科研产出
虎纹蛙蝌蚪致病菌株鉴定及药物敏感性分析
《广东农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:从患病虎纹蛙蝌蚪体内分离到一株优势菌,经分离纯化培养制成细菌悬液,采用浸泡方式感染蝌蚪。结果表明:该菌株能感染蝌蚪,且具有较强的毒力,可导致受试蝌蚪100%死亡;受试蝌蚪出现与自然感染相似的症状。对该菌进行形态特征和主要理化特性分析,鉴定为豚鼠气单胞菌。药敏试验结果显示:该菌对链霉素、卡那霉素、新霉素、恩诺沙星、培氟沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星等药物高度敏感;对复方新诺明、强力霉素药物等表现中度敏感;对试验的4种中草药表现耐药性。
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獐子岛贝类养殖区表层沉积物重金属分布特征及潜在生态危害评价
《海洋科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:研究了獐子岛虾夷扇贝养殖区表层沉积物中Pb、Cd、Cu、Zn等有害重金属的含量及时空分布,并采用瑞典学者Hakanson的潜在生态危害指数法对该区域重金属的分布特征和生态风险进行了分析。结果表明,獐子岛海域表层沉积物Pb、Cd、Cu、Zn含量均是在夏季较低、冬季较高,最高含量分别为9.17±2.05、0.06±0.014、6.71±2.01、24.94 mg/kg±5.21 mg/kg,远低于国家一类海域标准及Hakanson提出的全球工业化前沉积物中相应污染物的背景值。综合评价,该海域表层沉积物中重金属的污染程度不具有生态风险性,整个养殖区养殖环境良好,为优良的贝类增养殖海域。
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黄鳝AQP1 cDNA的克隆与表达分析
《华北农学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:采用RT-PCR和cDNA末端快速扩增法(RACE)分离、克隆出黄鳝水通道蛋白(Aquaporin 1,AQP1)基因全长cDNA序列,共1 134 bp,包括163 bp 5'非翻译区、789 bp阅读框以及182 bp 3'非翻译区,阅读框共编码263个氨基酸,分子量计算值为27.8 kDa,理论等电点为7.945。氨基酸组成中,正电荷残基(K,R)总数21个,负电荷残基(E,D)总数19个,极性氨基酸为115个,疏水性氨基酸60个。同源性分析表明,黄鳝与欧洲鳗的相似性高达87%,其次与底(鱼将)、鲷、犬、克氏鲤、猪、珍珠鸟、斑马鱼、半滑舌鳎、非洲肺鱼、蟾蜍、非洲瓜蟾的相似性分别为42.9%,61.2%,46.1%,42.9%,53.9%,47.9%,41.5%,40.1%,33.2%,30.8%,33.2%。生物信息学分析显示,黄鳝AQP1基因所编码的蛋白质以亲水性区域为主,具有丰富的B细胞抗原位点。定量分析结果表明,AQP1 mRNA主要在卵巢中高表达,其他组织中表达量较少。
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应用DGGE技术分析流清河湾扇贝养殖海区细菌群落结构的季节变化
《水产学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:细菌是海区生态环境的重要组成部分,为了解扇贝养殖海区细菌群落结构的季节性变化,连续11个月(2009年5月—2010年4月,2月除外)定期采集青岛流清河湾扇贝养殖海区水深0.5 m处水样,过滤收集粒径0.22~3.00μm的微生物,采用CTAB法提取样品总DNA,PCR扩增细菌16S rDNA V3-V5可变区序列,并通过DGGE技术对所得序列进行分离,结果共得到36条不同位置的条带,1月份水样细菌群落条带数最为丰富,3月份水样的细菌群落条带数最少。基于各月份DGGE条带数目和相对光密度,对11个月份样品的细菌群落多样性进行UPGMA聚类分析,结果表明,3、4和5月份细菌群落多样性具有较高的相似性,优先聚为一支,其余月份中,7月和8月,9月和12月,10月和11月分别优先聚为一支,而1月份和6月份均单独分为一支。剪切DGGE图谱中的20条主要谱带重扩增、测序,并进行BLAST比对。结果表明,20条序列与已知序列的相似性均在94%以上,这20条序列所代表的细菌分属于α-变形菌亚门(α-Proteobacteria)、β-变形菌亚门(β-Proteobacteria)、γ-变形菌亚门(γ-Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)和疣微菌门(Verrucomicrobia)。
关键词: 细菌群落结构 16S rDNA PCR-DGGE 流清河湾
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中华绒螯蟹多倍体诱导的研究进展
