科研产出
猪干扰素α2亚型的表达纯化及抗病毒活性测定
《畜牧与兽医 》 2022 北大核心
摘要：为研究重组猪干扰素α2亚型(porcine interferon α2,poIFN-α2)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的抑制作用,试验构建了 pCSMH-poIFN-α2的大肠杆菌表达载体,采用温度诱导poIFN-α2表达后,收集包涵体并复性后,采用亲和层析的方法对poIFN-α2进行纯化.采用Western blot方法检测纯化后蛋白的特异性,结果显示该蛋白具有较好的特异性和反应原性.用不同浓度的重组poIFN-α2处理MARC-145和PAM细胞24h后,接种PRRSV(1 000 TCID50).24h后收集细胞,采用荧光定量PCR检测细胞内PRRSV ORF7的核酸水平,同时检测细胞上清液中PRRSV的TCID50.结果证明大肠杆菌表达的重组poIFN-α2可以有效抑制PRRSV的增殖.进一步检测重组poIFN-α2在PAM细胞上诱导干扰素刺激基因(ISG)的水平,结果证明重组poIFN-α2可有效诱导PAM细胞内ISG的上调.本研究为研发新一代抗病毒药物奠定了基础.
关键词： 猪干扰素α2;抗病毒活性;表达;猪繁殖与呼吸综合征病毒;干扰素刺激基因
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不同基因型烟草对氯离子吸收、积累与分配的差异性分析
《河南农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：为明确不同基因型烟草氯离子吸收、积累与分配的差异，筛选出氯高吸收和低吸收基因型的烟草种质，采用盆栽试验，选取9个烤烟品种为试材，设置3个施氯水平处理（0、50、100 mg/kg），分析烟草成熟期不同部位氯离子吸收、积累、转运、分配特性。结果表明，随着施氯量增加，烟草各部位氯离子含量上升，烟草各部位氯离子含量表现为脚叶＞下部叶＞中部叶＞上部叶＞茎＞根，其中，K326叶片总体氯离子含量和积累量均较高，分别为206.4 mg/kg和16.58 mg；渝金香1号中、上部叶氯离子含量较低，分别为150.09mg/kg和95.00 mg/kg，脚叶（1.35 mg）和下部叶（4.63 mg）氯离子积累较高；在50、100 mg/kg氯处理下，辽烟17叶片氯离子含量、积累量和转运系数较CK分别增长59.62%、95.67%,37.04%、52.49%和39.88%、89.43%，渝金香1号氯离子转运系数仅增长7.88%和12.90%，秦烟96氯离子积累量和分配率仅增长1.73%、2.04%和0.05%、0.07%，与CK相比差异不显著。总体上，在参试9个烟草品种中，秦烟96、渝金香1号烟株氯离子吸收、积累量较小，中、上部叶氯离子转运分配较少，可在土壤氯离子含量较高的烟区种植；K326、辽烟17对氯离子吸收量较大，烟株各部位氯离子含量较高，在生产上应采取相应控氯措施。
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有机无机肥配施对烟田土壤养分和烟叶产质量的影响
《贵州农业科学 》 2022 北大核心
摘要：[目的]探明烟田有机肥与无机肥的适宜施用配比和优质烟叶品质形成的作用机理,为植烟土壤改良及优质烟叶生产提供科学依据.[方法]设置5个不同有机无机肥配比处理(T1:对照,纯施无机肥;T2:有机肥∶无机肥=30%∶70%;T3:有机肥∶无机肥=50%∶50%;T4:有机肥∶无机肥=70%∶30%;T5:纯施有机肥),分析不同处理烟田土壤主要养分、烟叶干物质积累和烟叶化学成分及其协调性的差异.[结果]与对照比,有机无机肥配施处理烟株团棵期和旺长期土壤微生物生物量碳/氮和有机碳含量升高,成熟期烟株根、茎、叶干物质积累量增加;调制后烟叶总氮含量下降,烟碱、总糖、还原糖和钾氯含量升高.烟叶经济效益以T2最高,烟叶产量、产值、均价和上等烟比例分别较对照提高22.00%、28.42%、5.42%和18.98%.土壤有机碳、微生物生物量碳与烟叶总氮、烟碱、钾氯含量密切相关.[结论]有机无机肥配施能有效改良土壤结构并提高烟叶产质量,适宜的配比为有机肥∶无机肥=30%∶70%.
