科研产出
笋壳鱼源柱状黄杆菌的分离鉴定及致病性和药物敏感性
《南方农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】明确2022年5月广东省珠海市某养殖场笋壳鱼烂鳃病的病原，为防控笋壳鱼相关病害提供参考依据。【方法】从患病笋壳鱼的腐烂鳃丝、肾脏和体表病灶等部位分离细菌，并纯化优势菌落，通过PCR方法扩增分离菌株的16S rRNA序列并进行测序分析，同时构建该基因的系统发育进化树，鉴定患病笋壳鱼的病原菌。选取代表菌株Om2202进行毒力基因检测和斑马鱼人工感染试验。测定中草药和消毒剂对分离菌株Om2202的抑菌和杀菌活性，分析菌株Om2202的致病性和药物敏感性。【结果】从患病鱼鳃部和肾脏分离到的优势菌落呈细长的弯曲或直杆状，菌体表面未见鞭毛和菌毛，有荚膜，有胞外分泌物；通过特异性PCR检测和16S r RNA序列的系统发育进化树分析，结合菌落形态分析结果，确定分离菌株Om2202为柱状黄杆菌（Flavobacterium columnare）。毒力基因检测结果显示，菌株Om2202携带gldD、hly、cslA、ompA和chiA等11种毒力相关基因。斑马鱼致病性试验结果显示，菌株Om2202对斑马鱼具有较强致病性，其LC50为7.50×10~6CFU/mL。药物敏感性试验结果显示，Om2202菌株对芦荟大黄素、大黄素和苯扎溴铵等药物敏感，对连翘精油、二氧化氯、蛋氨酸碘和过氧化钙等药物不敏感。【结论】引起笋壳鱼烂鳃的主要致病菌为柱状黄杆菌，属于广泛流行的基因Ⅱ型菌株，且携带大量的毒力相关基因，对斑马鱼具有较强的致病性，可用芦荟大黄素、大黄素和苯扎溴铵等药物进行防控。
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江汉平原长湖浮游植物初级生产力的季节性变化及其驱动因子
《湖泊科学 》 2023 EI 北大核心 CSCD
摘要：为探究长江中下游富营养化浅水湖泊的浮游植物初级生产力季节性演替特征及其驱动因子,本研究于2020年4月(春)、8月(夏)、10月(秋)及2021年1月(冬)对湖北长湖浮游植物进行采样调查,同时运用黑白瓶测氧法及VGPM模型估算法分别估算了其浮游植物生产力水平,并探究驱动初级生产力季节性变化的主要环境因子.结果显示,4个季节共鉴定出浮游植物194种,其中绿藻门(95种,49%)和硅藻门(40种,21%)居绝对优势地位;黑白瓶法测得浮游植物水柱总生产力(Pt)季节变化为:夏季((1841.24±345.93)mg C/(m2·d))>秋季((1324.14±208.34)mg C/(m2·d))>春季((847.50±247.72)mg C/(m2·d))>冬季((711.43±133.52)mg C/(m2·d)),其中 M2 站位在夏季采样时(2424.66 mg C/(mi2·d))水柱总生产力最高;在垂直空间上,浮游植物总生产力(GPP)及净生产力(NPP)随水深增加而逐渐变小.基于VGPM 法估算的初级生产力(PPeu)季节性分布为夏季((3713.18±900.30)mg C/(m2·d))>秋季((2643.62±1062.48)mg C/(m2·d))>春季((2477.13±669.75)mg C/(m2·d))>冬季((708.07±390.40)mg C/(m2·d)),空间分布特征呈现海子湖区>马洪台湖区>圆心湖区的趋势.相关性分析结果显示:长湖浮游植物初级生产力(P1和PPeu)相关系数为88.2%,具有极显著相关性,它们与浮游植物密度以及叶绿素a(Chl.a)浓度均具有显著相关性.多元逐步回归分析显示,PPeu主要受Chl.a、水温、pH、总悬浮物和硝态氮的影响,而Pt则可以通过电导率、水温和溶解氧来进行预测.该结果可为长江中下游湖泊水体富营养化以及渔业生产潜力评估奠定基础.