《江苏农业科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:水产动物多倍体诱导是一项具有重要经济价值的生物技术,其诱导方法包括物理、化学以及生物学等方法。关于水产类动物多倍体的诱导在鱼类和贝类中已有过较多的报道,相比之下对十足目甲壳类动物的研究就比较缓慢,仅在日本绒螯蟹、中国对虾、罗氏沼虾等少数虾蟹中有过报道。通过物理热休克法对河蟹进行多倍体诱导可以得到50%的三倍体率和52%的四倍体率,细胞松弛素B(CB)溶液处理河蟹受精卵来进行诱导也获得了58.18%的三倍体率和57.89%的四倍体率。将KCl溶液添加到一定盐度的海水里进行河蟹三倍体诱导试验,在探索到诱导的最佳时间和浓度后获得了100%的三倍体诱导率。本文综述多倍体诱导的原理、方法以及发展过程,对中华绒螯蟹多倍体的多种诱导方法及其诱导效果进行了比较,旨在为中华绒螯蟹多倍体诱导的研究提供参考。
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黑龙江流域渔业环境中邻苯二甲酸酯类化合物的监测
《环境与健康杂志 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:为了解黑龙江流域渔业环境邻苯二甲酸酯类(PAEs)化合物水平,通过萃取溶剂的比较和萃取方法的优化,建立了一种渔业环境水体中15种PAEs化合物的气相色谱-质谱测定方法。以10 ml苯为提取溶剂,采用液-液萃取法对水样进行提取富集,萃取后经无水硫酸钠脱水,用气相色谱-质谱选择离子模式(SIM)对目标物进行定性、定量分析。结果显示,6个采样点水样均检出邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)以及邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP),提示应密切关注该流域水体PAEs的含量。
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秦皇岛海域野生牙鲆群体遗传多样性分析
《中国水产科学 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:用18对多态性微卫星标记对采自秦皇岛海域的90尾野生牙鲆(Paralichthys olivaceus)进行遗传分析。18个微卫星位点共检测出161个等位基因;各位点等位基因数为7~11个,平均为8.9;有效等位基因为3.7~8.0,平均有效等位基因为5.9;各个位点多态信息含量为0.69~0.86,平均值为0.80;Shannon多样性指数平均值为1.9;观测杂合度(Ho)值为0.33~0.87,平均值为0.64;期望杂合度为0.74~0.89,平均期望杂合度(He)为0.84。χ2检验表明,18个位点中有9个的等位基因分布偏离了哈迪温伯格平衡(P<0.05)。研究结果表明,秦皇岛海域野生牙鲆群体遗传信息含量丰富、等位基因分布均匀,遗传多样性较高,但是,存在Hardy-Weinberg不平衡现象。
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基于分类回归树算法的东南太平洋智利竹筴鱼渔场预报
《中国海洋大学学报(自然科学版) 》 2012 北大核心
摘要:为了提高智利竹筴鱼渔场预报水平和满足渔业捕捞生产的需要,利用2002—2008年的东南太平洋公海海域捕捞的中国大型拖网渔船共计15艘的生产统计资料,以及海洋环境数据(包括海表温度、叶绿素a浓度、表温距平、叶绿素a浓度距平、海表温度梯度强度和海面高度异常等数据),基于CART的算法,构建了智利竹筴鱼渔场决策树预报模型。用含1 114条记录的数据集对模型进行训练,并采用ROC方法对该模型诊断中心渔场的准确性进行了分析。最后将该模型应用于2009年各月份的智利竹筴鱼中心渔场预报,并与实际渔场位置进行了对比,结果显示预报渔场与实际生产位置基本一致,表明利用CART决策树方法建立智利竹筴鱼渔场预报模型是可行的。
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转红色荧光蛋白基因唐鱼肌肉中抗生素标记基因(NPTⅡ)检测和表达量分析
《农业生物技术学报 》 2012 北大核心 CSCD
摘要:为了获得有特色的观赏鱼,本实验室在2003年将含有海葵红色荧光蛋白基因的表达载体(同时含有标记基因新霉素磷酸转移酶基因(NPTⅡ))转入唐鱼(Tanichthys albonubes)的受精卵,获得转红色荧光蛋白基因唐鱼,对其外源标记基因NPTⅡ的表达产物和存在时间进行分析,为评价转基因鱼的生物安全提供依据。本实验对转基因唐鱼和非转基因唐鱼肌肉中抗生素标记基因(NPTⅡ)进行PCR检测和NPTⅡ表达产物的免疫检测试剂条检测,结果显示,转基因唐鱼检测到NPTⅡ基因和表达产物,而非转基因唐鱼中均没检测到该基因和表达产物存在。同时在唐鱼死亡后(水温20~25℃),应用酶联免疫吸附测定法(ELISA)对死亡0(鲜活肌肉)、24、48、72、96、120和144h组的转基因唐鱼肌肉中NPTⅡ蛋白的含量进行定量检测,结果表明,转基因唐鱼鲜活肌肉中NPTⅡ蛋白在肌肉中的含量为9.12ng/g,随着转基因唐鱼死亡时间增加肌肉中NPTⅡ蛋白含量逐渐减少,死亡96h组转基因唐鱼肌肉中NPTⅡ蛋白已经接近为0。结果表明,转基因唐鱼肌肉中NPTⅡ蛋白在自然环境中容易降解,推测其对环境安全隐患相对较低。
关键词: 转基因唐鱼 红色荧光蛋白 新霉素磷酸转移酶 酶联免疫吸附测定
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