茄膳食纤维(TS)、葡萄膳食纤维(GS)和燕麦β-葡聚糖(βG),观察3种可溶性膳食纤维对大鼠血脂水平的影响。结果发现,βG、TS和GS能显著抑制大鼠血清中总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度上升(P<0.05),与高脂模型对照组比较,其浓度平均水平分别下降了30.2%和34.7%;但是3种可溶性膳食纤维对大鼠的体质量、体脂百分率、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和动脉硬化指数AI没有显著影响。TS比βG和GS能更加有效抑制大鼠血清TG浓度升高,βG则比TS和GS能更好地抑制HDL-C浓度降低,但与空白对照组比较,均未达到显著水平。

关键词: 可溶性膳食纤维 番茄 葡萄 β-葡聚糖 大鼠 高脂血症

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基于高光谱植被指数的棉田冠层特征信息估算模型研究

棉花学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:采用ASD Field Spec Pro VNIR 2500型光谱辐射仪获取了棉花不同生育时期的冠层高光谱反射率。并通过光谱分析技术,建立了基于高光谱植被指数——归一化植被指数和比值植被指数的棉田冠层特征信息的定量模型。经过对估算模型的精度检验和评价,最终筛选出表征棉花冠层结构特征参数的最佳估算模型。结果表明,基于归一化植被指数预测棉花叶面积指数,以幂函数(y=11.084x12.024,r=0.8076**)的模型为最优;基于比值植被指数预测棉花单位面积地上部鲜生物量,以指数函数(y=52.261.exp(0.1024x),r=0.8114**)的估计模型为最优;基于比值植被指数预测棉花单位面积地上部干生物量,以指数函数(y=9.5552.exp(0.1133x),r=0.8330**)的模型为最优。可见,利用高光谱遥感技术可以分析、模拟、评价、预测棉花冠层特征参量,为精准种植棉花提供了依据。

关键词: 高光谱遥感 棉花冠层信息 归一化植被指数 比值植被指数 估算模型

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基于高光谱特征参数的棉花长势参数监测

西北农业学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:通过小区棉花密度和水分对比试验,分析不同密度和水分处理的棉花整个生育期生物量和LAI(叶面积指数)与高光谱特征参数的相关性,建立棉花生物量和LAI光谱估算模型。选取的所有植被指数与棉花LAI和生物量相关性均达到极显著水平,其中光谱参量NDVI(890,670)与LAI的相关性和光谱参量Height(920)与生物量相关性最好,用这2个参量与生物量建立棉花长势估测模型,其决定系数分别为0.804 0和0.760 9,均方根误差分别为0.191 5和0.315 2,利用光谱特征参数可以有效地监测棉花整个生育期的长势变化。

关键词: 棉花 LAI 生物量 植被指数 监测

角蛋白启动子荧光素酶表达载体的构建及其表达活性分析

西北农业学报 2011 北大核心 CSCD

摘要:角蛋白14(K14)和角蛋白5(K5)主要在毛囊基质和复层鳞状上皮基底层的角质细胞里表达。这两个启动子已被广泛应用于毛囊特异表达外源基因的转基因小鼠模型的研究中,为了能将其应用于转基因绵羊生产,探讨基因对绵羊毛囊发育的影响,从人基因组中克隆得到K14和K5启动子,利用不同的报告基因在细胞水平分析各启动子的表达活性。结果表明,这两个启动子在不同细胞系中都能驱动外源基因的表达,而且K14启动子在小鼠皮肤细胞系JB6-C41中的表达活性高于其他细胞。

关键词: 启动子活性 荧光素酶 角蛋白

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捻转血矛线虫Hc38重组蛋白的表达纯化及抗原性鉴定

新疆农业科学 2011 北大核心 CSCD

摘要:【目的】通过表达和纯化捻转血矛线虫新功能基因Hc38最大开放阅读框ORF1,确定完整的Hc38蛋白天然表达形式、分子量大小和免疫学活性鉴定,为研究该基因功能和基因工程应用奠定基础。【方法】参照本实验室在GenBank上登录的捻转血矛线虫ZJ株的Hc38基因序列(AY594263)设计引物,PCR扩增目的基因并克隆到表达载体中,重组表达载体转化大肠杆菌后IPTG诱导表达,SDS-PAGE和薄层扫描检测分析表达产物,通过亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Western bloting和ELISA方法检测其抗原性。【结果】Hc38基因在大肠杆菌中高效表达,表达的融合蛋白相对分子量约为68 KD,表达量占菌体蛋白总量的30%,亲和层析柱纯化出目的蛋白,并能被捻转血矛线虫病绵羊阳性血清和重组表达产物免疫小鼠血清识别,具有反应原性。【结论】实现了Hc38基因的原核表达和纯化,验证了Hc38基因在虫体内的表达形式和抗原性。

关键词: 捻转血矛线虫 Hc38基因 表达

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