科研产出
木薯V型几丁质酶MeCHITVb基因克隆及其表达载体构建
《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：几丁质酶在生物逆境环境和非生物逆境环境中发挥着重要作用。为研究木薯几丁质酶在响应低温胁迫下的分子作用机制,利用RT-PCR技术,从木薯耐低温品种SC124中克隆到CHITVb基因,利用平末端连接技术构建pEASY-MeCHITVb克隆载体,用于测序确定目标基因序列,并对其序列进行分析,构建植物表达载体。结果表明,成功克隆木薯CHITVb基因,命名为MeCHITVb。通过生物信息学分析,该基因全长1 050 bp,编码349个氨基酸,理论相对分子量为38.08 kD,理论等电点为4.53,是一种稳定蛋白。经序列比对和系统进化树分析表明,MeCHITVb基因与烟草、拟南芥V型几丁质酶基因亲缘关系最近。用pEASYMeCHITVb与植物表达载体pISV2678构建重组子pISV-MeCHITVb,利用"Golden Gate"克隆方法构建基因编辑载体CRISPR/Cas9-MeCHITVb。将植物过表达的pISV-MeCHITVb和CRISPR/Cas9-MeCHITVb载体成功转化为根状杆菌LBA4404。本研究为后续MeCHITVb基因功能研究、木薯抗寒、抗病品种的选育及木薯北移栽培提供理论依据。
关键词： 木薯（Manihot esculenta Crantz） V型几丁质酶 植物表达载体 抗寒性
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芒果HMGR家族基因的鉴定、系统进化和表达分析
《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：羟甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGR）是甲羟戊酸（MVA）途径的第一个限速酶。为了探索HMGR家族基因在芒果中的作用,本研究鉴定了芒果HMGR家族基因,并对HMGR家族基因的理化性质、系统发育及在芒果中的表达量进行了分析。结果显示,芒果HMGR家族蛋白序列均包含完整的HMG-CoAred结构域,且HMGR家族蛋白均为疏水性蛋白。系统发育树显示,HMGR家族基因是从苔藓植物开始形成的,且芒果HMGR家族基因均聚在双子叶植物的分支,与物种进化历程一致。HMGR家族基因在芒果品种‘贵妃’和‘台农’成熟果果肉中的表达量结果显示,Mi15g11840.1和Mi19g11720.1基因在‘贵妃’中的表达量显著高于‘台农’,Mi18g12500.1基因在‘贵妃’中的表达量显著低于‘台农’,而Mi04g11220.1基因在两个品种中的表达量差异不显著。本研究为进一步研究芒果HMGR家族基因在MVA途径中的作用提供了科学依据。
关键词： 芒果 羟甲基戊二酰辅酶A还原酶 甲羟戊酸 系统进化 表达分析
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橡胶树胶乳紫色酸性磷酸酶基因克隆及表达分析
《分子植物育种 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为了探究橡胶树胶乳中紫色酸性磷酸酶（purple acid phosphatase, PAP）与乙烯刺激增产关联情况。从橡胶树胶乳中鉴定得到9条具有完整保守序列的紫色酸性磷酸酶基因序列,具紫色酸性磷酸酶保守结构域特征。9条序列与木薯、白杨亲缘关系较近,分别属于三类PAP家族,除HbPAP3外均属于高分子量蛋白,蛋白预测定位在多种细胞器中。荧光定量PCR分析组织特异性,结果表明HbPAP3基因在胶乳中表达显著高。在乙烯刺激下,HbPAP26、HbPAP3和HbPAP23基因伴随刺激强度增强在胶乳中基因表达增强3倍以上,推测与乙烯刺激增产和抗氧化活性密切相关。
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氨基酸影响尖孢镰孢菌古巴专化型厚垣孢子的形成
《菌物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：香蕉枯萎病是由尖孢镰孢菌古巴专化型Fusarium oxysporum f. sp. cubense（Foc）侵染引起的一种土传真菌病害,已严重威胁香蕉产业的健康发展。该病菌产生的厚垣孢子可在土壤中存活多年,是香蕉枯萎病的初侵染源。本研究通过氨基酸添加试验,证明添加甘氨酸可抑制厚垣孢子的形成;通过对该病菌厚垣孢子形成前期、初期、中期和后期的转录组分析,发现氨基酸合成通路中有93个基因的表达水平在厚垣孢子形成过程中发生了显著变化;In silico分析表明其中10个基因参与调控真菌的氨基酸合成,11个基因参与调控真菌种的生长发育和产孢,19个基因参与调控真菌种的致病性和毒素产生。由此推测,氨基酸合成通路不仅与尖孢镰孢菌古巴专化型厚垣孢子的形成相关,其有可能参与调控该病菌的致病性。