关键词： 长湖 浮游植物生产力 叶绿素a 黑白瓶法 VGPM模型
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深远海设施养殖装备技术进展与展望
《上海海洋大学学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：为加快推进中国深远海养殖的健康可持续发展,促进海水养殖空间拓展和海洋渔业产业转型升级,阐述中国深远海养殖设施装备技术的发展现状,列举重力式网箱、桁架类网箱、养殖工船等主要深远海养殖模式的技术进展以及典型设施.对应深远海养殖生产体系构建的技术要求,分析阐明国内外在品种培育、苗种生产、养殖设施、生产管理装备等方面的科技创新进展与发展趋势.进一步围绕中国深远海养殖如何实现可持续健康发展,剖析阐明目前主要存在良种缺乏、学科融合不足、设施设备技术成熟度不够、设计建造缺少规范等问题,并在此基础上提出中国深远海养殖要实现安全、养多、养好以及走深走远,未来在品种、设施、设备、产业链等方面需要突破的技术关键点,旨在为加快推进中国深远海养殖高质量发展提供参考.
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干露胁迫对鼠尾藻生理生化影响的研究
《渔业科学进展 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：鼠尾藻（Sargassumthunbergii）集生于中潮带和低潮带岩石上，在高、中潮带的水陆或石沼中，有的甚至在低潮时较长时间暴露于日光下。低潮露空下的干露胁迫是影响鼠尾藻生存的关键因子。本研究采集野生鼠尾藻为实验材料，在培养箱中分别失水干露0、1、3、6 h，并在海水中恢复培养，测定不同胁迫时间下藻体的失水率、叶绿素荧光参数和生化参数。结果显示，不同大小的鼠尾藻干露胁迫不同时间后的失水率显著不同，胁迫时间越短，藻体越大，失水率越低，大藻体鼠尾藻的保水能力高于小藻体；干露胁迫使鼠尾藻的叶绿素荧光值显著降低，同株鼠尾藻不同部位对干露胁迫的耐受程度显著不同，梢部耐受能力较差，基部耐受能力较强，小藻体和大藻体的梢部伤害较大，不能恢复，鼠尾藻基部可恢复正常生理状态，干露胁迫时，鼠尾藻以非调节性能量耗散机制为主；干露胁迫时，藻体梢部通过抗氧化酶类[（抗超氧阴离子自由基（ASAFR）、超氧化物歧化酶（SOD））和非抗氧化物质（可溶性糖、脯氨酸）共同作用来应对胁迫，藻体基部主要是通过上调蛋白、可溶性糖和脯氨酸等含量抵抗胁迫。高中潮带的鼠尾藻较易处于高温、强光和干露失水叠加的胁迫状态，同时，又因外部形态和生活环境的不同，藻体各部分的生理生化特性也有一定的差异。本研究探讨了鼠尾藻干露胁迫下的生理生化状态，对研究鼠尾藻抵抗环境胁迫的生态适应性具有重要的指导意义。
关键词： 鼠尾藻 干露胁迫 失水率 叶绿素荧光参数 生化特性
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利玛原甲藻产毒差异及影响因素研究进展
《海洋科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：利玛原甲藻（Prorocentrumlima,P.lima）是全球广泛分布的有害赤潮藻类,也是腹泻性贝毒（DiarrheticShellfish Toxins,DSTs）的主要产生藻之一,其产生的DSTs给海洋环境、渔业及人类健康带来了严重的危害。研究发现,全球范围内不同P.lima藻株的产毒能力具有显著差异,多种环境因子如营养盐、盐度、光照等因素均会对P.lima的产毒能力产生影响,从而决定了不同区域贝类中DSTs的风险。本文比较分析了全球范围内P.lima的产毒差异,并重点解析了环境因子对其产毒能力的影响,对于全球范围内P. lima产毒能力差异及影响因素形成了较为系统的科学认知,对未来开展P. lima海洋生态学及食品安全研究具有重要的借鉴意义。
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基于DNA条形码技术的珠江口春季鱼卵和仔稚鱼种类组成和分布特征的研究
《海洋学报(中文版) 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：采用线粒体COⅠ和12S rRNA基因片段作为DNA条形码,分析珠江口春季鱼卵和仔稚鱼种类组成和分布特征,并探究两种条形码在鱼卵和仔稚鱼种类鉴定中的适用性.研究共扩增样本391个,成功鉴定的鱼卵和仔稚鱼共7目25科42属60种(2种未鉴定到种).其中,以鲈形目(Perci-formes)种类和数量最多,种类数占比为51.6%,数量占比为47.91%;其次为鲱形目(Clupeiformes),种类数占比为25%,数量占比为34.56%.优势种10种,其中凤鲚(Coilia mystus)优势度最高,为0.071;棘头梅童鱼(Collichthys lucidus)最低,为0.014.COⅠ和12S rRNA基因片段扩增结果显示,鱼卵和仔稚鱼12S rRNA基因片段扩增成功率(95.60%)明显高于COⅠ基因(43.22%).遗传距离和ABGD分析显示,COⅠ基因种内遗传距离为0~0.005(平均0.003),种间遗传距离为0.061~0.376(平均0.253),两者间存在明显的"条形码间隙",ABGD划分结果与数据库比对结果一致;12S rRNA基因种内遗传距离为0~0.011(平均0.007),种间遗传距离为0.007~0.487(平均0.283),龟鰉(Chelon haematocheila)和前鳞龟鰉(Chelon affinis)种间遗传距离与种内遗传距离不形成"条形码间隙",ABGD将其划分为同一种.系统发育分析显示,在种的分类阶元,所有物种均能聚为独立分支,得到有效区分.综上,线粒体COⅠ和12S rRNA条形码可有效鉴定珠江口大多数鱼卵和仔稚鱼,但是COⅠ基因扩增成功率较低,12S rRNA基因部分近缘物种存在区分困难的情况,两种基因结合使用更能提高鱼卵和仔稚鱼种类鉴定的成功率和准确性.
