科研产出
鸡原始生殖细胞转染条件优化
《遗传 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为获得鸡原始生殖细胞（primordial germ cells,PGCs）的最佳转染效率,本研究比较不同质粒用量和不同细胞数在3种转染试剂（Lipofectamine 2000、3000和LTX&Plus Reagent）中PGCs的转染效率,利用荧光激活细胞分选技术（fluorescence activated cell sorting technology,FACS）辅助优化Lipofectamine 3000转染试剂,经FACS进一步分选获得带绿色荧光蛋白（GFP）的PGCs,继续培养3周后,移植回注到受体鸡胚中,移植3.5 d后分离性腺拍照观察。结果显示,转染试剂Lipofectamine 3000的转染效率最高,质粒、Lipofectamine 3000转染试剂和PGCs细胞数的配比为3μg:4μL:0.5×104个,转染5h转染效率最高,达到23.4%,与现有的研究结果相比提高了2倍以上。移植回注PGCs到受体鸡胚中,荧光显微镜观察到鸡胚性腺中有GFP阳性细胞。本研究综合考虑转染试剂、质粒用量和细胞数量的影响因素以优化PGCs的转染条件,为高效制备转基因鸡及基因编辑鸡的研究奠定基础。
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广东主要茶区春季杂草群落调查与区域差异分析
《中国农学通报 》 2021 CSCD
摘要：探明广东茶园春季杂草基本情况,为茶园杂草防控提供基础数据.2020年3-5月,在广东省粤东、粤西、粤北3个茶叶主产区31个茶园共620块样方开展茶园杂草群落调查,采用七级目测法,记录样方杂草种类及生长优势等级.调查共发现杂草313种,出现频度高于10%的杂草有126种,其中菊科杂草23种、禾本科12种、茜草科8种、蔷薇科7种、唇形科6种、蓼科5种、豆科4种,以上7个科共包含杂草65种,占据126种杂草的51.5%.出现频度前10杂草分别为小蓬草Erigeron canadensis(83.87%)和菝葜Smilax china(80.65%)、鸭跖草Commelina communis(77.42%)、积雪草Centella asiatica(74.19%)、野茼蒿Crassocephalum crepidioides(74.19%)、酢浆草Oxalis corniculata(74.19%)、地菍Melastoma dodecandrum(70.97%)、鬼针草Bidens pilosa(70.97%)、长萼堇菜Viola inconspicua(67.74%)、一点红Emilia sonchifolia(67.74%).生长优势度前10杂草分别为小蓬草(17.42%)、鬼针草(17.19%)、鸭跖草(17.10%)、酢浆草(15.11%)、假臭草Praxelis clematidea(12.58%)、白茅Imperata cylindrica(12.19%)、野茼蒿(12.06%)、阔叶丰花草Spermacoce alata(10.90%)、红花酢浆草Oxalis corymbosa(10.65%)、地菍(9.81%).粤东、粤西和粤北茶区优势杂草存在显著差别,粤东地区以鬼针草、小蓬草、华南鳞盖蕨Microlepia hancei等杂草为主;粤西茶区以阔叶丰花草、微甘菊Mikania micrantha、鸭跖草、假臭草等杂草为主;粤北茶区以小蓬草、空心泡Rubus rosifolius、白茅为主.调查初步探明广东主要茶区春季杂草分布状况,为各茶区杂草防控提供数据支持.
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三系杂交稻新组合五优738
《杂交水稻 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：五优738是广东省农业科学院水稻研究所利用不育系五丰A与恢复系R738配组育成的感温型三系杂交水稻新组合,具有丰产性好、食味较好、抗稻瘟病、抗倒力强等特点,2019年8月通过广东省农作物品种审定委员会审定。
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假单胞菌胞外酶降解黄曲霉毒素B1的酶学性质
《微生物学通报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【背景】黄曲霉毒素B1 （Aflatoxin B1,AFB1）毒性强、污染普遍,目前尚无有效的防治办法。【目的】为了发掘高效的AFB1降解菌并探索其降解特性,对红树林污泥样品中一株AFB1降解菌株（HAI2）的酶学性质进行分析。【方法】以AFB1结构类似物为唯一碳源,筛选出一株高效的AFB1降解菌,利用16S rRNA基因测序结果鉴定菌株,并结合HPLC研究菌株对AFB1的降解特性。【结果】HAI2的16S rRNA基因序列与恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida,NR 113651.1）的相似性高达99.85%,其主要降解AFB1的活性物质为胞外蛋白质,HAI2-AFB1降解酶的最适pH值为7.0,最适温度为37°C,Fe2+、Ca2+和Zn2+会抑制AFB1的降解率,Cu2+和Mn2+可以提高AFB1的降解率。HAI2上清液对100 ng/mL的AFB1降解24 h的降解率为71.52%。此外,P.putida HAI2还可抑制被黄曲霉菌感染的玉米中AFB1的合成,AFB1含量可减少63.46%。【结论】假单胞菌P.putida HAI2具有较高的降解AFB1能力,其主要降解活性物质为胞外蛋白,在食品和饲料行业具有较大的应用前景。
