科研产出
NF-κB信号通路激活剂LPS/抑制剂SN50对鸭肠炎病毒增殖影响的研究
《中国预防兽医学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为探究NF-κB信号通路对鸭肠炎病毒（DEV）增殖的影响,本实验分别以不同终浓度的NF-κB信号通路激活剂LPS（2.0μg/mL、4.0μg/mL、6.0μg/mL）和抑制剂SN50（25.0μg/mL、50.0μg/mL、75.0μg/mL）处理鸭胚成纤维（DEF）细胞后,采用CCK8法分析LPS或SN50对DEF细胞活性影响;利用不同浓度的LPS或SN50预处理DEF细胞4 h后,再于12 h120 h后收获细胞和上清液（未感染DEV）;上述经LPS或SN50预处理细胞4 h后接种DEV（MOI 0.01）,12 h120 h后（每间隔12 h）分别收获细胞及上清液,采用荧光定量PCR方法分别检测上述未感染和感染DEV的DEF细胞中NF-κB1基因和DEV NP基因的转录水平;采用ELISA方法分别检测上述未感染和感染DEV的DEF细胞上清液中NF-κB信号通路关键因子（IL-1β、IL-6和MyD88）的表达水平。结果显示:不同浓度的LPS和SN50处理对DEF细胞均无明显毒性作用。荧光定量PCR结果显示,经不同浓度LPS预处理,均能有效提高DEF细胞中NF-κB1基因的转录水平,其中4.0μg/mL LPS处理的DEF细胞中NF-κB1基因转录水平最高;而在LPS预处理再感染DEV后,4.0μg/mL LPS和6.0μg/mL LPS处理的DEF细胞中NF-κB1基因转录水平整体上调（p<0.05）,2.0μg/mL LPS处理的DEF细胞中NF-κB1基因的转录水平整体下调（p<0.05）;不同浓度的SN50预处理后,未感染和感染DEV的DEF细胞中,均以50.0μg/mL SN50处理的细胞中NF-κB1基因的转录水平下调效果最好（p<0.05）。LPS预处理DEF细胞后感染DEV,12h84 h DEV NP基因的转录水平均受到明显抑制（p<0.01）,84 h后2.0μg/mL和6.0μg/mL LPS均会促进DEV NP基因的转录水平;而经SN50预处理DEF细胞后感染DEV,细胞中DEV NP基因的转录水平均显著下降（p<0.01）。ELISA结果显示,经LPS预处理后,不感染或感染DEV,DEF细胞中IL-6表达量整体稍呈下降趋势（p>0.05）,而IL-1β和MyD88的表达则呈无规律变化;经SN50预处理后不感染或感染DEV,DEF细胞中IL-1β、IL-6和MyD88的表达均无规律变化。以上研究结果表明,不同浓度LPS均可促进正常DEF细胞中NF-κB1基因的转录,而DEV则可以阻断低浓度LPS（2.0μg/mL）的这种促进作用。不感染或感染DEV,SN50均于高浓度（50μg/mL和75μg/mL）时才能有效降低NF-κB1基因的转录水平;不同浓度的LPS或SN50均对NF-κB通路关键因子的表达基本无影响;LPS在DEV感染后期才能促进其增殖,而SN50则可以有效抑制DEV的增殖。本研究为阐明NF-κB信号通路与DEV之间的相互作用关系奠定了实验基础。。
关键词： 鸭肠炎病毒 鸭胚成纤维细胞 NF-κB信号通路 激活剂LPS 抑制剂SN50 增殖
全文链接
请求原文
高羊茅FaCCA1基因克隆、表达分析及基因编码蛋白的亚细胞定位