关键词： COⅠ基因 12S rRNA基因 鱼卵和仔稚鱼 DNA条形码
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淮河荆涂峡鲤、长吻鮠国家级水产种质资源保护区生态健康评价
《南方水产科学 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：评价水域生态健康状况可判别水生态恢复成效，是水环境管理的有效手段。为探究淮河荆涂峡鲤（Cyprinus carpio）、长吻鮠（Leiocassis longirostris）国家级水产种质资源保护区的水生态健康状况，根据2020年浮游植物群落结构的调查结果，结合形态功能群分类法，构建了基于浮游植物生物完整性指数的保护区生态健康评价体系。选择受干扰较小的采样点为参照点，对候选参数进行非参数检验和相关性分析，确定最终的评价参数，采用比值法确定分级评价标准，对保护区水体进行健康评价。结果显示，浮游植物优势功能群演变趋势为Ⅲ+Ⅳ+Ⅴ （春季）→Ⅲ+Ⅳ+Ⅴ+Ⅵ （夏季）→Ⅴ+Ⅵ （秋季）→Ⅳ+Ⅴ+Ⅵ （冬季），除核心区的优势功能群为Ⅲ+Ⅳ+Ⅴ+Ⅵ外，实验区、涡河和淮河干流优势功能群均为Ⅲ+Ⅳ+Ⅴ+Ⅵ。保护区68.06%的样点评价结果为“一般”及以上，总体水生态健康状况良好，具体表现为冬季优于秋季、夏季次之、春季最差的时间格局，以及淮河干流优于涡河、实验区优于核心区的空间格局。
关键词： 种质资源保护区 浮游植物 水生态健康评价 生物完整性指数 MBFG分类法
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甲醇对花鲈动脉球和脑细胞系细胞形态、活力及凋亡相关基因的影响
《南方农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：[目的]从细胞水平探究甲醇对花鲈(Lateolabrax maculatus)不同细胞系的影响,为揭示微塑料(甲醇为溶剂)对鱼类细胞的毒理作用打下基础.[方法]在体外分别以1%、3%、5%、7%、9%和11%的甲醇处理花鲈动脉球和脑细胞系细胞,倒置显微镜观察细胞形态变化,MTT检测细胞活力,通过实时荧光定量PCR检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase9)、Bcl2关联X蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)等细胞凋亡相关基因,并采用Caspase3活性检测试剂盒检测Caspase3活性.[结果]当甲醇体积分数超过7%后,花鲈动脉球细胞系细胞变圆缩小,失去贴壁能力,且出现死亡细胞;细胞活力呈显著降低趋势(P<0.05,下同),Caspase3、Caspase9、Bax和Bcl-2基因相对表达量均显著上调,Caspase3活性极显著升高(P<0.01,下同).当甲醇体积分数超过1%后,花鲈脑细胞系细胞间出现空隙且细胞有回缩趋势,贴壁细胞数量明显减少,存在大量悬浮的死亡细胞;细胞活力显著降低,细胞凋亡相关基因的相对表达量均呈显著上调趋势,且随甲醇体积分数的增加其相对表达量呈上升趋势;甲醇对花鲈脑细胞系细胞Caspase3活性的影响呈浓度依赖性,即细胞Caspase3活性随甲醇体积分数的增加而升高,经5%~11%甲醇处理后极显著升高.[结论]甲醇可显著上调花鲈动脉球和脑细胞系细胞中的Caspase3、Caspase9、Bax和Bcl-2基因表达水平,并提高Caspase3活性.甲醇对不同种类细胞的毒性不同,尤其对脑细胞的毒性更强.因此,在选择甲醇为微塑料溶剂时应根据不同种类细胞配制不同的安全浓度.
