大鲵虹彩病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

周勇; 曾令兵; 孟彦; 周群兰; 张辉; 高正勇; 肖艺; 孙建滨; 《水产学报 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：利用PCR技术扩增出大鲵虹彩病毒(giant salamander iridovirus,GSIV)主要衣壳蛋白(MCP)编码区长度为1 392 bp的片段,克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19-T-MCP。经PCR鉴定确认正确后,以10倍梯度稀释pMD19-T-MCP重组质粒,作为标准模板进行TaqMan实时荧光定量PCR扩增,制作标准曲线,建立了大鲵虹彩病毒的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。制作的标准曲线有极好的线性关系,且线性范围宽,相关系数为0.990 19。组内重复试验的CT值标准偏差为0.52%。检测结果显示,该方法对大鲵虹彩病毒的检测有高度的特异性,与锦鲤疱疹病毒、弗氏柠檬酸杆菌、嗜水气单胞菌以及鲤上皮瘤细胞基因组DNA之间均无交叉反应,特异性好,检测总DNA灵敏度为10个病毒核酸分子拷贝数,约1.1×10-3 pg/μL病毒核酸,较之常规PCR的敏感度高出约1 000倍。研究建立的大鲵虹彩病毒TaqMan实时荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性强,对大鲵虹彩病毒病的快速诊断与病毒病原定量检测有重要意义。

关键词： 大鲵 虹彩病毒 主要衣壳蛋白 TaqMan实时荧光定量PCR

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弧菌病疫苗研究开发及其使用效果影响因素

巩华; 黄志斌; 《广东饲料 》 2012

摘要：弧菌属细菌的许多种类能引起人和养殖动物的疾病,霍乱曾经是人类历史上的瘟疫,即便到现在仍然时有发生,其致病菌就是霍乱弧菌(V.cholerae);而对海水养殖动物来讲,病原性弧菌是最重要的细菌性病原,该病在全世界范围内均有爆发的报道,它的流行给全世界海水鱼类、贝类及甲壳类动物养殖业造成了巨大的损失。有关鱼类弧菌

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养殖池塘系统反硝化作用研究现状及展望

范立民; 裘丽萍; 吴伟; 陈家长; 《安徽农学通报(上半月刊) 》 2012

摘要：简要陈述了反硝化作用的研究内容和方法;对池塘中肯定存在的和很可能存在的一些反硝化菌进行了列举;重点对池塘中的反硝化作用及影响因素和池塘作为一些大水体的模拟生境的特殊作用进行了阐述,并对今后一些重要研究内容进行了展望。

关键词： 养殖池塘 反硝化作用 研究现状 展望

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大口黑鲈北方亚种和佛罗里达亚种及其杂交子代的遗传分析

蔡磊; 白俊杰; 李胜杰; 陈昆慈; 樊佳佳; 马冬梅; 《中国水产科学 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：用18对微卫星引物对大口黑鲈北方亚种(Micropterus salmoides salmoides,N)、佛罗里达亚种(M.salmoides floridanus,F)及其正交子代(N♀×F♂)和反交子代(F♀×N♂)进行遗传多样性和遗传结构分析。结果表明,18对引物扩增出的等位基因数为2~8个,平均等位基因数为5.0。检测到6对(Jzl48、Jzl68、Jzl84、MiSaTPW76、Msal21、Mdo6和Mdo7)亚种间特异性引物,其中有2对引物(Jzl48和Mdo7)可以用来鉴别大口黑鲈北方亚种、佛罗里达亚种和其杂交子代。平均有效等位基因数、平均期望杂合度和平均多态信息含量均为杂交组合F♀×N♂最高,分别为3.199 7,0.638 9和0.570 6,平均观测杂合度为杂交组合N♀×F♂最高(0.848 8)。对亲代与杂交子代间的遗传分化分析表明,正反交子代均与北方亚种的遗传分化最小(0.092和0.119 6)。基于Nei’s遗传距离构建的UPGMA系统进化树显示正交子代N♀×F♂与母本N聚为一支,反交子代F♀×N♂与父本N聚为一支。

关键词： 大口黑鲈北方亚种 佛罗里达亚种 杂交 微卫星标记 遗传关系

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4个不同地理种群中华鳖POMC基因全长cDNA克隆及其序列分析

张林; 邹世平; 艾晓辉; 吴涛; 《华中农业大学学报 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：为探讨中华鳖不同地理种群的POMC基因的多态性,建立区分中华鳖不同地理种群的分子遗传标记,采用RT-PCR的方法扩增得到4个不同地理种群(太湖鳖种群、沙鳖种群、台湾鳖种群和黄河鳖种群)中华鳖的POMC基因,对该基因进行克隆及序列测定,并对所测序列进行比较,分析其SNP位点,并对所得的SNP位点进行验证。结果显示:4个不同地理种群中华鳖所扩增的POMC基因的核苷酸序列均为786bp;以megalign软件比较分析4个不同地理种群中华鳖的POMC基因,发现该序列中共有15个多态性核苷酸位点,经过验证,第129位核苷酸的变异为台湾鳖种群不同于其他种群的变异,第441位核苷酸变异为太湖鳖种群不同于其他种群的变异,第168和396位核苷酸为黄河鳖种群不同于其他种群的变异,第531和618位核苷酸为沙鳖种群不同于其他种群的变异。结果表明,中华鳖的POMC基因存在多态性,不同地理种群中华鳖POMC基因均有各自特异的核苷酸序列,可以作为区分中华鳖的不同地理种群的分子遗传标记。