关键词： 黄曲霉毒素B1 筛选 假单胞菌 酶学性质 胞外蛋白
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饲料中添加黑水虻幼虫粉对加州鲈血清代谢物、抗氧化与免疫指标及肠道组织结构的影响
《动物营养学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究饲料中添加黑水虻幼虫粉替代鱼粉对加州鲈血清代谢物、抗氧化与免疫指标和肠道组织结构的影响.选择初始体重为(4.9±0.1)g的加州鲈鱼苗525尾,随机分为5组,每组3个重复,每个重复35尾.以黑水虻幼虫粉替代鱼粉,分别投喂G0(基础饲料,鱼粉添加比例为45.0%)、G7.5(替代鱼粉比例为7.5%)、G15.0(替代鱼粉比例为15.0%)、G22.5(替代鱼粉比例为22.5%)和G30.0(替代鱼粉比例为30.0%)5种等氮等脂饲料,养殖周期为62 d.结果表明:与G0组相比,G15.0~G30.0组血清白蛋白含量显著升高(P<0.05);G22.5和G30.0组血清球蛋白含量显著升高(P<0.05),胆固醇含量和谷草转氨酶活性显著降低(P<0.05);G30.0组血清高密度脂蛋白胆固醇含量显著增加(P<0.05);G7.5~G30.0组血清谷胱甘肽过氧化物酶活性和补体3含量显著增加(P<0.05);G15.0~G30.0组血清酸性磷酸酶活性显著升高(P<0.05);G7.5~G30.0组肠道组织有不同程度损伤,且随着黑水虻幼虫粉替代鱼粉比例越高,肠道组织损伤越严重.综上所述,饲料中添加黑水虻幼虫粉替代鱼粉提高了加州血清抗氧化和免疫指标,但不同程度地损伤了加州鲈肝脏功能和肠道组织结构,建议饲料中应当谨慎添加.
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基于CRISPR/Cas9基因编辑技术靶向敲除OsFAD2创制高油酸水稻突变体
《广东农业科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】水稻OsFAD2编码脂肪酸脱饱和酶,调节油酸（C18∶1）向亚油酸（C18∶2）转化,该基因突变后可提高水稻的油酸含量。为了创制高油酸水稻突变体并助力稻米油发展,利用CRISPR/Cas9技术对OsFAD2进行定点编辑。【方法】以日本晴（粳稻）愈伤组织为材料,利用含有CRISPR/Cas9-FAD2-sgRNA载体的农杆菌介导获得转基因植株,Sanger测序与荧光定量PCR鉴定阳性植株,最后利用气相色谱质谱（GC-MS）检测稻米籽粒脂肪酸含量变化。【结果】靶点序列测序检测表明,有3株OsFAD2敲除植株在T0代产生了碱基变异,但是仅有1株不存在脱靶现象。随后阳性植株种子被扩繁至T1代,使得OsFAD2突变序列纯和、稳定,荧光定量PCR检测表明OsFAD2表达量比野生型植株显著减少。利用T1代转基因植株进行种子脂肪酸组分检测表明,敲除OsFAD2导致籽粒油酸含量显著上升约30%。【结论】利用CRISPR/Cas9技术对水稻OsFAD2编码区序列进行靶向敲除并获得了高油酸水稻突变体,为后续高油酸稻米育种提供种质资源。
关键词： 高油酸水稻 CRISPR/Cas9技术 脂肪酸 种质创新 生物技术
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功能性水稻研究进展及前景展望
《广东农业科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：功能性水稻的开发与推广应用,对改善我国以稻米为主食人群的营养与健康状况、促进我国农业产业结构转变、提高农民种粮效益及助推乡村振兴具有重要意义.功能性水稻主要包括有色稻、低谷蛋白水稻、高抗性淀粉水稻、富微营养水稻和药物制造生物反应器水稻等5大类.有色稻由于种子果皮积累花色素苷而呈紫色或红褐色,有红米和黑米两大类,分别受2个和3个基因控制,是体弱者药食同源的重要滋补食品,国内已育成一大批有色稻品种推广应用.低谷蛋白水稻由于稻米谷蛋白含量低,适于肾病患者作主粮使用,目前中国和日本已育成多个品种用于商业化开发应用.高抗性淀粉水稻由于有部分淀粉无法被人体淀粉酶分解而不能被肠道吸收,可降低糖尿病患者餐后血糖峰值,已成为糖尿病患者重要的主食,目前国内已育成多个品种推广应用.富微营养水稻由于稻米特种维生素、有益微量元素等含量高而有益于不同缺素症患者治疗与保健,国内外已育成以"黄金大米"为代表的多个富微营养水稻品种.药物制造生物反应器水稻利用水稻为药用重组蛋白、多肽或其他生物活性物质生产平台,合成与提取目标功能成分物质,目前国内外都有成功报道,并已尝试进行商业化开发应用.全球对功能性水稻的需求日益增大,功能性水稻研究具有广阔前景.功能性水稻育种未来将从功能的单一型向复合型发展,由保健型向保健与辅助疗效相结合转变.多组学技术和常规育种相结合的方法,不断挖掘与创制新种质以培育功能性水稻新品种,是功能性水稻研究的发展方向.
