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犬瘟热病毒H蛋白与RIG-I互作抑制β干扰素转录活性的研究

中国兽医科学 2021 北大核心 CSCD

摘要:为研究犬瘟热病毒(CDV)H蛋白对β干扰素信号通路的影响,构建不同CDV毒株H蛋白真核表达质粒以及CDV H蛋白不同截短体真核表达质粒,分别与β-IFN-Luc基因报告质粒和内参质粒pRL-TK共转染细胞,用双荧光素酶报告基因试剂盒检测CDV H蛋白对仙台病毒(SeV)诱导β干扰素的影响以及RIG-I(N)、MAVS、TBK1和IKK-i等信号分子在H蛋白介导的β干扰素转录活性的作用,通过激光共聚焦试验和GST-pull down试验检测CDV H蛋白与RIG-I(N)的相互作用。结果,CDV2野毒株H蛋白能够特异地抑制SeV感染诱发的β干扰素转录活性,而且这种抑制作用与RIG-I(N)激活相关。激光共聚焦试验显示,CDV2野毒株H蛋白与RIG-I(N)在细胞质中存在共定位现象;GST-pull down试验证明了CDV2野毒株H蛋白与RIG-I(N)存在直接的相互作用;H蛋白截短表达试验证明其N端结构域(1-462 bp)是抑制β干扰素转录活性的关键结构域。本项目的成功开展为深入研究CDV H蛋白抗宿主天然免疫机制奠定了基础,对该病的预防和治疗具有重要意义。

关键词: 犬瘟热病毒 H蛋白 RIG-I β干扰素 相互作用

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基于重测序鉴定SbHKT基因在陆地棉基因组中的插入位点

棉花学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:【目的】明确SbHKT基因棉花HKT-1株系的插入位点序列特征。【方法】对HKT-1株系重测序,本地BlastN比对获得插入位点处的侧翼序列,设计聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)特异引物验证插入位点的准确性。【结果】获得SbHKT基因插入位点处107 bp的左边界(Left border,LB)端侧翼序列HKT1_LSEQ,122 bp的右边界(Right border,RB)端侧翼序列HKT1_RSEQ;锚定基因组后显示SbHKT基因的插入引发了陆地棉染色体结构变异。分别根据LB和RB端侧翼序列设计PCR特异引物扩增HKT-1株系T-DNA全长,目的条带含有完整的T-DNA骨架序列以及Sb HKT基因序列,证实HKT1_LSEQ和HKT1_RSEQ是同一个插入位点的左右侧翼序列。【结论】基于重测序技术获得了Sb HKT基因在陆地棉基因组中的侧翼序列,建立了SbHKT基因转化体特异性检测方法。

关键词: 陆地棉 重测序 SbHKT 插入位点 侧翼序列

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我国近10年国家自然科学基金生命科学部资助情况分析

江苏农业科学 2021 北大核心

摘要:国家自然科学基金(NSFC)是国家支持生命科学领域基础研究的主要渠道之一。通过对2010—2019年国家自然科学基金生命科学部资助项目的概况、项目类型、学科、地区、机构、学者等进行深入分析,全面了解近10年NSFC生命科学部的资助情况。结果表明,近10年生命科学部资助数量和资助金额的变化趋势基本一致;面上项目、青年科学基金、地区科学基金、国际(地区)合作与交流项目、重点项目、重大研究计划等是资助的主要项目类型。生命科学部涉及学科门类众多,农业基础与作物学、食品科学、生态学、植物学、林学与草地科学等学科获得的支持力度最大。各地区之间获得的资助数量和资助金额差距很大,北京市远高于其他地区;各机构类型和机构间均差距悬殊,中国科学院的资助数量和资助金额远高于其他机构;各机构的研究重点聚焦在生物、农业、生态环境、林学与草学、食品科学与水产5个领域。高资助数量学者呈现出职称高、机构集中等特点。该结果可为我国生命科学领域的科技创新、管理决策及基金项目申报提供数据参考。

关键词: 生命科学部 国家自然科学基金(NSFC) 资助数量 资助金额

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羟基红花黄色素A对LPS诱导的羊子宫内膜上皮细胞炎性反应的抑制作用