《植物生理学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：生物钟节律基因（circadian clock gene） CCA1在植物光周期途径中具有十分重要的作用。以高羊茅‘黔草1号’ cDNA为模板,利用同源扩增结合cDNA末端快速扩增（rapid amplification of cDNA ends, RACE）技术从高羊茅中获得与拟南芥CCA1高度同源的cDNA全长序列,命名为FaCCA1。利用BLAST在线软件对该基因进行生物信息学分析,通过农杆菌介导的烟草瞬时表达,观察Fa CCA1基因编码蛋白的亚细胞定位,并利用RT-qPCR技术分析不同光照条件下FaCCA1基因表达水平。结果表明,该序列cDNA全长为2 433bp,含有一个完整的开放阅读框,长度为2 148 bp,编码蛋白含有715个氨基酸,蛋白分子量为77.80 kDa,理论等电点为5.91。亚细胞定位结果显示FaCCA1基因所编码的蛋白定位于细胞核。系统进化树分析表明FaCCA1与禾本科植物的CCA1蛋白亲缘关系较近,其中与大麦亲缘关系最近,达到80%以上。FaCCA1基因表达量在长日照高于短日照,表达水平出现昼夜节律钟变化模式,表明高羊茅FaCCA1表达量受光周期调控。这为高羊茅FaCCA1基因的功能研究提供参考资料,为高羊茅的分子育种利用提供了改良靶标。
全文链接
请求原文
大蒜资源精油成分分析与比较
《中国调味品 》 2021 北大核心
摘要：为探明不同来源大蒜资源精油成分的差异,该研究采用水蒸气蒸馏提取法提取大蒜精油,利用GC-MS分析精油组分及其相对含量。结论:大蒜精油的含量在0.13～0.36 mL/100 g之间,精油提取率有较大差异,贵州和江苏大蒜资源的精油含量相对较高。采用GC-MS法分析了24份大蒜精油,共得到40种物质,其共有成分二烯丙基三硫化物、二烯苯基二硫化物、甲基-2-丙烯基三硫化物和二烯丙基四硫化物的累计含量大于70.00%,不同来源的大蒜资源其精油成分差异较大,贵州大蒜资源的大蒜素含量较高、品质较好。聚类分析结果表明,在欧氏距离20.00处可将24份大蒜资源聚为4大类群,贵州大蒜资源主要聚集在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类群中,而第Ⅳ类群中主要为外省资源。大蒜精油成分相对含量变化可作为大蒜种质资源鉴定的有效途径之一。
全文链接
请求原文
贵州引进甘薯种质资源形态标记聚类分析
《种子 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：以引进的33份甘薯种质资源为试验材料,利用形态标记聚类分析法,研究材料间亲缘关系,为贵州甘薯新品种选育提供参考。结果表明,在欧式聚类9.71处,可将33份材料分为两大类群,类群Ⅰ包括31份材料,分成两个亚群;类群Ⅱ包括两份材料。同一类群的性状相差小,欧氏距离相近;类群间的性状差异较大,欧氏距离相差大。
全文链接
请求原文
高羊茅FaGI基因克隆、表达及启动子分析
《农业生物技术学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：GI （GIGANTEA）是节律相关基因,在植物控制节律输出和开花调控中具有重要作用。为探索GI基因在高羊茅（Festuca arundinacea）中的生物学功能,本研究运用cDNA末端快速扩增法（rapid amplification of cDNA ends, RACE）克隆和染色体步移法扩增得到该基因序列和启动子序列,并对其进行生物信息学分析。