药用植物苦参SSR-PCR体系的优化与验证

段永红; 渠云芳; 王长彪; 毕红园; 王玉庆; 孙毅; 杨武德; 《中国农业大学学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：为有效利用SSR-PCR技术对药用植物苦参进行遗传多样性分析,采用正交设计L16(45)对影响苦参SSRPCR体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP、引物)在4个水平上进行优化,PCR结果用DPS数据处理软件分析,筛选出各因素的最佳水平,建立适宜苦参SSR-PCR的反应体系和扩增程序,并选用内蒙古苦参对该体系进行稳定性验证。结果表明:在10μL的苦参SSR-PCR体系中,模板DNA的用量为20.0ng,Taq DNA聚合酶的用量为0.2~0.6U,Mg2+的浓度为2.5mmol/L,dNTPs浓度为0.1mmol/L,引物的浓度为0.6μmol/L。扩增程序为:94℃预变性3min;94℃变性1min,56℃退火45s,72℃1min,35个循环;72℃延伸10min。4℃保存。选用12份苦参DNA对该体系进行稳定性验证,该体系具有较高的扩增稳定性,可用于药用植物苦参SSR标记的研究。

关键词： 苦参 SSR 优化 正交设计

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不同糜子品种对低氮胁迫的生物学响应

张美俊; 乔治军; 杨武德; 冯美臣; 肖璐洁; 王冠; 段云; 《植物营养与肥料学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：采用溶液培养的方法,研究了低氮胁迫下不同糜子品种苗期生物学性状、氮素吸收利用效率差异及与根系形态生理指标之间的相关关系。结果表明,低氮胁迫下,糜子地上部生长受抑程度大于根部,植株氮累积量降低但氮利用效率明显提高。晋黍7号株高、叶面积、茎叶干重、根干重、总根数、总吸收面积和活性吸收面积下降幅度在所测试品种中均最小,其总氮累积量分别是晋黍1号、晋黍5号、晋黍8号的1.35、1.50、1.39倍,根系氮累积量/总氮量的百分率增加的幅度和地上部氮累积量/总氮量的百分率下降的幅度均最低,分别为9.75%和3.47%;植株氮利用效率比晋黍1号、晋黍5号、晋黍8号分别高20.92%、12.44%、14.83%。晋黍7号较其他品种更耐低氮胁迫。低氮胁迫下,糜子根系干重、总根长、总吸收面积与总氮累积量呈显著线性相关,表明低氮胁迫下,根系形态生理指标对氮素吸收效率起重要作用。

关键词： 糜子 低氮胁迫 生物学性状 氮效率

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根癌农杆菌介导的葡萄遗传转化体系的优化

董志刚; 马小河; 王国平; 赵旗峰; 李晓梅; 谭伟; 王敏; 唐晓萍; 《核农学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：以梅鹿辄葡萄离体叶片为转化材料,对根癌农杆菌介导的遗传转化过程中涉及的几个主要影响因素:抗菌素羧苄青霉素(Carb)的浓度、乙酰丁香酮(AS)的浓度、农杆菌菌液的浓度及卡那霉素筛选压进行优化。结果表明,抗菌素羧苄青霉素在浓度300mg·L-1下即可有效去除农杆菌,且对胚性愈伤组织的分化的影响不大;乙酰丁香酮(AS)的最适浓度为50μm·L-1;农杆菌菌液的浓度控制在OD6000.5~0.7时转化率最高;卡那霉素的筛选浓度控制在100mg·L-1。利用优化的农杆菌介导法进行转化,对再生苗进行PCR检测,结果显示,外源基因已导入了葡萄基因组中。本研究优化了农杆菌介导的葡萄遗传转化影响因素,并获得了转基因植株。