中国兽医学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:为了探讨羟基红花黄色素A(HYSA)对LPS诱导的羊子宫内膜上皮细胞炎性反应的抑制作用,用50 mg/L LPS作用细胞12 h,构建子宫内膜上皮细胞炎性反应模型。分别用60,80,100 mg/L HYSA作用子宫内膜上皮细胞炎性反应模型12 h,通过ELISA检测细胞上清中炎症因子TNF-α、IL-1β和IL-6的含量,用Western blot检测p-p38、p-JNK蛋白的表达。结果表明,LPS处理后12 h, TNF-α、IL-1β和IL-6的含量与对照组相比显著增加(P<0.05),p-p38、p-JNK蛋白的相对表达量极显著增加(P<0.01)。HYSA作用后12 h, 80 mg/L HYSA处理组IL-1β和IL-6的含量显著降低(P<0.05);60,80,100 mg/L HYSA处理组TNF-α的含量极显著降低(P<0.01)。HYSA作用后12 h, 60,80,100 mg/L处理组p-JNK蛋白的相对表达量与对照组相比极显著降低(P<0.01);80,100 mg/L处理组p-p38蛋白的相对表达量与对照组相比极显著降低(P<0.01)。由上可知,HYSA可以降低TNF-α、IL-1β和IL-6的表达量及p-p38、p-JNK蛋白的相对表达量,对羊子宫内膜上皮细胞炎性反应有抑制作用,其最佳质量浓度为80 mg/L。

关键词: 羟基红花黄色素A 子宫内膜上皮细胞 炎性反应 抑制作用

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甘薯中糖组分含量与甜度的相关性分析

江苏农业科学 2021 北大核心

摘要:以50份甘薯种质资源为研究对象,采用高效液相色谱法测定熟化前后薯块中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量并计算生化甜度,再与食味评价的甜度结果进行相关性分析。结果表明,生鲜薯和熟化薯中均含有4种可溶性糖组分,生鲜薯中蔗糖含量最高;而熟化薯块中,麦芽糖含量大幅增加,可溶性总糖含量高低主要由麦芽糖含量决定。熟化薯生化甜度与食味甜度的相关系数最大(r=0.97),因此选择熟化薯中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量作为自变量,食味甜度作为因变量,进行多元线性逐步回归分析,选择R2最大(0.938)时拟合模型,建立的回归方程较好,因变量对自变量的解释度较高。熟化薯可溶性总糖组分对甜度的贡献大小依次为果糖>麦芽糖>蔗糖>葡萄糖,其中果糖和麦芽糖2种组分对甜度的贡献超过60%,处于主导地位,可以作为反映甘薯甜度的核心指标。

关键词: 甘薯 糖组分 甜度 相关性分析 高效液相色谱 熟化薯 可溶性总糖

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瓜尔豆魔芋胶的复配胶结合超声处理对鸡血豆腐凝胶特性及其作用力的影响

食品与发酵工业 2021 北大核心 CSCD

摘要:为研究复配胶结合超声处理对鸡血豆腐凝胶特性及其作用力的影响,该文以持水性、凝胶强度和低场核磁性质来评价其品质优劣,并从疏水性、游离巯基含量及蛋白分子间作用力探究其凝胶形成的机理.结果表明,添加瓜尔豆魔芋胶的复配胶结合超声处理后,鸡血豆腐持水性提高21. 88% 、凝胶强度由1. 48 N提升至1. 80 N,疏水性显著提高(P<0. 05);低场核磁性质显示鸡血豆腐内部结合水占比90%以上,瓜尔豆魔芋胶的复配胶结合超声处理后T21弛豫时间提前了293. 90 ms,说明鸡血豆腐中的水分子结合性加强;分子作用力结果表明,鸡血豆腐凝胶形成的作用力主要为氢键、疏水作用力和二硫键,且二硫键的作用力远大于离子键、氢键及疏水相互作用,说明影响鸡血凝胶的最主要的作用力是二硫键.该研究可为肉鸡养殖与屠宰加工企业提高产品附加值提供理论依据.

关键词: 复配胶;超声;凝胶特性;分子间作用力

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水稻品种抗南方水稻黑条矮缩病人工接种鉴定技术规程

江苏农业科学 2021 北大核心

摘要:南方水稻黑条矮缩病是我国一类农作物病虫害,严重威胁水稻生产和粮食安全.种植抗(耐)病品种是防控该病害的有效措施,但对水稻品种的抗病性评价至今尚未有具体操作规程可循.针对水稻品种抗病鉴定评价及抗源筛选的迫切需求,作者在多年实践的基础上,总结制定了抗南方水稻黑条矮缩病人工接种鉴定技术及评价规程,包括有关术语定义,人工接种鉴定流程、结果调查和抗病性评价等,为规范开展水稻品种抗病性鉴定提供指导和参考.本标准适用于水稻品种及育种材料抗南方水稻黑条矮缩病性状的鉴定与评价.

