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牛肝细胞体外培养及其去分化、凋亡机制研究进展

饲料工业 2025 北大核心

摘要:肝细胞是肝脏组织的主要组成部分,牛的生产、繁殖、健康和饲料转化效率均与肝脏密切相关,对牛肝细胞的代谢和解毒功能进行研究具有重要意义。但肝细胞存活时间短、特异性功能活性逐渐丧失,缺少成熟的细胞系用于牛肝细胞特异性功能研究。文章系统阐述了牛肝细胞的体外培养方法,肝细胞的去分化机制、相关信号途径及应对肝细胞去分化的策略,分离过程肝细胞的凋亡机制,以及肝细胞的冷冻保存方法,以期建立便捷高效的肝细胞体外培养体系,为获得存活时间长、能稳定表达特异性活性的肝细胞提供理论基础。

关键词: 牛肝细胞 体外培养 去分化 细胞凋亡 冷冻保存

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贵州野生羊肚菌的挥发性物质及香气品质分析

贵州农业科学 2025 北大核心

摘要:【目的】探索可降低检测成本的羊肚菌香气品质差异性分析方法,为羊肚菌种质资源评价、驯化栽培和产品加工提供参考。【方法】以贵州省内10份野生羊肚菌资源(M1~M10)为材料,采用气相色谱-质谱法(GC-MS)定性定量分析其挥发性物质,通过相对气味活度值(ROAV)和热图(Heat Map)综合评价10份野生羊肚菌资源的挥发性物质;利用主成分分析(Principal component analysis)和聚类分析(Cluster analysis)评价10份野生羊肚菌资源香气品质的差异性;对比ROAV≥0.001、ROAV≥0.01、ROAV≥0.1挥发性物质组合与所有物质似ROAV评价10个羊肚菌资源香气品质差异性。【结果】气相色谱-质谱分析贵州10份野生羊肚菌资源得到519种挥发性物质,包括杂环化合物、酯类、醛类、酮类、醇类、芳烃类、烃类、挥发萜、挥发酚、酸类、挥发醚、含氮化合物、含硫化合物、挥发胺、卤代烃等15类,获得113种挥发性物质的ROAV,其中,ROAV≥0.1的关键挥发性物质有呋喃酮、1-甲基-萘、(E,E)-2,4-壬二烯醛等20种,热图获得14种ROAV差异明显的挥发性物质;主成分分析可简化为9个主成分,累计方差贡献率达100%,基本反映10份资源的全部信息;主成分分析和聚类分析将10个羊肚菌资源归为3个类群,同一类群的资源香气相似;ROAV≥0.001、ROAV≥0.01、ROAV≥0.1挥发性物质与113种挥发性物质的主成分分析、聚类分析结果高度一致。【结论】通过113种挥发性物质似ROAV值的主成分分析和聚类分析,可对贵州野生羊肚菌香气品质进行区分和聚集;ROAV≥0.001、ROAV≥0.01、ROAV≥0.1的挥发性物质组合可在一定程度上替代113种挥发性物质评价贵州羊肚菌资源的香气品质差异性,当采用ROAV≥0.1挥发性物质分析时,参与运算的物质种类最少。

关键词: 羊肚菌 香气品质 挥发性物质 气相色谱-质谱法 相对气味活度值 热图分析 主成分分析 聚类分析

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刺梨发酵优势菌种分离鉴定及其营养品质分析

粮食与油脂 2025 北大核心

摘要:从刺梨自然发酵液中分离鉴定菌种,将所得菌株应用于刺梨汁发酵中,筛选优势菌株并探究其最佳发酵工艺。结果表明:戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、龙舌兰(特基拉)芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)和嗜乙醇假丝酵母菌(Candida ethanolica)是刺梨自然发酵液优势菌株;最佳发酵工艺为以稀释刺梨糖汁质量为基准,接种量2%、料液质量比2∶1、发酵温度37℃、发酵时间3 d。在此条件下发酵刺梨汁总酸含量为(14.52±0.40) g/L、超氧化物歧化酶活性为(2 849.68±124.29) U/mL、总酚含量为(715.07±10.77) mg/100g、维生素C含量为(280.55±30.55) mg/100g,抗氧化能力较强,且风味成分丰富,含有氮氧化物、芳香成分、硫化物类、醇类化合物等,感官评分最高为88.75±8.45。