关键词： 葡萄 根癌农杆菌 遗传转化 npt-Ⅱ基因

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枣胚培养研究进展

任海燕; 杜学梅; 王玉国; 王永康; 薛晓芳; 赵爱玲; 隋串玲; 李登科; 赵武娟; 《果树学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：从枣胚败育原因、胚培养影响因素、胚培养成苗途径等方面对枣胚培养研究进行了综述。枣胚败育主要由授粉受精不良、胚和胚乳发育不良、激素水平异常等引起;影响胚培养的因素主要有胚龄、培养基和环境条件;胚培养成苗途径主要有维持胚性生长的直接成苗、脱分化成愈伤组织的器官发生、体细胞胚的发生等3种。今后还需深入研究枣胚败育的机理、完善枣幼胚离体培养条件与方法,加快推进枣育种技术创新进程。

关键词： 枣 胚败育 胚培养

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中华稻蝗几丁质酶基因10(OcCht10)的分子特性及功能

李大琪; 王燕; 张建琴; 李涛; 孙毅; 张建珍; 《中国农业科学 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：【目的】获得中华稻蝗(Oxya chinensis)几丁质酶基因1 0(OcCht10)的cDNA序列,预测其功能域,并做聚类分析明确该基因的系统发育关系。绘制OcCht10在5龄若虫不同组织部位和发育时间的表达图谱,研究其在中华稻蝗蜕皮过程中的生物学功能,为害虫防治提供高效安全的候选基因。【方法】从中华稻蝗转录组数据库搜索OcCht10cDNA片段,经过blast分析、比对、拼接后,翻译为氨基酸序列,预测其功能域,并与其他昆虫几丁质酶家族基因进行聚类分析,进一步确认该基因的系统发育关系并进行准确命名;选取中华稻蝗5龄第6天不同组织部位及5龄若虫不同天数表皮样本,总RNA提取后反转录为cDNA模板,采用Real-time quantitative PCR(qPCR)方法获得OcCht10在5龄稻蝗若虫不同组织部位和不同发育阶段的表达谱;设计OcCht10 dsRNA引物,用试剂盒体外合成dsOcCht10,采用注射法进行RNA干扰;取注射24 h稻蝗表皮样本,用qPCR方法检测OcCht10基因沉默效率;并仔细观察dsRNA注射后稻蝗表型,统计其死亡率。【结果】经对中华稻蝗转录组数据库的搜索,获得OcCht10cDNA片段长度为9 318 bp,开放阅读框为8 61 3 bp,编码2 870个氨基酸;其3'非编码区为705 bp,推测OcCht105'端有500多碱基尚未获得;预测其氨基酸序列具有多个结构域,包含有5个几丁质酶催化域和6个几丁质结合域;与其他昆虫几丁质酶基因聚类分析结果显示OcCht10属于昆虫几丁质酶家族基因Ⅱ组,该组基因与昆虫蜕皮相关;5龄若虫组织特异性分析表明该基因主要在表皮、前肠和后肠等外胚层发育而成的组织器官中表达,提示OcCht10可能参与表皮几丁质代谢;发育时间表达图谱表明该基因在5龄第6—7天,即蜕皮前的表皮中高表达,表明OcCht10可能负责蜕皮时表皮几丁质降解;5龄若虫第2天注射该基因的dsRNA,24 h后取表皮检测其干扰效率,结果显示该基因被沉默7 0%;与注射dsGFP的对照组相比,注射dsOcCht105龄若虫表现为龄期延长,旧表皮无法开裂,蜕皮受阻,昆虫无法正常活动导致死亡,死亡率达到1 00%。【结论】获得OcCht10的部分cDNA序列,该基因在昆虫蜕皮前表皮中高表达;OcCht10参与中华稻蝗的蜕皮发育,注射dsOcCht10可有效沉默靶基因,并导致试虫无法完成正常蜕皮而死亡。

关键词： 中华稻蝗 几丁质酶基因 实时定量PCR RNA干扰

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菜豆新品种品架1号

畅建武; 王燕; 郝晓鹏; 《中国蔬菜 》 2014 北大核心

摘要：品架1号菜豆适宜旱地种植,产量高,品质好,平均每667 m2产量2 212.84 kg,比对照泰国架豆王增产13.6%。菜豆作为蔬菜作物,过去多种植在有灌溉条件的地块,随着城乡人们对菜豆需求量的增大,其种植区域逐渐扩大到旱地和山区,成为山区农民农业增收和脱贫致富的重要经济作物。针对这一发展趋势,笔者在菜豆品种选育时,重点培育具有抗旱节水、优质、高产的菜豆新品种,以提高旱地菜豆的产量和品质。品架1号是山西省农业科学院农作物品种资

