科研产出
海洋杀虫细菌JAAS01发酵条件优化及诱变选育研究
《江苏农业科学 》 2005 北大核心
摘要:在JAAS01单因子试验基础上,用正交试验L9(34)对其发酵培养基进行优化。优化培养基组成为:可溶性淀粉3.5%、蛋白胨2.5%、碳酸钙0.2%、陈海水75%、蒸馏水25%,pH值7.5。28℃、200r/min摇床震荡培养3d,发酵液对棉铃虫初孵幼虫的杀虫活性为67.33%。采用硫酸二乙酯(DES)和60Coγ射线两种不同的处理方式,对初发菌株JAAS01细胞进行诱变,经棉铃虫活体筛选获得突变株JAAS01D,该突变株发酵液杀虫活性达77.78%。传代试验表明,该突变株遗传性能较稳定。
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Cry1 Ac基因载体构建及其在枯草芽孢杆菌中的杀虫活性表达
《昆虫学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要:根据苏云金芽孢杆菌BacillusthuringiensisHD_73基因Cry1Ac和枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis木糖诱导型启动子PxylR序列,分别设计2对特异引物Cry1AcFR和PxyFR,扩增获得了完整的启动子PxylR和Cry1Ac基因序列,进一步以上述产物混合物为模板,以PxyFCry1AcR作引物进行重迭PCR,获得了载体PxylR_Cry1Ac,经SphⅠ和BamHⅠ完全酶切后,将PxylR_Cry1Ac插入大肠杆菌_苏云金芽孢杆菌穿梭载体pHT315,重组表达质粒pCry1Ac315转化枯草芽孢杆菌感受态细胞。工程菌株质粒酶切电泳分析、SDS_PAGE电泳分析和杀虫生物活性测定结果证实了Cry1Ac基因的导入及其在枯草芽孢杆菌JAAS01D中的有效表达。
关键词: 苏云金芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌 重迭PCR Cry1Ac基因 杀虫活性
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甲磺隆和草甘膦对空心莲子草乙酰乳酸合酶活性和莽草酸含量的影响
《植物保护学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要:为研究甲磺隆和草甘膦对空心莲子草的作用机理,探索其最佳的使用技术,采用有效成分为30 g/hm~2和60 g/hm~2的甲磺隆处理空心莲子草,能明显抑制其茎和根乙酰乳酸合酶的比活性;有效成分为1537.5g/hm~2和3075g/hm~2的草甘膦处理则能明显抑制空心莲子草莽草酸含量的积累;施用甲磺隆和草甘膦对空心莲子草生长的抑制作用随药剂浓度的提高而增大。二次施用草甘膦(间隔30天)的结果表明,低剂量处理对抑制空心莲子草根组织莽草酸含量的积累更明显。
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细菌CpG DNA对鸡接种禽流感病毒H9亚型灭活苗的免疫增强作用
《中国兽医学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要:为了探讨细菌核酸对 H9亚型禽流感病毒灭活疫苗的免疫增强作用 ,将 1 5日龄蛋用公鸡 1 2 0只随机分为 4组 ,即空白组、抗原组、细菌核酸佐剂组及白油佐剂组 ,每组 30只。于 2 8日龄时 ,细菌核酸佐剂组以灭活 H 9亚型禽流感病毒作为抗原 ,大肠杆菌牦牛株核酸作为佐剂 ,免疫接种于试验鸡 ,用 XTT法检测 T、B淋巴细胞增殖反应 ,并用血凝与血凝抑制法检测血清抗体水平。结果显示 ,在细菌核酸佐剂组 ,鸡的血凝抑制抗体水平和 T、B淋巴细胞增殖反应均显著高于抗原单独免疫组 (P<0 .0 5 ) ,而免疫组均显著高于空白组 (P<0 .0 5 ) ;细菌核酸佐剂组的抗体滴度峰值略高于白油佐剂组 (P>0 .0 5 ) ,但 T、B淋巴细胞增殖指数峰值显著高于白油佐剂组 (P<0 .0 1 )。结论认为 ,大肠杆菌牦牛株核酸可显著增强免疫鸡对禽流感病毒 H9亚型灭活疫苗的免疫反应 ,其免疫增强效果略高于常规油佐剂
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转Bt基因棉田害虫和天敌组成及优势类群时序动态
《棉花学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要:在系统调查棉田节肢动物的基础上,就长江流域下游棉区种植转Bt基因棉对棉田害虫和天敌组成、数量以及时序动态的影响进行了分析。结果表明,转Bt基因棉田和常规棉田基本接近,均以棉蚜为害虫优势种,天敌优势种为草蛉、龟纹瓢虫、三突花蛛。按照营养关系分析表明,转Bt基因棉田和常规棉田均以植食性类群在营养层中占绝对优势,其次是捕食性天敌类群,而寄生性天敌较少;刺吸类害虫是植食性害虫的优势功能集团,瓢虫类、蜘蛛类和草蛉类为优势捕食性类群。转Bt基因棉能够显著减少棉田鳞翅目等靶标害虫类群的发生,而对其它非靶标害虫如刺吸类害虫以及棉田天敌发生没有显著影响。
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与多花黑麦草抗灰叶斑病相关基因紧密连锁的RGA-CAPS标记筛选
《江苏农业学报 》 2005 北大核心 CSCD
摘要:以多花黑麦草抗灰叶斑病品种Sach iaoba、感病品种M inam iaoba及其杂种F1分离群体为材料,采用接种鉴定和分群分析法(BSA)进行抗病基因类似物限制性内切酶酶切多态性(RGA-CAPS)筛选。得到与多花黑麦草抗灰叶斑病相关基因紧密连锁的RGA-CAPS标记,该标记与灰叶斑病抗性相关基因紧密连锁,连锁距离为4.94cM。测序和BLASTX查询结果显示,该RGA与水稻的1个NBS-LRR类抗性蛋白(Genbank/NCB I:AAT81729.1)同源性高达67%,序列分析结果显示,对应于抗、感病性的该RGA片段长度均为361 bp,两片段之间存在多个单核苷酸差异(SNPs)。利用SNPs重新设计引物,并应用新设计引物成功地将RGA-CAPS标记转换成共显性STS标记。
关键词: 多花黑麦草 灰叶斑病 RGA-CAPS标记 STS标记
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