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杧果新品种'金苹芒'的选育
《果树学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：’金苹芒’杧果是从实生群体中单株选育而成的杧果新品种。其树势较强、枝条柔软,表现出明显的矮化性状。果实近圆球形,外观似苹果,果皮橙黄色、皮薄易剥,果肉橙黄色、汁多味甜、香气浓郁。平均单果质量380 g,可食率83.3%,可溶性固形物含量（w,后同）为16.7%,总糖含量11.2%,总酸含量4.26 g·kg-1,维生素C含量234 mg·kg-1,粗纤维含量0.2%。潮州地区果实发育期110～130 d,晚熟,成熟期为8月中旬到9月上旬。高接树第2年结果,避雨设施栽培条件下平均每666.7 m2产量可达608 kg。该品种品质优良,适宜在广东杧果产区种植,因花果期易受多雨天气影响,宜避雨栽培。
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国产人工打洞沉香中一个新的2-(2-苯乙基)色酮二聚体
《热带作物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为进一步研究国产人工打洞法所结沉香中的化学成分,本研究采用硅胶柱色谱、SephadexLH-20、半制备高效液相等色谱方法从其乙酸乙酯萃取物中分离纯化得到2个单体化合物。根据核磁共振（NMR）、质谱（MS）等波谱数据分别鉴定为2-（2-苯乙基）色酮二聚体（+）-3′,3′′′-dihydroxy-4′,4′′′-dimethoxyaquisinenone G （1）和aquilasinenone F （2）,其中化合物1为新化合物。抗氧化活性测试结果表明,化合物1和2都对DPPH自由基具有一定的清除能力,其中化合物2的IC50值为（64.6±1.6）mol/L,阳性对照为L（+）-抗坏血酸。
关键词： 国产人工打洞沉香 2-（2-苯乙基）色酮二聚体 DPPH 分离鉴定
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幼林胶园覆盖葛藤改善土壤细菌群落结构
《中国土壤与肥料 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：行间覆盖绿肥是幼林胶园管理的主要方式之一。覆盖葛藤可以有效提升胶园土壤质量,以往的研究在改变胶园土壤微生物多样性和结构方面研究较少。通过幼林胶园行间覆盖葛藤试验,研究对胶园土壤细菌群落结构特征的影响。结果表明:覆盖葛藤提高了0～20 cm土层有机质含量24.38%和pH 4.60%,调节了土壤细菌群落结构。1379个细菌性OTUs比对注释在23门、55纲、103目、184科、366属;其中,丰度不低于0.5%的属分类水平上注释的29个细菌中,Achromobacter和Delftia丰度在覆盖葛藤后分别是不覆盖的31.94和7.22倍,Acinetobacter比不覆盖的显著降低13.30%。相关分析表明土壤有机质的升高是细菌群落变化的主要原因。研究表明,幼林胶园覆盖葛藤2年,提升土壤有机质和氮含量,调节土壤pH,改善土壤细菌群落结构,增强胶园物质转化与利用。
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不同滴灌施肥配比对香蕉产量、养分利用及经济效益的影响
《灌溉排水学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探索滴灌施肥在香蕉集约化种植模式下的应用效果,为香蕉科学合理施肥提供技术支持.[方法]采用田间试验方法,设置不施肥(CK)、A处理(N 309.7 kg/hm2,N、P2O5、K2O质量比为1.00:0.37:2.61)、B处理(N 619.3 kg/hm2,N、P2O5、K2O质量比为1.00:0.37:1.76)、C处理(N 619.3 kg/hm2,复合微量元素18.0 kg/hm2,N、P2O5、K2O质量比为1.00:0.37:1.76)共4个处理,每个处理重复3次,研究滴灌施用不同配比组合肥料对香蕉产量、肥料利用效率及经济效益的影响.[结果]滴灌水肥一体化条件下,施肥可显著提高香蕉的假茎围、青叶数、叶长(p<0.05),A处理香蕉产量达53781 kg/hm2,比传统的常规管理(B处理)提高9.7%;肥料农学效率和肥料偏生产力较处理B分别提高125.6%、72.6%.A处理纯收益为116614元/hm2,较B处理增加22.2%,产出投入比由1.95:1上升到2.18:1.[结论]综合考虑香蕉产量、化肥减施和养分高效利用及经济效益,滴灌优化施肥(N 309.7 kg/hm2,P2O5114.6kg/hm2,K2O 808.3 kg/hm2)在香蕉上的应用效果最好.
