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基于量子点技术的猪伪狂犬病病毒gB抗体免疫层析试纸研究

中国畜牧兽医 2023 北大核心 CSCD

摘要:【目的】建立一种基于量子点(quantum dots, QDs)技术的猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)gB抗体免疫层析试纸,为PRV疫苗免疫效果评估提供一种快速、简便的检测技术。【方法】选用昆虫细胞表达系统表达的gB蛋白,采用羧基修饰的水溶性QDs,在偶联剂1-乙基-3[3-二甲基氨基丙基]碳二亚胺盐酸盐(EDC)的作用下制备gB-QDs荧光标记物。将金黄色葡萄球菌蛋白A(Staphylococcus aureus protein A,SPA)和抗gB蛋白的单克隆抗体分别固定在硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,将样品垫、标记垫、吸水垫、支撑底板按生产工艺组装成基于QDs的荧光免疫层析试纸。检测该试纸的特异性、敏感性及与商品化ELISA试剂盒的符合率。【结果】敏感性试验结果显示,该试纸的敏感性为1∶6 400。特异性试验结果显示,该试纸与猪瘟病毒(CSFV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)阳性血清均无交叉反应,特异性为100%。通过检测田间猪血清样品,对比商品化ELISA检测试剂盒,结果显示,113份田间猪血清样品中,两种方法检测结果不一致的血清有11份,结果一致的血清有102份,该试纸与商品化ELISA试剂盒的符合率为90.3%。【结论】本研究制备的试纸检测线紫外灯下显色清晰可见,辨识度高,具有较高的特异性和敏感性,可用于PRV gB抗体的检测。

关键词: 伪狂犬病病毒(PRV) 量子点 抗体 试纸

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内源性成分对低GI挂面消化特性的影响

食品工业科技 2023 北大核心 CSCD

摘要:为研究内源性成分对杂粮复配低升糖指数(glycemic index,GI)挂面消化特性的影响,首先制备了以荞麦、山药、高直链玉米淀粉、小麦粉为原料的杂粮复配挂面,测定得到其GI值为53.02;在此基础上,对杂粮复配挂面的原料粉进行脱除酚类、脂类、蛋白质类、膳食纤维类等内源性成分后再分别制备成挂面,进行体外模拟消化.研究内源性成分对于挂面的淀粉水解率、蛋白消化率、结肠发酵环节的影响及作用机理.结果表明,分离内源性成分后制备的挂面,它们的淀粉水解率均明显上升,且预估升糖指数(estimated glycemic index,eGI):脱脂挂面(68.76)>脱蛋白挂面(67.94)>脱膳食纤维挂面(63.62)>脱酚挂面(60.16)>低GI挂面(53.02);挂面的蛋白消化率:脱膳食纤维挂面(65.04%)>低GI挂面(33.71%)>脱酚挂面(17.55%)>脱脂挂面(6.61%);相较于小麦挂面,杂粮复配低GI挂面中的抗性淀粉显著提升了结肠发酵环节中短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)的含量,有助于宿主的糖脂代谢调节、能量代谢和供能.

关键词: 杂粮复配 低GI挂面 内源性成分 淀粉水解率 蛋白消化率

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混合实验仪(Mixolab)评价筛选优质饺子粉

食品工业科技 2023 北大核心 CSCD

摘要:利用混合实验仪对优质饺子粉进行评价筛选研究,旨在为达成饺子专用粉高效在线配粉提供理论支撑.本研究以市场上现有的 30种饺子粉为研究对象,通过分析面粉的白度、湿面筋含量、流变学特性、糊化特性等理化指标和饺子皮感官评分,比较不同饺子粉品质差异性,运用聚类分析将上述面粉进行等级分类.结合混合实验仪软件的内置功能Chopin+标准协议对优类饺子粉进行测定并制作目标剖面图.利用该剖面图实现了郑麦 136、郑麦366和新麦 26等 3种基础粉的饺子皮配粉应用.结果表明,30种饺子粉品质性状的变异系数大小依次为:形成时间>稳定时间>粉质质量指数>弱化度>面筋指数>衰减值>最低粘度>峰值粘度>湿面筋含量>糊化温度>吸水率>白度>峰值时间>感官评分,其中形成时间的变异系数最大,为 68.59,感官评分变异系数最小,为 0.11.在欧式距离5处可将 30种饺子粉分为三大类群.其中,第二类有 16个样品,其稳定时间、峰值粘度、最终粘度和感官评分均为三类中最佳,将其归为优质饺子粉.所得到的优质饺子粉目标剖面图的吸水率指数范围在 8~9,混合指数范围为 5~7,面筋+指数范围在 5~6,粘度指数范围为 5~7,淀粉酶指数范围为 7~8,回生指数范围在 7~8.利用混合试验仪对 3种基础粉和 10种不同比例的混合粉进行测定,从 6个指数综合分析发现混合粉 7:2:1、6:3:1、6:2:2、5:4:1均落在优质饺子粉目标剖面图的范围内,说明该 4种混合粉适合饺子加工,考虑优麦成本,可选取 7:2:1作为最优配比.该研究可为企业生产高质量的饺子专用粉和面粉品质控制提供理论参考.

