科研产出
贵州火龙果溃疡病病原菌鉴定及生物学特性
《贵州农业科学 》 2021 北大核心
摘要：【目的】对贵州省火龙果溃疡病的病原进行鉴定及生物学特性研究,为贵州火龙果溃疡病的防治及病原菌的碳氮源代谢研究奠定理论基础。【方法】采用组织分离法、形态学观察以及分子生物学等方法对贵州火龙果溃疡病病原进行分离鉴定,并采用菌丝生长速率法及Biolog表型芯片技术研究病原菌生物学特性。【结果】贵州火龙果溃疡病病菌为新暗色柱节孢（Neoscytalidium dimidiatum）;病原菌适宜生长温度为20～35℃,最佳生长温度为28℃,最适pH为6～7;光照对菌丝生长有抑制作用,短时间的紫外光照射对病原菌生长有促进作用。火龙果溃疡病菌对PMl、PM2微孔板中190种碳源物质利用率为18.42%,对PM3微孔板中95种氮源物质的利用率为52.63%。【结论】贵州火龙果溃疡病病菌为新暗色柱节孢（Neoscytalidium dimidiatum）,病原菌较耐高温,生长环境偏酸性。
关键词： 火龙果溃疡病 病原菌鉴定 新暗色柱节孢 生物学特性 贵州
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5种土壤处理除草剂对半夏田杂草防除效果
《农药 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：[目的]草害是制约贵州半夏产业发展的重要因素之一。生产上主要依靠人工除草方式,其除草成本高;化学除草是降低半夏田除草成本的有效措施,但生产上供选择的除草剂品种单一;试验旨在提供更多除草剂品种供半夏田选择应用。[方法]选用5种土壤处理除草剂,按照随机区组设计进行田间药效试验,在半夏播后苗前进行土壤喷雾处理。[结果]50%硝磺草酮·乙草胺·莠去津SC 1500 g a.i./hm2处理、68.8%嗪草酮·乙草胺EC1543.5 g a.i./hm2处理对半夏田杂草防除效果最好,药后30、45 d对杂草群体总株防效、总鲜重防效均在92%以上,但50%硝磺草酮·乙草胺·莠去津SC易产生药害,不宜使用;其次为960 g/L精异丙甲草胺EC864 g a.i./hm2处理、240 g/L乙氧氟草醚EC 180 g a.i./hm2处理,总株防效、总鲜重防效在69%以上;450 g/L二甲戊灵CS 742.5 g a.i./hm2处理虽药后30 d对杂草群体总防效较好,但45 d防效较差。[结论]除50%硝磺草酮·乙草胺·莠去津SC外,其余4种除草剂均可在半夏田应用。但各除草剂对不同杂草种类防效存在一定差异,应根据半夏田杂草发生情况合理选择,科学用药,保障半夏产品质量安全。
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调控牛CEBPA基因表达的miRNA筛选及对肌内前体脂肪细胞增殖和分化的影响
《畜牧兽医学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：旨在筛选并验证调控牛增强子结合蛋白A（CCAAT/enhancer binding protein alpha,CEBPA）表达的miRNA及其对肌内前体脂肪细胞增殖和分化的影响。本研究综合运用多个在线软件筛选与CEBPA基因具有潜在调控关系的miRNA,运用qRT-PCR技术检测CEBPA基因在关岭牛各类组织中的表达水平;构建CEBPA-3′UTR-WT和CEBPA-3′UTR-MUT双荧光素酶报告载体,通过双荧光素酶报告系统验证候选miRNA与CEBPA基因的结合关系;分离培养关岭牛肌内前体脂肪细胞,利用qRT-PCR、Western blot、油红O染色和CCK-8探究调控CEBPA的miRNA对牛肌内前体脂肪细胞分化与增殖的影响。生物信息学分析发现,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a、bta-miR-181b、bta-miR-181c、bta-miR-181d与CEBPA基因具有潜在结合关系;qRT-PCR结果表明,CEBPA基因在关岭牛内脏组织、肌肉组织、脂肪、下丘脑以及部分生殖器官中均有表达,在2岁牛背最长肌的表达量极显著高于1日龄犊牛（P<0.01）;双荧光素酶报告系统结果表明,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a能直接结合牛CEBPA基因3′UTR;细胞试验结果表明,CEBPA基因在牛肌内前体脂肪细胞分化中的表达水平随时间逐渐升高,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a在分化0 d表达水平极显著高于其他时期（P<0.01）,整个分化时期bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a与CEBPA基因表达趋势相反;过表达miR-23a、miR-23b-3p、miR-181a均能极显著降低CEBPA基因mRNA和蛋白表达量（P<0.01）,并降低牛肌内前体脂肪细胞中脂滴含量;bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a能阶段性促进细胞增殖。结果表明,bta-miR-23a、bta-miR-23b-3p、bta-miR-181a能阶段性的促进牛肌内前体脂肪细胞增殖,并通过直接负调控CEBPA的表达来间接影响该细胞分化。
