科研产出
基于P-糖蛋白基因表达评价尼罗罗非鱼体内恩诺沙星代谢“首过效应”
《中国水产科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：为从药物酶的角度建立一种客观评价鱼类"首过效应"的方法,利用荧光定量PCR法测定尼罗罗非鱼(Oreochomis niloticus Linn)肝、肾组织中P-糖蛋白(P-gp)基因表达量,分析了单剂量(40 mg.kg 1)口服给药恩诺沙星(enrofloxacin,ENR)后,尼罗罗非鱼肠道、肝组织中mRNA水平的相对表达量与ENR血药浓度的时实相关性。实验结果显示:在尼罗罗非鱼肠道、肝组织中,P-gp基因在分子量127 bp处出现了与预期大小相符的特异性扩增片段。对尼罗罗非鱼口灌给药ENR后,ENR能迅速通过肠道进入血浆,其在肠道、肝和血浆中的消除速度较快,其药物时量曲线关系符合一级吸收的二室开放动力学模型。当血浆中ENR浓度达到最高达峰时(1 h),实验组肠道和肝中P-gp基因的相对表达量相对于对照组均表现出显著性差异(P<0.05);当肠道中ENR浓度达到最高峰时(2 h),实验组肠道P-gp基因的相对表达量则表现出极显著差异(P<0.01);当肝中ENR浓度达到最高峰时(2 h),实验组肝P-gp基因的相对表达量与对照组相比则表现出显著性差异(P<0.05)。该结果证实了鱼类P-gp基因参与药物代谢过程,提供了一种从分子水平揭示水产动物体内药物代谢规律的思路。
关键词： P-糖蛋白 尼罗罗非鱼 恩诺沙星 首过效应 药物代谢
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青蟹呼肠孤病毒和青蟹双顺反子病毒-1双重巢式PCR检测方法的建立
《中国水产科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：青蟹呼肠孤病毒(mud crab reovirus,MCRV)和青蟹双顺反子病毒-1(mud crab dicistrovirus-1,MCDV-1)是从近年发生大规模死亡的养殖拟穴青蟹体内分离的、对青蟹具有致病性的两种病毒。它们常常同时存在,给青蟹养殖业带来巨大经济损失。在疾病的防治中,快速高效的病毒检测方法对疾病诊断以及及时采取有效地防治措施具有重要的意义。本研究利用MCRV和MCDV-1基因保守区设计4对引物,建立了可同时检测这两种病毒的双重巢式PCR(duplex-nested PCR)检测方法。研究发现该方法对两种病毒的检测限都可以达到10个拷贝,并与鲍肌肉萎缩病毒(AbSV)、虾类传染性表皮与造血组织坏死症病毒(IHHNV)、大菱鲆红体病虹彩病毒(TRBIV)、对虾白斑综合症病毒(WSSV)、鱼类神经坏死病毒(NNV)和贝类急性病毒性坏死症病毒(AVNV)等水生动物常见病毒均无交叉反应,可以特异性地检测两种病毒。本方法具有高灵敏度、高特异性和简便快捷等特点,可作为一种快速诊断工具,检测拟穴青蟹中的MCRV和MCDV-1基因。
关键词： 拟穴青蟹 青蟹呼肠孤病毒 青蟹双顺反子病毒-1 双重巢式PCR
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紫菜产品酸价检测技术的研究
《食品科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：建立一种新的紫菜产品酸价的检测方法。通过对搅拌浸提、超声提取和索氏抽提等油脂提取方法进行对比研究,表明索氏抽提法提取油脂效率更高,而且也避免了提取过程中产品氧化对测定结果的干扰。通过向溶解紫菜油脂的有机溶剂中添加适量的中性饱和NaCl溶液,使水油两相分层,可以清晰判断滴定终点,从而建立一种测定深色海藻产品中酸价的新方法。采用改进的容量分析法对不同加工方式的紫菜产品进行酸价测定方法验证,RSD为0.6%～7.1%,表明该方法操作简便,准确度高,适用范围广。