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广谱性识别H7亚型禽流感病毒HA蛋白的单克隆抗体制备与鉴定
《河南农业科学 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：H7N9亚型禽流感病毒（AIV）的快速进化与变异使得其逃脱现有抗体的识别，为提供H7亚型AIV鉴别诊断所需重要材料，制备可识别H7亚型AIV HA蛋白的单克隆抗体（mAb）。采用差速离心法纯化的H7N9亚型AIV（A/Chicken/Guangdong/SW154/2015）免疫BALB/c小鼠，利用杂交瘤技术制备杂交瘤细胞，采用血凝抑制（HI）试验、免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）和间接ELISA检测方法筛选阳性杂交瘤细胞株。结果显示，获得5株稳定分泌抗H7N9 AIV HA蛋白mAb的杂交瘤细胞，腹水ELISA效价均为1∶1 000 000；其中，4株mAb的重链为IgG1,1株mAb的重链为IgG2b，轻链均为κ链。特异性测定结果显示，5株mAb仅与H7亚型AIV反应，不与其他亚型流感病毒发生反应；广谱性测定结果显示，5株mAb均可与不同年份分离出的H7亚型AIV发生反应；HI结果显示，腹水针对H7-Re3抗原株的HI效价为7 log2～12 log2;MDCK细胞微量中和试验结果显示，5株mAb均具有中和活性；Dot blot检测结果显示，5株mAb均可识别H7-Re2抗原株和H7-Re3抗原株；Western blot检测结果表明，5株杂交瘤细胞培养上清均在63 ku附近出现1条特异性的蛋白质条带，说明这5株mAb均识别线性表位。综上，成功制备了5株广谱性识别H7 AIV HA蛋白的单克隆抗体。
关键词： 禽流感病毒 H7N9 单克隆抗体 广谱性 中和活性
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4个禾本科植物NAC基因家族的系统进化及其在玉米中的干旱表达谱分析
《干旱地区农业研究 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：利用生物信息学方法,对4个禾本科物种玉米、高粱、二穗短柄草和水稻的NAC基因家族进行鉴定和系统进化分析.结果表明:4个禾本科物种共556个NAC基因可以聚类为6个进化枝;物种内NAC转录因子有相似的理化性质,但在进化枝上又表现出差异,进化枝1、2、3和进化枝4、5、6分别表现出相似的相对分子质量,进化枝1、2、3、5表现出相似的等电点,进化枝4、6表现出相似的等电点;4个物种共鉴定出27个含跨膜结构域的NAC基因,并且大部分(88.9%)都位于进化枝4上;使用溯源法共鉴定出174个禾本科祖先基因,每个物种NAC基因丢失和保留都存在差异;基因复制分析发现,串联复制对禾本科NAC基因家族扩张贡献明显(20.3%,113/556),而玉米的大片段复制事件对玉米NAC基因家族扩张贡献明显(30.5%,50/164);干旱胁迫下玉米转录表达分析鉴定出51个差异表达基因,且不同组织内的差异表达基因数目存在差异,叶和雌穗内的差异表达基因数目多于雄穗.