关键词： CEBPA miRNA 肌内前体脂肪细胞 细胞分化
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鸭源NF-κB1基因荧光定量PCR方法建立及其初步应用
《浙江农业学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为建立鸭NF-κB1（nuclear factor-kappa B, NF-κB）基因的荧光定量PCR检测方法,并以建立的方法检测鸭胚成纤维细胞（duck embryo fibroblasts, DEF）在感染鸭肠炎病毒（DEV）后NF-κB1基因随时间变化转录表达量的变化情况。根据GenBank上NF-κB1基因保守序列设计特异性引物,以鸭胚成纤维细胞mRNA提取样本反转录为cDNA,进行NF-κB1基因克隆质粒构建,以此为模板建立鸭NF-κB1基因荧光定量PCR检测方法并进行特异性、重复性和敏感性试验,并利用建立的方法DEF感染DEV后NF-κB1基因随时间变化的转录变化进行检测。结果显示:建立的鸭NF-κB1基因荧光定量PCR方法标准曲线呈现典型的S型,方程为y=-3.12x+44.086（R2=1）,扩增效率为109.2%;其熔解温度Tm值为（83.5±0）℃,曲线呈特异性单峰,批内变异系数小于0.3%,批间变异系数小于0.2%;检测灵敏度可达到1.79个拷贝。DEF细胞在感染DEV后NF-κB1基因随时间改变转录水平变化无规律,但整体表达水平高于正常细胞,差异显著（P<0.05）,36～84 h NF-κB1基因的转录水平与正常细胞中差异极显著（P<0.01）。本研究成功建立了鸭NF-κB1基因荧光定量PCR检测方法,并对DEF细胞感染DEV后NF-κB1基因的转录水平进行了研究,为后续实验研究提供了技术和数据支撑。
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中蜂囊状幼虫病毒RT-PCR检测方法的建立与应用
《中国兽医科学 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为建立中蜂囊状幼虫病毒（CSBV）核酸的特异性检测方法,以CSBV结构蛋白VP3基因为靶基因,根据GenBank中序列合成1对特异性引物,建立了CSBV RT-PCR检测方法。以CSBV克隆质粒作为模板和蜜蜂6种不同病毒,分别进行特异性、敏感性、重复性试验。结果显示:所建立的RT-PCR检测方法能扩增出CSBV特异性片段,且不能扩增出蜜蜂以色列急性麻痹病毒、蜜蜂畸翅病毒、蜜蜂急性麻痹病毒、蜜蜂慢性麻痹病毒、黑蜂王台病毒、蜜蜂克什米尔病毒;CSBV阳性质粒最低检测质量浓度为2.82 fg/m L;对CSBV阳性质粒和双蒸水空白对照组重复检测3次,均能扩增出与预期一致的特异性片段。利用该检测方法对从贵州省不同养蜂场采集的100份中华蜜蜂样本进行检测,71份样本为阳性,通过序列比对分析,同源性高达99.16%,进一步证实为CSBV。结果表明,所建立的CSBV检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,具有良好的实用性。
关键词： 中蜂囊状幼虫病毒 RT-PCR VP3基因 中华蜜蜂
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PEG模拟干旱胁迫对不同种源白及生理指标的影响
《贵州农业科学 》 2021 北大核心
摘要：【目的】探明不同种源白及在干旱胁迫下的光合生理特性,明确其光合系统对干旱胁迫的响应规律,以期为白及抗旱性机理研究、育种和白及种源选择提供参考。【方法】采用不同浓度PEG（0g/L、5g/L、20g/L、50g/L）进行处理,对不同处理下不同种源（铜仁、正安、安龙）白及的生理指标变化进行分析。【结果】不同浓度PEG胁迫影响白及叶绿素含量、净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度、蒸腾速率等光合指标以及瞬时水分利用率。各个种源白及的叶绿素、净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度、蒸腾速率等光合指标均随着PEG浓度的增大而呈下降趋势,其中安龙白及光合指标下降幅度最小;3个种源白及瞬时水分利用率均随PEG浓度的上升呈先降后升的变化趋势。【结论】安龙白及抗干旱胁迫较好,在大田栽培时可优先选择安龙白及并做好相关防护措施。