关键词: 刺梨 发酵 优势菌种 分离 鉴定 营养品质

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优质两系杂交香稻新组合香两优619制种技术

杂交水稻 2025 北大核心 CSCD

摘要:香两优619系贵州省水稻研究所选育的籼型两系杂交香稻新组合,具有综合性状好、高产优质、熟期早等特点。根据该组合近2 a在贵州省岑巩县的制种实践,介绍其亲本特征特性,总结其在岑巩县的制种技术。

关键词: 杂交水稻 香两优619 制种技术

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糯稻三系不育系黔糯1A的选育与应用

杂交水稻 2025 北大核心 CSCD

摘要:黔糯1A是贵州省农科院水稻研究所选育的糯稻三系不育系,具有良好的开花习性和异交特性,配合力高、可恢复性好,2016年通过贵州省农作物品种审定委员会组织的技术鉴定。利用该不育系配组育成的黔糯优11、黔糯优88已通过贵州省农作物品种审定委员会审定,黔优1130已通过云南省、贵州省农作物品种审定委员会审定。

关键词: 糯稻 三系不育系 黔糯1A 选育

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小麦TaPBF3-5D的基因克隆及生物信息学分析

麦类作物学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:PBF因子是小麦胚乳特异基因表达调控蛋白因子之一,在调控小麦种子贮藏蛋白基因表达方面有着重要作用。本研究以小麦种质ZY96-3为材料,利用RT-PCR技术克隆获得TaPBF3-5D的CDS序列,对其进行了生物信息学和基因表达分析。结果表明,TaPBF3-5D基因CDS序列共有909 bp,编码302个氨基酸;其编码的蛋白为一个非跨膜的不稳定性亲水蛋白,无信号肽,共含36个磷酸位点;预测其定位于细胞核;通过系统进化树以及多重序列比对,TaPBF3-5D与来自于普通小麦中国春的PBF在亲缘性上更为接近。经荧光定量分析,TaPBF3-5D基因在根、茎、叶和籽粒中均有表达,以籽粒中表达最高,其次是叶和茎,根中表达最低。这进一步说明TaPBF3-5D基因参与调控小麦籽粒贮藏蛋白基因表达,调节籽粒发育。

关键词: ZY96-3 TaPBF3-5D 生物信息学 基因克隆

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鼠伤寒沙门菌greA/B基因缺失株的构建及生物学特性

微生物学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:沙门菌作为一种常见的人畜共患病原体,可导致多种食源性疾病,其中鼠伤寒沙门菌(SalmonellaTyphimurium,STM)是关键血清型之一,其研究与防控对公共卫生具有重要意义。【目的】探究greA和greB基因对鼠伤寒沙门菌生物学特性和致病性的影响。【方法】运用Red同源重组技术构建greA和greB基因缺失株及其回补株,并对其生长特性、生物被膜形成能力、对Caco-2细胞的黏附及侵袭能力进行检测;利用小鼠模型评估了greA和greB基因缺失对STM致病性的影响。【结果】成功构建了突变株STM LT2ΔgreA和STM LT2ΔgreB;与野生株相比,greA和gre B基因的缺失均不影响其生长速度,但导致STM的生物被膜形成能力、黏附力、侵袭力均有所下降;greA和greB缺失降低了STM对小鼠肝、脾的定殖力,并使得STM的LD50分别上升了39.81倍和2.5倍。【结论】greA和greB基因的缺失均可降低鼠伤寒沙门菌的致病性,本研究结果为进一步揭示沙门菌的致病机理提供了理论基础。