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海蜇(Rhopilema esculentum)Wnt5基因:cDNA克隆、基因组结构与表达
《海洋与湖沼 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：采用转录组454 GS FLX测序和RACE技术,首次解析了海蜇Wnt5基因的cDNA和基因组结构。结果表明,Re-Wnt5基因的cDNA全长1647bp,其中编码区长1059bp,编码了353个氨基酸的多肽;Re-Wnt5基因组含有4个外显子和3个内含子。SMART分析表明,Re-Wnt5具有Wnt家族共同的结构特征,包括一个由20个氨基酸组成的信号肽,2个N-糖基化位点和24个保守的参与二硫键形成的半胱氨酸。多序列比对和系统进化分析表明,Re-Wnt5基因与来自刺胞动物、无脊椎动物和脊索动物的Wnt5、脊椎动物的Wnt5a和Wnt5b具有高度相似性,Wnt5a和Wnt5b两个进化分支发生在脊索动物文昌鱼之后。实时荧光定量PCR显示,Re-Wnt5基因在海蜇四个发育阶段均有表达,其中横裂体阶段的表达量最高,分别是螅状体、碟状体和水母体表达量的12.38、9.99和13.01倍。
关键词： 海蜇 Wnt5 cDNA 基因组结构 实时荧光定量PCR
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冰鲜野杂鱼和商品饲料对大菱鲆生长、脂质代谢及抗氧化功能的影响
《动物营养学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究冰鲜野杂鱼和商品饲料对大菱鲆生长、脂质代谢及抗氧化功能的影响。选用450尾初均重为(111.4±5.6)g的大菱鲆,随机分成3个组,每组设3个重复,每个重复50尾鱼,分别投喂冰鲜野杂鱼、低脂商品饲料和高脂商品饲料,养殖110 d。结果表明:冰鲜野杂鱼可显著提高大菱鲆的末均重、增重率、特定生长率以及饲料系数(P<0.05),而其蛋白质效率则远低于低脂商品饲料和高脂商品饲料(P<0.05)。低脂商品饲料组的肝体指数、脏体指数和肥满度显著低于冰鲜野杂鱼组和高脂商品饲料组(P<0.05)。低脂商品饲料组的血清总胆固醇、甘油三酯含量以及谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性均低于高脂商品饲料组(P<0.05)和冰鲜野杂鱼组(总胆固醇、甘油三酯含量以及谷丙转氨酶活性,P>0.05;谷草转氨酶活性,P<0.05),而其血清高密度脂蛋白胆固醇含量则高于高脂商品饲料组(P<0.05)和冰鲜野杂鱼组(P>0.05)。冰鲜野杂鱼组和高脂商品饲料组肝脏的脂蛋白脂酶活性显著高于低脂商品饲料组(P<0.05),但苹果酸脱氢酶活性则显著低于低脂商品饲料组(P<0.05);低脂商品饲料组肝脏的肉毒碱棕榈酰转移酶-Ⅱ和脂肪酸合成酶活性显著高于高脂商品饲料组(P<0.05),而冰鲜野杂鱼组与低脂商品饲料组、冰鲜野杂鱼组与高脂商品饲料组均差异不显著(P>0.05);低脂商品饲料组肝脏的总抗氧化能力以及超氧化物歧化酶、过氧化氢酶活性显著高于冰鲜野杂鱼组和高脂商品饲料组(P<0.05),而丙二醛含量则显著低于冰鲜野杂鱼组和高脂商品饲料组(P<0.05)。综上,相对于2种商品饲料,投喂冰鲜野杂鱼可提高大菱鲆的生长性能,但其饲料效率却远低于商品饲料;冰鲜野杂鱼和高脂商品饲料使大菱鲆的肝体指数、脏体指数增大,血清转氨酶活性及血脂含量升高,肝脏脂肪分解酶活性升高,脂肪酸合成酶活性降低,肝脏抗氧化能力降低;建议参考冰鲜野杂鱼优质的营养特性,优化和调整大菱鲆营养配方,尤其是脂肪添加量,提升大菱鲆商品饲料品质,有效保障大菱鲆的健康养殖。
关键词： 大菱鲆 冰鲜野杂鱼 商品饲料 脂质代谢 抗氧化功能
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