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5种地膜覆盖对甘薯产量及品质的影响
《江苏农业科学 》 2021 北大核心
摘要：以特色优质鲜食甘薯品种普薯32为试材,采用5种不同地膜覆盖处理,以不覆膜为对照,探究不同地膜覆盖对甘薯产量以及主要营养成分的影响。结果表明,地膜覆盖能显著增加甘薯产量,较对照提高3.7%～23.7%。地膜覆盖提高了甘薯大多数种类氨基酸含量和氨基酸总量,其中银色膜和降解黑膜优于其余几种地膜;另外,覆白膜更有利于粗蛋白合成,覆普通黑膜有利于提高甘薯维生素C和粗纤维含量,覆银色膜和降解黑膜则有利于总糖和淀粉的积累。此外,普通黑膜、降解黑膜和白膜促进了β-胡萝卜素的合成。综上,地膜覆盖能够提高甘薯产量和商品率,以银色膜覆盖增产效应最高;而不同覆膜方式对甘薯营养品质的影响差异较大。因此,生产中可根据栽培目标而选择不同的覆膜处理方式。
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蛋鸡饲料添加加丽素红和加丽素黄对鸡蛋色素沉积量和蛋黄色度的影响
《黑龙江畜牧兽医 》 2021 北大核心
摘要：为了了解蛋鸡饲料添加斑蝥黄（加丽素红）和β-阿朴-8’-胡萝卜素酸乙酯（加丽素黄）对鸡蛋色素沉积量和蛋黄色度的影响,试验以蛋鸡饲料色素加丽素红和加丽素黄的饲料中添加比例为因素,按色素等比例（0∶0、1∶1、2∶2、3∶3、4∶4）添加进行单因子试验设计（对照组和1～4组）,根据等比例添加试验结果选择加丽素红和加丽素黄的适宜比例,分别开展加丽素红添加量不变、加丽素黄按梯度添加（5～11组,1,2,3,6,8,10,12 mg/kg）和加丽素黄添加量不变、加丽素红按梯度添加（12～18组,1,2,3,6,8,10,12 mg/kg）的单因子试验设计,试验共19组,每组3个重复,每个重复10只,饲养试验时间为23 d,从第6天开始每天采集鸡蛋,对鸡蛋中的色素沉积量和蛋黄色度进行检测。结果表明:加丽素红与加丽素黄等比例添加时,鸡蛋色素沉积量和蛋黄色度与添加量均随添加量增加而逐渐升高,因此选择加丽素红与加丽素黄分别为4,4 mg/kg添加量进行后续试验。饲料中两种色素梯度添加量与鸡蛋中沉积量均呈正相关,各试验组与对照组蛋黄色度相比差异明显,其中对照组蛋黄色度为4.889,试验1,2组蛋黄色度分别为9.556,10.556,试验12～14组蛋黄色度为9.167～11.000,其他各试验组蛋黄色度为11.500～13.667。在本试验条件下,加丽素红与加丽素黄饲料添加量分别在4 mg/kg和1 mg/kg、4 mg/kg和2 mg/kg、4 mg/kg和3 mg/kg及3 mg/kg和3 mg/kg时蛋黄色度均稳定在11.500以上。说明蛋鸡养殖企业以蛋黄色度在12.0±0.5为生产目标时,为控制加丽素红与加丽素黄的用量,建议将加丽素红与加丽素黄的饲料添加量分别控制在4 mg/kg和1 mg/kg、4 mg/kg和2 mg/kg、4 mg/kg和3 mg/kg及3 mg/kg和3 mg/kg范围,可降低饲料生产成本。
关键词： 蛋鸡 色素沉积量 蛋黄色度 斑蝥黄 β-阿朴-8’-胡萝卜素酸乙酯
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红曲米酒糟对山羊生长性能与脂质代谢的影响
《动物营养学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究红曲米酒糟对山羊生长性能及脂质代谢的影响,并以此确定山羊饲粮中红曲米酒糟的适宜添加水平。选取28只体况良好、体重一致的贵州白山羊,按照随机区组设计将其分为4组,每组7个重复,每个重复1只羊。对照组饲喂不含红曲米酒糟的基础饲粮,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组、试验Ⅲ组分别饲喂含10%、20%和30%红曲米酒糟的试验饲粮。试验持续38 d,包括预试期10 d,正试期28 d。结果显示:各组山羊的干物质采食量（DMI）、末重（FW）、平均净增重（ANG）、平均日增重（ADG）和料重比（F/G）差异均不显著（P>0.05）,但从数值上看,以试验Ⅰ组的生长性能最佳。试验Ⅲ组血浆甘油三酯（TG）含量显著高于对照组（P <0.05）;试验Ⅱ组与试验Ⅲ组血浆总胆固醇（TC）含量显著高于对照组（P<0.05）;血浆低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）及高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）含量各组间差异不显著（P>0.05）。综上可知,在本试验条件下,饲粮中添加一定量（10%～30%）的红曲米酒糟对山羊的生长性能没有负面影响,并能有效改善脂质代谢状况,综合来看,以红曲米酒糟添加量为10%时饲喂效果最佳。
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