关键词： 禾本科植物 系统进化 NAC基因家族 干旱胁迫 玉米 基因表达
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红花类黄酮3-O-糖基转移酶基因CtUF3GT的克隆及功能鉴定
《药学学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：UDP-葡萄糖:类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶(UF3GT)以黄酮醇、二氢黄酮醇或花青素作为受体,以UDP-葡萄糖作为供体催化生成类黄酮3-O-糖苷类化合物.本研究以红花为材料,基于同源比对和转录组数据分析,筛选并克隆得到1条UF3GT基因命名为CtUF3GT(GenBank登录号OM948976).CtUF3GT开放阅读框为1 446 bp,编码481个氨基酸,推测其分子质量为52.36 kD,理论等电点为5.33.生物学信息分析表明CtUF3GT具有植物UGT家族成员特有的PSPG基序,多重序列比对显示,CtUF3GT与来自菊科植物中的UF3GT同源性较高,系统进化分析表明CtUF3GT与其他物种中已鉴定的UF3GT聚为一类.体外催化功能鉴定显示,CtUF3GT催化山柰酚和槲皮素生成山柰酚-3-O-葡萄糖苷和槲皮素-3-O-葡萄糖苷,并且对山柰酚具有较高的底物偏好性;qRT-PCR分析表明,UF3GT基因在花中表达量最高,叶中次之,在苞片和茎中表达量极低,在根中无表达.在花发育的不同时期,UF3GT基因的表达量呈现先升高后降低的趋势,白色和红色红花两个品种中CtUF3GT基因的表达量在花发育的Sl、S2、S5、S6、S7时期均差异极显著(P<0.01),其中在S6期、S7期,白色红花中CtUF3GT基因表达量是红色红花中的5.3倍和3.1倍.该研究为进一步探索CtUF3GT基因在红花类黄酮次生代谢产物合成积累机制中的作用奠定了基础.
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玉米穗三叶叶长和叶面积的QTL定位
《华北农学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：玉米叶长和叶面积是重要的农艺性状，为解析玉米穗三叶叶长和叶面积的遗传机制，以郑58和D863F及其杂交构建的241个RIL家系为材料，在2018,2019年春播和夏播环境下分别进行QTL定位分析。结果表明：玉米穗三叶叶长和叶面积在RIL群体中表现出连续变异，呈正态分布，属于典型的数量性状，性状间呈极显著相关，且广义遗传力分别为88.04%,88.45%,87.86%,85.04%,85.27%和85.73%。2 a共检测到23个QTL,其中控制叶长的QTL 14个，控制叶面积的QTL 9个，分布于玉米的第1,2,4,5,6,8染色体上，单个QTL的表型贡献率为5.84%～17.81%。在春、夏播环境下同时检测到控制叶长的QTL 3个（qFirLL1-2、qFirLL5-1和qSecLL1-2）,叶面积QTL 2个（qFirLA2-1和qSecLA2-1）,其余位点只能在春播或夏播环境下被单独检测到。在第2染色体（bnlg1316～bnlg1141）和第5染色体（umc1591～umc2298）区间内同时检测到影响穗下叶叶长、穗位叶叶长、穗上叶叶长、穗下叶叶面积、穗位叶叶面积和穗上叶叶面积等6个性状的QTL,贡献率为6.42%～17.81%,为主效QTL位点；这2个标记区间是调控玉米穗三叶叶长和叶面积的重要区段，可能包含调控叶片性状的关键基因。
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70份紫云英种质资源表型多样性及其在豫南地区的结实特征
《草业学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：对70份当地和引入紫云英种质资源在豫南地区种植的表型性状和结实特征进行研究,结果表明,供试紫云英均可在豫南地区完成扩繁,19个调查性状的变异系数(CV)介于1.3%~73.2%,其中冠层面积(CV=45.9%~73.2%)、始荚高度(CV=46.0%~52.9%)、生殖分枝数和生殖分枝比率(CV=34.6%~48.4%)、二级分枝数(CV=41.2%~41.3%)、返青期株高(CV=30.2%~39.2%)、种子产量(CV=24.4%~35.7%)变异性较高.信紫1号、XYHY-1等6个当地资源在越冬期和返青期叶片呈现紫红色.种子产量与返青期株高、盛花期株高、越冬期冠层大小、始荚高度、结荚层数、种子千粒重显著正相关;种子千粒重与返青期株高、盛花期株高、越冬期冠层大小、始荚高度、结荚层数、生殖分枝比率显著正相关,与出苗至盛花期天数、全氮和全磷含量显著负相关.引入资源平均种子产量为1015.5 kg·hm-2,当地资源平均种子产量为1096.5 kg·hm-2.与冬油菜和冬小麦相比,大部分紫云英种质资源在豫南地区繁种具有较高的经济效益,适合移栽稻接茬.
