科研产出
大肠杆菌外排泵系统基因表达及ELISA检测方法建立
《中国农业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：【目的】对大肠杆菌AcrAB外排泵系统acrA、acrB基因进行原核表达,获得的表达产物AcrA、AcrB蛋白分别免疫兔,制备相应的抗体,建立大肠杆菌外排泵表达水平的ELISA检测方法。【方法】扩增AcrAB外排泵系统acrA、acrB基因片段,扩增片段分别与原核表达载体pET-41a(+)连接构建重组质粒,于BL21(DE3)中进行诱导表达。表达产物AcrA、AcrB纯化后分别免疫新西兰大白兔,获得抗AcrA、AcrB抗血清,并用Western blot方法对表达产物进行鉴定分析。纯化的AcrA、AcrB蛋白分别按不同的浓度包被酶标板,与不同稀释倍数的抗血清反应,通过ELISA检测确定最佳抗原包被浓度及抗体稀释度,初步建立大肠杆菌外排泵表达水平的ELISA检测方法。【结果】成功克隆和表达了acrA、acrB基因片段,经SDS-PAGE检测表明两种表达产物AcrA、AcrB均以可溶性蛋白形式存在。AcrA、AcrB抗原蛋白最佳包被浓度分别为1.0μg.ml-1和0.5μg.ml-1,抗AcrA、AcrB血清的最佳稀释度分别为1﹕800和1﹕400。用初步建立的ELISA方法检测8株大肠杆菌多重耐药菌株外排泵表达水平,结果表明分别用两种蛋白作包被抗体检测外排泵表达水平的结果一致。【结论】本研究通过原核表达的方法获得大肠杆菌AcrAB外排泵系统AcrA、AcrB蛋白并制备了相应的抗体,分别用两种抗体包被酶标板,并建立了大肠杆菌外排泵表达水平的ELISA检测方法,对8株多重耐药菌株的检测结果表明该方法可行、可靠。
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湛江地区黄毛鼠对溴敌隆的敏感性研究
《中国媒介生物学及控制杂志 》 2008 CSCD
摘要：目的测定黄毛鼠对第二代抗凝血灭鼠剂溴敌隆的敏感性,为黄毛鼠的抗药性检测提供敏感种群本底资料。方法在实验室做无选择性摄食试验。将试鼠雌雄分开,随机分组,按5个不同食毒期摄食0.0002%溴敌隆毒饵。用Bliss计算机程序,计算不同食毒期与对应死亡率之间的关系。结果黄毛鼠性别之间对溴敌隆的敏感性差异无统计学意义(Pb>0.05,PLFP50>0.05),故将雌雄数据合并计算,得毒力回归方程y=0.52+7.58x,LFP50、LFP99及其95%置信限分别是3.90(3.55~4.28)和7.90(6.24~10.00)。结论按WHO修订以致死99%敏感靶标鼠种的食毒期(LFP99)取整天数作为抗药性检验标准,湛江地区黄毛鼠对0.0002%的溴敌隆毒饵食毒期超过8d存活为产生抗药性。
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家蚕新品种粤蚕8号(越·春5×航诱7·研7)选育初报
《广东蚕业 》 2008
摘要：粤蚕8号(越·春5×航诱7.研7)是中.中×日.日四元杂交种。原母种抗逆性强、丰产性能高、茧丝质优。四元杂交种抗逆性强,孵化、发育、眠起齐一,茧形大,茧层厚、产量高、丝质好;是一个易繁易养,综合经济性状优良的家蚕新品种。生命力与对照种两广二号相当,4龄起蚕结茧率达到99.38%,虫蛹统一生命率达到98.29%,全茧量1.749g,比对照种提高8.57%;茧层量是0.368g,比对照种提高9.20%,万蚕收茧量17.205kg、万蚕茧层量3.616kg,一茧丝长1015m、解舒率66.88%,解舒丝长678.7m、纤度2.588D、净度93.42分,均优于对照种,具有优良的实用经济性状。
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新城疫病毒自然宿主细胞膜受体的鉴定
《中国生物制品学杂志 》 2008 CSCD
摘要：目的鉴定鸡源副黏病毒F48E9株的自然宿主细胞膜受体。方法采用蛋白膜提取试剂盒提取鸡胚成纤维细胞膜蛋白,用改进的间接ELISA方法检测鸡源副黏病毒分离株F48E9与细胞膜的结合活性,利用病毒铺覆蛋白印迹技术(VOPBA)鉴定新城疫病毒(NDV)的自然宿主细胞膜受体。结果NDV与鸡胚成纤维细胞膜有很强的结合力,在转印鸡胚成纤维细胞膜蛋白的PVDF膜上有几条明显的疑似受体条带,相对分子质量介于35000～60000之间。结论初步鉴定了NDV自然宿主细胞膜的受体,其疑似受体蛋白的性质及在新城疫病毒致病中的作用尚有待进一步研究。
关键词： 新城疫病毒 自然宿主 细胞膜受体 病毒铺覆蛋白印迹技术
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新农村建设背景下的农业科技集成发展需求与战略
《广东农业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：阐释了农业科技集成的内涵,并从"生产、生活、管理"的角度分析了新农村建设对农业科技集成的需求,提出了强化农业科技集成、推进新农村建设的政策建议,包括:深化农业科研体制改革、调整农业科研目标、活化农技推广服务体系、创新人才培养和激励机制等。
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