关键词： 中华鳖 不同地理种群 POMC基因 单核苷酸多态性 分子遗传标记

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鲟鱼软骨素提取工艺研究

郝淑贤; 魏涯; 李来好; 杨贤庆; 林婉玲; 胡晓; 黄卉; 岑剑伟; 《食品工业科技 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：以西伯利亚鲟鱼骨为原料,对比不同提取工艺对鲟鱼软骨素提取效果的影响,优化确定鲟鱼软骨素酶解的最佳工艺条件,并对分离纯化方案进行初步研究。结果表明,碱解与酶相结合的提取路线能使鲟鱼软骨素提取产品有更高的纯度,最佳工艺为原料加入1∶6(m/v)的6%NaOH,40℃水浴条件下碱解7h,用盐酸调至pH7,加入1%胰蛋白酶,在50℃水浴条件下酶解7h,95℃加热5min灭酶,冷却至室温,调pH至中性,加入1∶1.25(v/v)95%乙醇,在4℃沉淀8h,沉淀物用烘箱45℃干燥约2h,得到的鲟鱼软骨素粗产品得率为16.65%,产品中氨基己糖含量为17.35%。

关键词： 硫酸软骨素 软骨 碱解 酶解

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温度对施氏鲟幼鱼摄食、生长和肠道消化酶活性的影响

白海文; 张颖; 李雪; 孙大江; 《中国水产科学 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：研究不同养殖温度(15℃、18℃、21℃、24℃、27℃)对施氏鲟(Acipenser schrenckii)幼鱼摄食、生长和肠道消化酶活性的影响。结果表明,在15～24℃范围内,幼鱼的特定生长率(SGR)和相对增重率(RWG)随温度的升高而显著增加(P<0.05),均在24℃时达到最高值;随着温度升高,其饵料系数(FC)先降低后升高(P<0.05),且在24℃时达到最小值;此外,摄食率(FR)随着温度的升高而显著升高(P<0.05),其不同温度组的生长速度由高到低依次为24℃、21℃、27℃、18℃、15℃组。温度对幼鱼前肠蛋白酶活性影响显著,24℃组和27℃组前肠的蛋白酶活性显著低于15℃组(P<0.05),而温度对中肠和后肠蛋白酶活性则无显著性影响(P>0.05);温度对幼鱼肠道脂肪酶活性无显著性影响(P>0.05),各温度组前肠脂肪酶活性均高于中肠和后肠;温度对幼鱼肠道淀粉酶活性无显著性影响(P>0.05)。综合以上结果认为,施氏鲟幼鱼快速生长的适宜温度范围为21～24℃,在此温度范围内施氏鲟幼鱼可获得最大生长率和存活率。

关键词： 施氏鲟 温度 摄食 生长 消化酶

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中国对虾血淋巴细胞的原代培养及其与量子点标记的VP37p的作用

李倩; 刘庆慧; 《动物医学进展 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：血淋巴细胞是对虾白斑综合征病毒(WSSV)靶细胞之一,WSSV结构蛋白与血淋巴细胞的作用在病毒感染中起重要作用。论文主要研究中国对虾血淋巴细胞的原代培养及在原代细胞培养条件下观察重组表达的对虾白斑综合征病毒VP37片段(VP37p)与对虾血淋巴细胞的作用。试验表明,中国对虾血淋巴细胞体外培养可存活12d,体外培养的对虾血淋巴细胞与量子点标记的VP37p具有相互作用。

关键词： 中国对虾 血淋巴细胞 原代培养 量子点标记 对虾白斑综合征病毒VP37片段

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HACCP在液熏太平洋牡蛎罐头加工中的应用

朱兰兰; 周德庆; 殷邦忠; 李钰金; 刘淇; 《食品工业 》 2012 北大核心

摘要：将危害分析与关键控制点(HACCP)体系应用于液熏太平洋牡蛎罐头的生产过程中。通过分析产品生产过程中存在或潜在的危害,确定关键控制点、关键限值,并在关键控制点提出了监控、纠偏措施,保证了牡蛎罐头产品的卫生质量和食用安全。

关键词： HACCP 液熏工艺 太平洋牡蛎

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黄芪多糖对草鱼的安全性研究

刘春花; 黄志斌; 石存斌; 江小燕; 罗霞; 林明辉; 王秀敏; 《广东农业科学 》 2012 北大核心 CSCD

摘要：设空白对照组、推荐剂量组(每千克鱼体重每天添加10 mg)、3倍推荐剂量组、5倍推荐剂量组,空白组投喂正常日粮,试验组按剂量添加黄芪多糖,连续投喂21 d,发现喂养期间各组草鱼无异常现象,3个试验组草鱼的健康状况良好;分别在第0、8、15、22 d抽样采取试验草鱼全血及血清进行临床病理学检测,发现投喂各剂量黄芪多糖的试验组草鱼的血常规指标和血液生化指标与对照组无显著性差异;试验结束时测定草鱼的体重,试验组生长速率高于对照组,其中推荐剂量组和5倍推荐剂量组与对照组差异显著(P<0.05);对3个试验组及空白对照组的肝、肾、脾进行组织组织切片,未观察到试验组草鱼与对照组草鱼的细胞和组织结构上的异常。表明在生产应用上,以推荐剂量投喂养殖水产动物是安全可靠的,达到5倍推荐剂量时也没有安全性问题,黄芪多糖可以作为一种安全的免疫增强剂应用于水产养殖业。

关键词： 黄芪多糖 草鱼 临床病理学 组织病理学

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