关键词： 紫云英;资源评价;繁种能力;豫南地区
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中国转基因抗虫玉米的商业化策略
《植物保护学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：玉米是全球播种面积最大的粮食作物，事关世界粮食安全。鳞翅目和鞘翅目害虫是影响玉米产量和品质的重要因素，长期以来多数国家采取以喷施化学农药为主的防控策略，但存在较高的使用成本和环境风险等问题。作为新一代的害虫防控技术，转基因抗虫玉米于1996年开始在美国商业化种植，并迅速推广到巴西等主要玉米生产国家，成为防控草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda和欧洲玉米螟Ostrinia nubilalis等重大害虫的核心技术。该文综述了全球转基因抗虫玉米商业化的历史和防控害虫的作用，分析了美国对欧洲玉米螟和草地贪夜蛾等靶标害虫抗性治理的成功经验以及巴西等南美国家草地贪夜蛾对多种转基因抗虫玉米产生抗性的成因与教训。基于中国转基因抗虫玉米转化事件的研发现状、玉米生产模式、玉米害虫的区域发生特点和迁飞生物学等特性，提出在南方和西南山地丘陵玉米区种植包含Vip3A的多基因叠加抗虫玉米从源头防控草地贪夜蛾，在黄淮海夏玉米区种植包含Cry2A的多基因叠加抗虫玉米从源头防控棉铃虫Helicoverpa armigera，在北方春玉米区种植包含Cry1A的多基因叠加抗虫玉米从源头防控亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis，以及在双斑长跗萤叶甲Monolepta hieroglyphica发生严重的地区种植包含Cry3B、Cry34/35A的多基因叠加抗虫玉米的区域性布局模式。要实施适合中国国情的高剂量-庇护所抗性治理措施，应基于转化事件是否对害虫达到高剂量要求而注册其对应的靶标害虫种类。在当前产品的庇护所设置上，对防控草地贪夜蛾的抗虫玉米和单基因抗虫玉米应采用10%～20%结构性庇护所进行抗性治理，对防控亚洲玉米螟等害虫的多基因抗虫玉米可采用5%种子混合庇护所进行抗性治理。
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用于葵花籽过氧化值和酸价检测的油脂提取工艺优化
《食品安全质量检测学报 》 2022 北大核心
摘要：目的 优化葵花籽过氧化值和酸价检测的油脂制备工艺。方法 借助超声优化油脂制备工艺,以油脂得率为评价指标,在单因素实验的基础上,采用Plackett-Burman设计和Box-Behnken Design响应面法对影响因素进行优化,然后用优化后的工艺与国家标准方法对6种葵花籽进行油脂提取并比较分析其油脂得率、过氧化值和酸价,评价优化方法可行性。结果 优化的超声最佳提取工艺为粉碎目数70目、料液比1:4 （g:mL）、浸提时间2h、超声功率312W、超声时间37min,经验证此优化工艺提取的油脂得率比国家标准方法提高19%～25%,油脂制备时间由12 h以上缩短至2.5 h,缩短了80%的制备时间,提取效率更高,且测得的过氧化值结果更低。结论 优化的超声工艺提取油脂更多且耗时短,不仅满足了检测用油量的需求,还降低了长时间油脂提取的氧化风险,检测结果更准确,更能真实反映葵花籽的品质,经验证此方法准确可行,可用于葵花籽过氧化值和酸价检测的油脂提取制备。
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