序列分析表明,FaGI基因（GenBank No. MZ540915）序列全长3 869 bp,其开放阅读框为3 447 bp,编码1 149个氨基酸。启动子序列2 371 bp,有CURECORECR、GT1CONSENSUS、LTRE1HVBLT49和MYB识别位点多个顺式作用元件。系统进化树表明,FaGI基因编码的蛋白与草甸羊茅（Festuca pratensis）、黑麦草（Lolium perenne）、黑麦（Secale cereale）和小麦（Triticum aestivum）等禾本科植物同源蛋白的进化关系比较近。亚细胞定位显示其定位在细胞核,说明该蛋白可能在细胞核中发挥作用。荧光定量分析不同光照处理和不同发育阶段下的表达模式。结果显示,FaGI基因的表达受光周期和生物钟的调控,不同发育时期其表达量不同,苗期的表达量最高,进入生殖生长阶段其表达量下降。构建p1300-FaGI过表达载体转化拟南芥（Arabidopsis thaliana）,结果显示,FaGI过表达拟南芥能上调AtCCA1（CIRCADIAN CLOCK ASSOCIATED 1）和AtTOC1 （TIMING OF CAB EXPRESSION 1）表达,下调AtFT（FLOWERING LOCUS T）和AtCO （CONSTANS）表达。该研究结果为后续验证高羊茅FaGI基因功能提供理论依据。
关键词： 高羊茅 高羊茅GIGANTEA （FaGI）基因 启动子克隆 表达分析
全文链接
请求原文
梨园林下豆科绿肥绛三叶的景观生态特征
《贵州农业科学 》 2021 北大核心
摘要：[目的]探明绛三叶(Trifolium incarnatum)在梨园林下养分、固氮、固碳、制氧量等生态功能特征,为其在生态及观光果园中的应用提供依据.[方法]以观赏性较好的低矮豆科绿肥绛三叶为研究对象,分析不同播种量林下花朵时空分布特征、花朵视觉特性等景观的响应,以及养分、固碳制氧量等生态特征.[结果]绛三叶花期在3月底至4月中下旬,共24~27 d,顶生花序,高33~55 cm,花冠深红色,花序呈圆锥状,花期继续伸长,具小花50~120朵,每朵花序的锥底直径1.1~1.8 cm,圆锥母线长2.8~6.7 cm,单朵花序面积4.71~18.93 cm2,单株花序数平均约4个,单位面积花序数320~544个/m2,单位花序总面积108.02~686.68 m2/667m2,鲜草产量244~1 163 kg/667m2,总养分积累量4.06~18.45 kg/667m2,可固定氮素3~12 kg/667m2,固碳量84~398 kg/667m2,制氧量61~293 kg/667m2.绛三叶的播种量与花序的数量、总面积等景观效应,总养分积累、固碳制氧量等生态效应呈显著的相关关系,单位面积花序数量y=-43.048x2+146.78x+328.84(R2=0.516 3),单位总花序面积yy=-31.315x2+32.806x+397.29(R2=0.7317),鲜草产量yy=-67.84x2+149.8x+597.5(0.705),总养分 y=-0.480x2-0.431x+12.43(R2=0.707).[结论]观赏功能及绿肥功能运筹平衡的绛三叶利用模式中,播种量0.52~1 kg/667m2的绛三叶花序总面积大,播种量1.7~2 kg/667m2的绛三叶花序数量多,播种量1.1~1.5 kg/667m2的绛三叶鲜草产量高,观赏功能及绿肥功能平衡可在播种量1~1.2 kg/667m2.