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高产多抗玉米杂交种晋单87的选育

王建军; 刘佼; 杨慧珍; 《安徽农业科学 》 2014 北大核心

摘要：晋单87号是山西省农业科学院隰县试验站以隰332为母本、隰50为父本选育而成的玉米杂交种。2013年通过山西省品种审定委员会审定。该品种具有高产、稳产、综合性状优、抗逆性强、生育期适中和适应性广等特点,适宜山西省春播中晚熟地区种植。

关键词： 玉米 新品种 晋单87 品种选育

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不同深松时期对旱地春玉米水分利用状况及产量的影响

阎晓光; 李洪; 王青水; 董红芬; 李爱军; 《干旱地区农业研究 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：于2010—2012年在晋东南旱平地设置了春季深松、夏季深松和秋季深松3种深松处理试验,以传统翻耕为对照,研究不同处理对春玉米耗水量、干物质积累与分配、产量和水分利用效率的影响。结果表明,秋季深松处理的总耗水量最高,春季深松处理次之,且两者与传统翻耕(对照)差异均显著,表明春季和秋季深松后春玉米的总耗水量增加。夏季深松总耗水量低于对照处理,这是因为夏季深松后,对玉米根系造成一定程度的伤害。在春玉米生育后期,秋季深松和春季深松能有效促进干物质积累,增加春玉米生物干重,提高作物产量。2011年秋季深松处理的产量和水分利用效率最高,且显著高于其它处理,分别比传统深翻(对照)提高13.61%和10.26%,春季深松处理次之,分别比对照提高10.32%和7.62%,夏季深松处理低于传统深翻(对照),且分别比对照降低3.95%和1.82%,表明秋季深松和春季深松有利于产量的提高和水分的高效利用。

关键词： 春玉米 深松时期 土壤水分 产量 水分利用效率

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山西果树科技创新体系建设的本因分析与发展探索

赵彦华; 杜学梅; 贺晋瑜; 李敏生; 陶玲; 藉艺文; 《北方园艺 》 2014 北大核心

摘要：在简要阐述果树科技创新含义基础上,对山西省果树科技创新体系建设的发展现状进行了本因分析。建议山西省果业应深化体制改革,增强科技资金投入,强化自主创新培育新型农民;加强果业基层科技人才队伍建设,健全果业科技推广体系;提高果业成果转化率;加强果业高新技术的国际交流与合作,以提高山西省整个农业科技创新体系的运行效率。

关键词： 山西果业 科技创新 体系 本因分析 发展探索

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不同耕作方式对石灰性褐土磷脂脂肪酸及酶活性的影响

裴雪霞; 党建友; 张定一; 王姣爱; 张晶; 《应用生态学报 》 2014 北大核心 CSCD

摘要：为探索不同耕作方式下土壤理化性状和微生物活性的变化,研究了秸秆还田下旋耕(RT)、深松(ST)、深翻(CT)和秸秆不还田旋耕(CK)4种耕作方式对石灰性褐土磷脂脂肪酸(PLFA)特性及水解酶活性的影响.结果表明:不同耕作处理的水解酶活性、养分含量及微生物群落多样性有较大差异;秸秆还田增加了PLFA的种类、总PLFA含量及细菌、放线菌PLFA含量,但降低了土壤真菌PLFA含量,说明真菌较细菌更能适应贫瘠的环境.深松和深翻处理的PLFA总量均高于旋耕和CK处理,两处理分别较CK处理高74.7%和53.3%,表明深松和深翻更有利于作物生长.深松和深翻还可改善土壤理化性状、提高土壤碱性磷酸酶、蛋白酶和脲酶活性,为作物高产稳产提供了有利的土壤条件.

关键词： 石灰性褐土 秸秆还田 隔年深松 深翻 连年旋耕 磷脂脂肪酸 土壤酶活性

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