关键词： 滴灌;香蕉;水溶肥;产量;养分利用效率
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不同品种桑葚叶总酚含量及其抗氧化活性比较
《热带作物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：为了研究不同品种桑葚叶的总酚含量差异及应用价值,以收集引种的40个品种桑葚叶为研究对象,采用超声波辅助提取桑葚叶中酚类物质,以总酚提取率为指标,利用单因素试验和正交试验考察各因素对超声辅助提取桑葚叶总酚提取率的影响;采用DPPH自由基清除能力评价不同品种桑葚叶提取物的抗氧化能力,同时对不同品种桑葚叶中总酚含量及其抗氧化能力进行相关性分析。结果表明:超声辅助提取桑葚叶总酚的最佳工艺条件为:超声温度65℃、超声时间30 min、固液比1∶45（g/mL）、乙醇浓度60%,4个因素对桑葚叶总酚提取率影响大小顺序为:超声温度>超声时间>固液比>乙醇浓度。不同品种桑葚叶总酚含量差异较大,其中‘条桑五号’总酚含量最高,为（26.35±0.29）mg/g,‘滇桑’总酚含量最低,为（20.44±0.15）mg/g;不同品种桑葚叶抗氧化活性也存在差异,且趋势与总酚含量基本一致,‘条桑五号’桑葚叶抗氧化活性最强,清除DPPH自由基能力IC50为（77.64±0.34）mg/L,总抗氧化能力（FRAP）TEAC值为（2.58±0.11）mmol/g;‘滇桑’桑葚叶抗氧化活性最弱,清除DPPH自由基能力IC50为（210.30±0.19）mg/L,总抗氧化能力（FRAP）TEAC值为（0.73±0.04）mmol/g。桑葚叶总酚含量与其提取物抗氧化能力呈正相关,选择总酚含量高的桑葚品种栽培,可提高桑葚的综合附加值。
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地毯草黄单胞菌双组分系统VgrS-VgrR基因敲除及表型筛选
《微生物学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究地毯草黄单胞菌双组分系统VgrS-VgrR与致病性的关系,为木薯细菌性病害的高效防控提供分子生物学证据。【方法】采用同源重组方法构建vgrS和vgrR的插入失活突变体,用可移动的cosmid载体p HM1构建互补菌株。检测突变体的致病性、细菌游动性、胞外酶、胞外多糖的变化,观察细菌对H2O2和金属离子胁迫的反应。【结果】相比野生型菌株,vgrS和vgrR突变体接种寄主植物木薯后致病力显著降低,突变体的游动性减少、蛋白酶活性减弱、H2O2耐受性降低,在高浓度金属离子Fe2+、Fe3+、Cu2+、Ni2+、Zn2+、Co2+的胁迫条件下菌体生长显著减弱。然而,vgrS和vgrR突变体的胞外多糖含量显著升高,分别是野生型的2.14和1.89倍。【结论】阐明了VgrS-VgrR系统在细菌致病过程中发挥的重要作用,为鉴定VgrS-VgrR调控机制提供线索,为药物筛选提供靶向目标。
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