关键词： 花鲈 甲醇 动脉球细胞 脑细胞 细胞活力 细胞凋亡 Caspase3活性
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大银鱼全基因组简单重复序列标记开发及在不同生态型群体中的检验
《浙江大学学报(农业与生命科学版) 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：利用Krait软件对2020年公布的拼接程度更高的大银鱼全基因组中完美型微卫星的分布特征进行分析，并据此开发具有多态性的微卫星DNA（又称简单重复序列）标记。结果显示：在大银鱼全基因组内共获得587 554个完美型微卫星位点，序列总长度为11 803 017 bp，占全基因组长度的2.53%；在6种重复类型的微卫星中，二核苷酸数量最多（401 585个，占比68.35%）。针对微卫星位点设计的99对引物中，有39对具有多态性，选择其中多态性较好的14个微卫星标记分别对大银鱼洄游型群体、陆封型群体及移植型群体中选择的1个具有代表性的群体进行检验，结果表明，多态性较好的14个微卫星标记在3个具有代表性的群体中均能进行有效扩增。对3个群体的遗传多样性和遗传结构进行分析发现，洄游型群体（崇明岛群体）遗传变异丰富（平均期望杂合度为0.614、平均多态信息含量为0.576），与淡水群体[太湖群体（陆封型）和连环湖群体（移植型）]分属于2个不同的遗传群组，两者间具有较大的遗传距离和极高的遗传分化水平（遗传分化指数高于0.25,P＜0.05）；淡水群体（太湖和连环湖群体）的遗传变异相对匮乏，2个群体间的遗传距离较小，虽存在显著的遗传分化，但遗传分化水平较低（遗传分化指数为0.102,P＜0.05）。本研究结果表明，洄游型群体具有潜在的种质资源保护价值，可为后续大银鱼全基因组微卫星标记开发和遗传图谱构建等提供依据，并为后续更大范围的群体种质资源评估与管理提供参考。
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真空冷藏条件下罗非鱼内源蛋白酶对鱼片质构劣化的作用
《南方农业学报 》 2023 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探究冷藏期间造成罗非鱼鱼肉质构品质劣化的关键蛋白酶，为提升冷藏鱼肉品质提供理论依据。【方法】对罗非鱼鱼片进行真空包装，于4℃下冷藏，在0～6 d内对鱼肉进行质构、pH、肌原纤维小片化指数（MFI）、内源蛋白酶活性及在不同细胞器的分布和肌原纤维SDS-PAGE图谱测定，并通过皮尔逊相关分析确定冷藏期间造成鱼肉质构劣化的关键蛋白酶。【结果】冷藏过程中，罗非鱼鱼肉pH呈先降低后升高的变化趋势，最终pH为6.68；硬度和MFI分别呈下降和升高的趋势；组织蛋白酶B+L活性变化整体表现为升高趋势，第6 d时活性为初始值的1.27倍，在肌原纤维、肌浆蛋白和线粒体中活性呈先上升后下降的变化趋势，在溶酶体中活性呈下降趋势；组织蛋白酶B、D活性变化整体表现为先升高后降低，且均在第4 d达最大值，分别为初始值的1.20和1.48倍，肌原纤维、肌浆蛋白和线粒体中的组织蛋白酶B活性呈先升高后降低的变化趋势，溶酶体中的组织蛋白酶B活性呈下降趋势，肌原纤维和肌浆蛋白中的组织蛋白酶D活性呈升高趋势，溶酶体和线粒体中的组织蛋白酶D活性呈降低趋势；钙离子浓度呈升高趋势，钙激活蛋白酶活性呈先升高后降低的变化趋势；肌原纤维蛋白SDS-PAGE图谱中肌球蛋白重链、肌动蛋白和肌球蛋白轻链的条带逐渐减少和模糊；组织蛋白酶B、B+L活性与鱼肉硬度呈极显著负相关（P＜0.01，下同），与鱼肉MFI呈极显著正相关；组织蛋白酶D和钙激活蛋白酶活性与鱼肉硬度和MFI无显著相关性（P＞0.05）。【结论】组织蛋白酶B和组织蛋白酶L参与肌原纤维蛋白的降解和线粒体介导的细胞凋亡，可能是冷藏期间罗非鱼鱼肉质构劣化的2个关键靶点酶，可采取有效技术手段对其活性进行抑制，进而提升贮藏期间鱼肉质构品质。
关键词： 内源蛋白酶 质构品质 鱼肉贮藏 肌原纤维蛋白 罗非鱼鱼片
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