关键词: 鼠伤寒沙门菌 转录延伸因子 greA greB 生物特性

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低磷胁迫下高羊茅转录组学分析

分子植物育种 2025 北大核心 CSCD

摘要:对高羊茅(Festuca arundinacea)叶片进行转录组测序分析,挖掘响应低磷胁迫的相关基因,探讨高羊茅抵御逆境胁迫的分子机制。用KH2PO4浓度为0.005 mmol/L的Hoagland全营养液模拟低磷胁迫处理下的高羊茅作为研究材料,应用HiSeq4000 PE-250测序平台对叶片进行转录组测序,对测序结果进行基因功能注释分析和差异表达基因(DEGs)筛选。获得低磷胁迫处理下高羊茅叶片中2 269个DEGs。GO富集结果表明,低磷胁迫下高羊茅中的DEGs均显著富集到叶绿体被膜、叶绿体基质、酸性磷酸酶活性、去磷酸化、蔗糖-1F果糖基转移酶活性等过程中;KEGG途径富集分析表明,高羊茅低磷胁迫处理下的DEGs显著富集的代谢途径主要涉及甘油磷脂代谢、甘油酯类代谢、类胡萝卜素生物合成、苯丙氨酸代谢等。转录因子鉴定结果显示高羊毛低磷胁迫处理下差异表达数量最多的转录因子主要来自C3H、NAC、C2H2、WRKY、bHLH等转录因子家族;通过高通量转录组测序,初步获取了高羊茅响应低磷胁迫的基因表达特征,为深入研究高羊茅抗逆机制提供理论依据。

关键词: 高羊茅 低磷胁迫 转录组分析 转录因子

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贵州省优质稻产业提质增效对策研究

贵州农业科学 2025 北大核心

摘要:为推动贵州省优质稻产业化和高质量发展提供理论支撑,对贵州省内优质稻基地、相关企业和科研院所等进行深入调研,从优质稻产业的发展现状、主要优势和突出问题等方面进行综合分析,针对性提出提质增效的对策建议。贵州优质稻生产具有生态环境与种质资源优势,优质稻种植面积大、单产高,2022年优质稻种植面积45.3万hm2,占全省水稻种植面积的73.8%;单产7.03 t/hm2;总产318.6万t,占贵州省水稻总产的80.7%。建议充分利用贵州省自然资源和稻种资源优势,加强优质稻产业规划布局和政策支持,加大技术研发和推广力度,提升优质稻加工和储藏水平以及强化稻米品牌建设,进一步推进贵州省优质稻产业高质量发展,提高贵州稻米市场竞争力。

关键词: 优质稻 产业 提质增效 种质资源 对策 贵州

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一株基因Ⅶ型新城疫病毒L蛋白致弱突变株的拯救及其免疫效力评价

中国兽医科学 2025 北大核心 CSCD

摘要:为防控流行的基因Ⅶ型新城疫,以基因Ⅶ型新城疫病毒(NDV)为骨架,将其F蛋白裂解位点氨基酸序列突变为La Sota株相应序列并且将其L蛋白第1159位赖氨酸突变为精氨酸,获救1株NDV L蛋白突变弱毒株并命名为rNDV-Fmut-LK1159R。rNDV-Fmut-LK1159R突变株在鸡胚中连续传代至第15代,突变位点能稳定遗传。rNDV-Fmut-LK1159R突变株和La Sota株分别以1×10~7EID50/羽的剂量免疫4周龄SPF鸡1次,免疫21 d后使用基因Ⅶ型NDV攻毒,攻毒剂量为1×10~5EID50/羽。结果表明,rNDV-Fmut-LK1159R突变株能显著提高SPF鸡外周血淋巴细胞内IFN-γ mRNA表达量,显著刺激机体产生体液和细胞免疫应答,且对SPF鸡提供完全免疫保护,并有效阻止排毒和抑制病毒在其脏器内复制。综上所述,rNDV-Fmut-LK1159R突变株免疫原性优良,具有成为基因Ⅶ型新城疫弱毒疫苗候选株的潜力。

关键词: 基因Ⅶ型新城疫 弱毒疫苗 反向遗传 免疫效力

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