关键词： 功能性水稻;有色稻;低谷蛋白水稻;高抗性淀粉水稻;富微营养水稻;生物反应器;育种
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1~63日龄快速型黄羽肉鸡硫胺素需要量研究
《动物营养学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究饲粮添加不同水平硫胺素对1~63日龄快速型黄羽肉鸡生长性能、抗氧化能力、肉品质和风味的影响,以确定不同生长阶段黄羽肉鸡硫胺素需要量.试验采用单因素随机分组试验设计,分别选取1、22、43日龄快速型岭南黄羽肉鸡进行3个试验,每个试验的饲养周期为21 d.试验1选取1日龄黄羽肉鸡公雏1920羽,随机分为8组,每组6个重复,每个重复40羽鸡;试验2选取22日龄公鸡1440羽,随机分为8组,每组6个重复,每个重复30羽鸡;试验3选取43日龄公鸡1440羽,分组同试验2.1~21日龄、22~42日龄和43~63日龄各组饲粮硫胺素添加水平分别为0(对照)、0.6、1.2、1.8、2.4、3.0、3.6和4.2 mg/kg.试验期间试验鸡地面平养,自由采食颗粒饲料和自由饮水.结果表明:1)随着饲粮硫胺素水平的升高,1~21日龄试鸡平均日采食量呈线性增加(P<0.05),平均日增重呈线性和二次曲线增加(P<0.05),料重比呈线性和二次曲线降低(P<0.05),且平均日增重(r=0.779,P<0.05)和料重比(r=-0.688,P<0.05)均呈显著的剂量效应关系;饲粮硫胺素水平对22~42日龄和43~63日龄试鸡平均日采食量、平均日增重和料重比均无显著影响(P>0.05).2)21日龄和42日龄试鸡血浆还原型谷胱甘肽含量和还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽值随饲粮硫胺素水平的升高呈线性增加(P<0.05),且呈显著的正相关(P<0.05).与对照组相比,当饲粮硫胺素添加水平为3.6 mg/kg时,21日龄试鸡血浆总抗氧化力显著提高(P<0.05),血浆丙二醛含量显著降低(P<0.05).3)饲粮硫胺素水平对21日龄、42日龄和63日龄试鸡大脑丙酮酸脱氢酶和α-酮戊二酸脱氢酶活性均未产生显著影响(P>0.05).4)随着饲粮硫胺素水平的升高,63日龄试鸡胸肌剪切力呈线性降低(P<0.05),鸡肉风味评分呈线性提高(P<0.05).综上所述,饲粮添加硫胺素可改善黄羽肉鸡生长性能、抗氧化能力和肉品质;分别以平均日增重和料重比为效应指标,通过二次曲线回归方程估测得到,1~21日龄、22~42日龄和43~63日龄快速型黄羽肉鸡饲粮硫胺素适宜水平分别为3.2、2.4、1.8 mg/kg和3.0、2.0、1.6 mg/kg.
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广薯87鲜薯和蒸薯挥发性风味成分分析
《广东农业科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：[目的]研究广薯87在蒸制前后挥发性风味成分的变化情况,为鲜食型甘薯风味物质改良提供参考.[方法]采用顶空固相微萃取(HS-SPME)和气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)技术对广薯87鲜薯及蒸薯的挥发性风味成分进行比较和分析.[结果]广薯87鲜薯检测出71种挥发性物质,主要包括醛类(40.52%)、萜类(16.18%)、杂环类(15.17%)、醇类(11.59%)、酯类(7.94%)、芳烃类(4.49%)、酮类(1.62%)化合物等;蒸薯检测出69种挥发性物质,主要包括醛类(47.36%)、芳烃类(21.39%)、萜类(10.33%)、卤代烃类(7.07%)、醇类(3.24%)、酮类(2.64%)、酯类(2.61%)化合物等.其中,鲜薯及蒸薯中相对含量最高的挥发物均为苯乙醛,含量分别为16.78%、19.92%,但蒸煮前后相对含量差异不显著.对所检测出的挥发代谢物进行差异筛选,共筛选出47种差异明显的代谢产物.上调的代谢物有14种,下调的代谢物有33种,其中上调倍数最高的化合物为氯乙酸2-苯乙基酯,上调倍数为4.4;下调倍数最高的化合物为2-丙基-1H-咪唑,下调倍数高达13.49.[结论]结合相对含量及差异分析,广薯87蒸制后相对含量显著上升的主要挥发物成分为2,4-二叔丁基苯酚和氯乙酸2-苯乙基酯,是最有可能构成广薯87蒸薯特征风味的挥发物.
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