关键词: 南方水稻黑条矮缩病;接种;抗性鉴定;规程;抗病性评价;人工接种鉴定技术

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盐胁迫下四个水稻类受体蛋白激酶的功能分析

中国水稻科学 2021 北大核心 CSCD

摘要:【目的】盐胁迫是制约水稻生长和产量主要逆境之一,研究盐胁迫响应基因对于了解植物耐盐机理和培育耐盐水稻品种具有重要意义。类受体蛋白激酶RLK(receptor-like protein kinases)广泛参与调控植物细胞信号转导和对逆境胁迫的响应过程。本研究的目的是分析盐胁迫下四个RLK基因的表达模式和生物学功能。【方法】通过荧光定量PCR检测4个RLK基因在NaCl处理下的表达变化以及在不同组织器官中的表达情况,同时利用CRISPR/Cas9对4个RLK基因分别进行编辑。【结果】4个RLK基因的转录均受NaCl诱导或抑制,其中Os04g0275100基因和Os07g0541900基因主要在根中表达;Os09g0353200基因主要在叶片中表达;Os01g0852100基因在根、茎、叶、叶鞘中均有表达。通过测序分别筛选到4个基因的功能缺失突变体,耐盐性实验结果表明四个基因的突变体对NaCl的敏感程度与野生型一致。【结论】鉴定的4个RLK基因的转录受NaCl调控且表达具有组织特异性,突变单个RLK基因不影响水稻的耐盐性。为进一步揭示盐胁迫下RLK基因的功能和作用机制奠定了基础。

关键词: 类受体蛋白激酶 盐胁迫 基因编辑 粳稻

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淮稻5号化学诱变突变体库的构建与基因快速定位

江苏农业科学 2021 北大核心

摘要:淮稻5号是江苏地区粳稻主栽品种之一,该品种具有灌浆速度快、出糙率高、千粒质量高、抗倒能力强、耐低温等特点。但由于缺少适宜的研究材料,淮稻5号中优良农艺性状的调控机制一直没有得到解析。突变体是研究基因功能最直接、最有效的途径之一,本研究利用N-甲基-N-亚硝脲(MNU)化学诱变构建了包含3 562个家系的淮稻5号突变体库,并从中筛选获得了512个表型稳定的突变体,包括株型、叶色、育性、抽穗期、早衰、类病斑等8种类型,利用MutMap技术完成了2个株型突变体的突变位点初步定位,该突变体库的构建及MutMap技术的应用,以期为淮稻5号优良性状的解析提供突变体资源。

关键词: 淮稻5号 MNU 突变体库 MutMap

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南方根结线虫中国分离群体种内变异分析

植物保护学报 2021 北大核心 CSCD

摘要:为调查我国不同地区和不同寄主上的根结线虫Meloidogyne spp.种类分布以及群体变异情况,基于酯酶和苹果酸脱氢酶同工酶图谱及SCAR分子标记技术对2017—2019年从6省19种植物根部组织分离到的40个根结线虫群体进行鉴定,针对南方根结线虫M. incognita群体分别通过寄主鉴别法进行生理小种鉴别,利用携带Mi抗性基因的番茄进行毒力测试,对2龄幼虫的口针长度和体长进行测量,并对核糖体ITS和线粒体Nad5基因序列进行比较分析。结果显示:根结线虫分离群体经鉴定包括38个南方根结线虫群体和2个象耳豆根结线虫M. erterolobii群体;38个南方根结线虫群体中有35个群体被鉴别为1号生理小种,其余3个群体被鉴别为2号生理小种;发现1个南方根结线虫群体CN19可在携带Mi抗性基因的番茄上侵染繁殖,为毒性群体,其余群体无法进行侵染和繁殖,为无毒群体。南方根结线虫群体2龄幼虫的口针长度和体长均差异较大,而不同寄主来源分离群体的ITS和Nad5基因序列也存在一定变异。基于ITS和Nad5基因序列构建的系统发育树将所有根结线虫群体归为南方根结线虫和象耳豆根结线虫组成的2个独立分支,但不能确定南方根结线虫不同群体的分子进化与其寄主来源和地理分布之间的相关性。

关键词: 根结线虫 南方根结线虫 象耳豆根结线虫 鉴定 种内变异 生理小种 同工酶图谱

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