关键词： 梨园;绛三叶;绿肥;景观;生态
全文链接
请求原文
薏苡糠壳的化学成分及其种子萌发活性研究
《热带亚热带植物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为了解薏苡（Coixlachryma-jobi）糠壳的化学成分,利用多种柱色谱技术对其乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位进行分离,经波谱数据分析鉴定了15个化合物,分别为香豆酸（1）、香豆酸甲酯（2）、2-羟乙基-香豆酸酯（3）、咖啡酸甲酯（4）、阿魏酸甲酯（5）、（E）-3-（4-甲氧基苯基）丙烯酸（6）、2,3-二羟基-1-（4-羟基-3-甲氧基苯基）-1-丙酮（7）、2,3-二羟基-1-（4-羟基-3,5-二甲氧基苯基）-1-丙酮（8）、对羟基苯甲酸（9）、3-羟基-4-甲氧基苯甲酸（10）、1,3,5-三甲氧基苯（11）、methyl （3-hydroxy-2-oxo-2,3-dihydroindol-3-yl）-acetate （12）、尿囊素（13）、2-（2-羟乙基）-3-甲基反丁烯二酸（14）和油酸（15）,其中化合物3、7、12、13和14为首次从薏苡中分离得到。活性测试结果表明,化合物1、2、9、10和11对种子萌发具有较强的抑制作用。
全文链接
请求原文
玉米dhn1和dhn2基因渗入普通自交系的分子标记辅助选择研究
《种子 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：干旱是影响玉米生产的主要限制因子,为创制玉米耐旱性种质,以CIMMYT引进的耐旱种质CML 538、CML 539和普通玉米自交系PH 6 WC、QR 273、LX 9081为材料,利用常规技术构建回交群体,采用分子标记辅助选择（Marker assisted selection, MAS）技术,将耐旱主效基因渗入普通玉米自交系中。从构建的6个群体,经分子标记辅助选择,共获得22份材料,其中,dhn1渗入的材料1份,dhn2渗入的材料19份,同时渗入dhn1和dhn2的材料2份。经种子萌发期耐旱性鉴定,与轮回亲本相比,22份材料耐旱性均有不同程度的提高,其中,中等及以上耐旱型材料18份。研究表明,采用MAS技术实现玉米耐旱主效QTL（或基因）的渗入可以有效提高玉米耐旱性,对玉米耐旱种质遗传改良和育种应用有着重要意义。
全文链接
请求原文
治疗牛支原体病复方中药提取工艺的优化及其体外抑菌效果
《黑龙江畜牧兽医 》 2021 北大核心
摘要：为优化治疗牛支原体病复方中药提取工艺及研究其体外抑菌效果,为牛支原体病防治及中药制剂的开发提供理论依据,试验采用正交试验对大青叶、黄芩及百部3种中药提取工艺的乙醇浓度、液料比、提取时间及提取温度进行优化。以最佳提取方法得到提取物,按不同比例混合得到中药组方合剂,采用平板打孔法进行体外抑菌试验,并采用二倍稀释法测定其最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果表明:大青叶最佳提取工艺为70%乙醇溶液,提取温度70℃,液料比10∶1,提取时间2 h;黄芩最佳提取工艺为60%乙醇溶液,提取温度70℃,液料比40∶1,提取时间1.5 h;百部最佳提取工艺为液料比20∶1,提取温度70℃,50%乙醇溶液,提取时间1.5 h。3种中药提取物按不同比例混合时,抑菌圈平均直径为18.4～22.5 mm,其中大青叶∶黄芩∶百部=2.6∶2.6∶1时对牛支原体体外抑菌效果最好,抑菌圈平均直径为22.5 mm;二倍稀释法测得MIC均为31.25 mg/mL,MBC为31.25～62.50 mg/mL。说明3种中药提取物及不同配比对牛支原体病有明显的抑制作用,可作为中兽药开发利用。
关键词： 牛支原体病 大青叶 黄芩 百部 提取工艺 最小抑菌浓度 最小杀菌浓度
全文链接
请求原文
低温处理对发豆腐贮藏品质的影响
《中国调味品 》 2021 北大核心
摘要：为了寻求有效的发豆腐保鲜措施,比较冷藏、冻藏两种低温处理对发豆腐贮藏品质的影响,通过对发豆腐的感官评价、常规微生物、气味、质构特性的测定,结果表明:冷藏处理的发豆腐在第4天时感官评分为81,菌落总数、霉菌数和大肠菌群数开始急剧增加;冷冻处理的发豆腐在28 d内感官品质良好稳定,微生物数基本无明显变化,质构特性在冷冻后有一定变化,但随后保持稳定,电子鼻检测24 d后稍有变化.因此,低温处理能延长发豆腐的贮藏期,冻藏处理的保鲜效果较佳且对发豆腐的感官、气味和质构特性影响不大.
关键词： 发豆腐;冷藏;冻藏;微生物;质构特性
全文链接
请求原文