关键词: 饺子粉 聚类分析 配粉 混合实验仪 目标指数剖面图

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谷子苗期耐低氮相关性状的QTL分析

中国农业科学 2023 北大核心 CSCD

摘要:[目的]分析谷子(Setaria italica L.)耐低氮性状相关的QTL,为耐低氮基因的精细定位、克隆及功能研究奠定基础,同时,也为揭示谷子耐低氮遗传机理和培育耐低氮谷子品种提供技术支撑.[方法]以耐低氮品种豫谷28 和低氮敏感品种七叶黄为亲本构建的包含120 个家系的重组自交系(RIL)群体为试验材料,在谷子苗期进行低氮和正常氮处理,并对处理21 d 的水培幼苗的苗长、主根长、根干质量、苗干质量、总干质量、叶绿素相对含量、植株含氮量7 个性状进行分析.同时,采用复合区间作图法(composite interval mapping,CIM)对耐低氮相关性状进行QTL 定位与分析,并对QTL 置信区间内的候选基因进行预测.[结果]在低氮和正常氮水平下,RIL 群体的耐低氮相关性状均表现为连续正态分布,且呈双向超亲分离现象,符合典型的数量性状遗传特点,适于QTL 分析.相关分析表明,苗长与主根长、根干质量、苗干质量、总干质量、叶绿素相对含量呈极显著正相关,主根长与植株含氮量呈显著负相关.共定位到低氮和正常氮水平下与苗长、主根长、根干质量、苗干质量、总干质量、叶绿素相对含量及植株含氮量相关的34 个QTL,分布于第1-9 染色体,单个QTL 表型贡献率为5.15%—52.42%.其中,2 种氮水平下共同定位到10 个QTL,低氮和正常氮单一环境下分别定位到11 和13 个QTL.15 个为主效QTL,qRDW3、qMRL1.1、qMRL1.2、qSL5和qSPAD1 5 个主效QTL 在2 种氮水平下均被定位到.共检测到5 个QTL重叠区,聚集了2 种氮水平下多个性状的QTL,通过基因预测与功能注释,筛选出5 个QTL 置信区间内6 个与氮代谢相关的候选基因,表明氮同化、吸收和利用相关基因极有可能控制了这些基因的表达.[结论]34 个QTL 分别聚集于9 条染色体上的16 个QTL 簇,基于基因注释,共筛选了6 个与谷子氮代谢相关的候选基因,表明不同性状参与到了共同遗传机制,并可通过分子标记辅助选择进行耐低氮有利等位基因的聚合育种.

关键词: 谷子 重组自交系(RIL) 耐低氮 QTL

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4型副猪嗜血杆菌crp基因缺失株的构建及生物学特性分析

农业生物技术学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis, HPS)是引起猪(Sus scrofa)革拉泽氏病(Glasser’s disease)的病原,是临床上危害猪群健康的最为严重的细菌性病原之一。副猪嗜血杆菌血清型众多,其中4型是分离比例最高的血清型,也是危害较为严重的血清型。crp是编码环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)受体蛋白(cAMP receptor protein, CRP)的基因,CRP是最重要的系统调控因子之一,在细菌感染过程中适应环境变化具有重要作用。为了研究crp基因对4型副猪嗜血杆菌生长、抗性和毒力等生物学特性的影响,本研究采用自然转化法构建了4型副猪嗜血杆菌临床分离株HPS4的crp基因缺失株Δcrp,对HPS4及Δcrp的形态、生长特性、生物膜形成、压力耐受、血清杀菌活性、铁利用率和小鼠(Mus musculus)毒力等进行了研究。结果表明,本研究成功构建了4型副猪嗜血杆菌临床分离株HPS4的crp缺失株Δcrp,HPS4的crp基因缺失后,生长显著减慢,生物膜形成能力明显减弱,对渗透压、氧化应激和热应激的耐受能力降低,在血清中的存活能力下降,对铁的利用能力降低,对小鼠的毒力降低。研究结果表明,crp基因对HPS4的生长、抗性和毒力有明显的影响。本研究为进一步探究crp基因的功能,筛选HPS4弱毒株提供基础资料。

关键词: 4型副猪嗜血杆菌(HPS4) cAMP受体蛋白(crp)基因 缺失株 构建 抗性 毒力

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香菇采后品质劣变与保鲜技术研究进展

食品工业科技 2023 北大核心 CSCD

摘要:鲜香菇(Lentinus edodes)因其水分含量高、呼吸和蒸腾作用强、易受微生物污染而在贮藏和运输过程中容易出现水分、营养及风味损失,组织褐变、腐烂及开伞老化等现象,严重限制了香菇保鲜产业发展.因此,本文概述了上述现象产生的原因,综述了香菇保鲜技术研究现状、作用原理及成效,包括物理保鲜(低温保鲜、气调保鲜、冷杀菌保鲜)、化学保鲜、生物保鲜及复合保鲜技术,归纳了香菇采后劣变及保鲜技术相关研究中存在的问题并做出展望,为香菇采后保鲜技术的研究方向及绿色保鲜产品的开发提供参考.

关键词: 香菇 采后 劣变因素 劣变原因 保鲜技术

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壳寡糖浸种对低温下花生种子萌发及生理代谢的影响

中国油料作物学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:为提高播种期花生抗寒性,明确壳寡糖(COS)浸种对低温条件下花生种子发芽及生理代谢的影响,测定COS浸种后种子发芽及相关生理指标.结果表明,与低温对照(CK)相比,COS(250 mg/L)浸种显著提高了低温下花生种子的发芽能力,发芽率和相对发芽率均增加了44.45个百分点、发芽指数和种子活力指数分别增加了5.59和24.83;COS浸种也显著提高了发芽过程中花生种子的赤霉素(GA)含量,降低了脱落酸(ABA)含量,发芽0、12、24、36、48 h的GA含量分别显著提高了7.94%、3.84%、8.52%、12.40%、19.20%,ABA含量分别显著降低了38.41%、36.99%、38.03%、41.20%、40.12%;同时,COS浸种提高了脂肪酶(LIP)、蛋白酶(PR)、α-淀粉酶(α-AMS)和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)的活性,增加了三磷酸腺苷(ATP)和可溶性糖(SS)、可溶性蛋白(SP)、脯氨酸(Pro)的含量,降低了丙二醛(MDA)和过氧化氢(H2O2)的含量.研究表明,COS通过调节低温下花生种子发芽初期的激素水平、提高水解酶活性,促进贮藏物质分解,并提高抗氧化物酶活性、增加渗透调节物质含量,减缓脂膜过氧化,促进种子萌发.

关键词: 花生 壳寡糖 种子发芽 低温 激素 抗氧化酶促系统

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二化螟对双酰胺类杀虫剂抗性的分子机制研究进展

农药学学报 2023 北大核心 CSCD

摘要:新型双酰胺类杀虫剂已广泛用于保障水稻生产,而二化螟作为危害水稻生产的钻蛀性害虫,已经对该类杀虫剂产生了抗性,明确该类杀虫剂抗性分子机制,可为二化螟抗性快速检测和绿色防控提供技术支撑。本文在总结二化螟对双酰胺类杀虫剂抗性现状的基础上,重点综述了近年来有关其抗性分子机制研究的进展,主要包括解毒酶和转运蛋白基因过表达介导的代谢抗性,以及鱼尼丁受体基因突变介导的靶标抗性;指出了该研究领域在抗性分子检测、抗性新基因鉴定、抗性基因调控网络和多重抗性机制等方面存在的问题,并展望了其发展方向,认为:利用高通量测序技术检测害虫种群抗药性;利用多组学技术鉴定新抗性基因及调控网络,以探明多重抗性机制;将反向遗传学工具放射性配基结合及电生理技术深入验证抗性基因功能;需开发靶向抗性基因的dsRNA转基因作物、纳米农药及选择性新型化学杀虫剂,以达到杀虫剂减施增效的目的。

关键词: 二化螟 双酰胺类杀虫剂 代谢抗性 靶标抗性 抗性分子机制

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紫云英还田与化肥减量配施对稻田土壤细菌群落组成和功能的影响

环境科学 2023 EI 北大核心 CSCD

摘要:紫云英是豫南稻区土壤培肥的重要有机肥资源,探究紫云英还田与化肥减量配施对稻田土壤理化性质和细菌群落特性的影响,旨在为该区域的土壤培肥和化肥减量提供依据.开展连续12 a田间定位试验,设置了 6个施肥处理(空白对照,CK;单施化肥,F100;80%化肥和22.5 t·hm-2紫云英还田量配施,MV1F80;80%化肥和45 t·hm-2紫云英还田量配施,MV2F80;60%化肥和22.5 t·hm-2紫云英还田量配施,MV1F60;60%化肥和45t·hm-2紫云英还田量配施,MV2F60).通过采用高通量测序方法比较不同施肥处理对土壤细菌群落多样性、组成和结构特性的影响;采用FAPROTAX功能预测的方法分析不同施肥处理间功能类群的丰度差异,并结合土壤理化性质,探究改变土壤细菌群落结构与功能特性的关键土壤环境因子.结果表明,紫云英还田与化肥减量配施降低了土壤容重,提高了土壤有机碳(SOC)、全氮(TN)、全磷(TP)和全钾(TK)含量,较CK提高的范围分别为12.7%~35.5%、38.2%~65.7%、66.7%~95.2%和20.3%~31.6%.紫云英还田与化肥减量配施处理较F100处理降低了细菌Sobs指数和Shannon多样性指数,且Sobs指数和Shannon多样性指数均与容重(BD)呈显著正相关(P<0.05),而与SOC和TN呈显著负相关(P<0.05).MV1F80和MV2F60处理的厚壁菌门(Firmicutes)的相对丰度较F100处理分别提高了 82.2%和67.4%(P<0.05),而酸杆菌门(Acidobacteria)的相对丰度分别减少了 32.6%和40.5%(P<0.05),仅MV2F60处理放线菌门(Actinobacteria)的相对丰度提高了 30.0%(P<0.05).RDA分析表明,土壤SOC、TN和TK是显著影响细菌群落结构变化的主要土壤环境因子(P<0.05).紫云英还田与化肥减量配施处理还提高了化能异养类、固氮类、发酵类和尿素分解类功能类群丰度,降低了动物寄生或共生类、人类所有病原体和人类病原体肺炎类功能类群丰度,其中MV1F80和MV2F60处理效果较好.综上所述,长期的紫云英还田与化肥减量配施改善了土壤理化性质,进而改变了土壤细菌群落结构与功能特性,有助于稻田土壤肥力的提升、微生态系统的稳定和健康,进而保障区域农业的绿色可持续发展.

关键词: 化肥减量 紫云英还田 土壤理化性质 细菌群落 功能预测

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萌发期耐莠去津苜蓿种质资源筛选及评价

种子 2023 北大核心 CSCD

摘要:为探讨苜蓿萌发期耐除草剂莠去津特性,分析莠去津胁迫下37份苜蓿品种的生长发育特性,建立其筛选的评价体系,筛选萌发期耐莠去津苜蓿种质,将莠去津耐性度量值(A值)、平均隶属函数值(AFV值)、加权关联度系数(WAC值)与相关性分析、主成分分析、聚类分析相结合,鉴定苜蓿材料萌发期对莠去津的耐性。结果表明,在21 mg/L的莠去津溶液胁迫下,37份苜蓿品种幼苗的根长、干重与SPAD值受抑制较为严重。根据A值、AFV值、WAC值的综合排序结果,对莠去津耐性较强的品种是要塞、菲力、驯鹿。A值聚类分析将供试品种分为4个耐性级别,其中Ⅰ级仅有1份(要塞),Ⅱ级13份,Ⅲ级9份,Ⅳ级14份。综合评价排序得出,对莠去津耐性最强的品种为要塞,其次为菲力、迪特、驯鹿,这几个品种可作为苜蓿耐莠去津育种和耐性机理研究的重要种质资源。

关键词: 苜蓿 耐莠去津 萌发期 综合评价

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