科研产出
基于核系统酵母双杂交技术的红螯螯虾IAG互作蛋白筛选
《水生生物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探究胰岛素样促雄性腺激素(Insulin-like androgenic hormone,IAG)在甲壳动物性别分化过程作用的分子调控途径,挖掘与IAG蛋白存在互作关系的候选蛋白信息,研究使用红螯螯虾促雄性腺及输精管组织构建核体系酵母文库,利用酵母双杂交技术筛选与IAG互作的候选蛋白,并对关键候选蛋白的编码基因进行克隆与表达分析.获得初级文库容量为1.12*107,次级文库容量为1.28*107;成功筛选到25个阳性克隆,共注释到12个蛋白编码基因;克隆获得关键候选蛋白的编码基因muc5acl(Mucin-5AC-like)的CDS全长474bp;半定量与荧光定量表达结果表明,muc5acl在红螯螯虾的促雄性腺、精巢及输精管中特异表达,且在雄性个体促雄性腺中的表达水平显著高于间性,在输精管中的表达则相反,推测该基因可能参与雄性激素的分泌及精子运输过程,并与间性红螯螯虾的性腺发育有关.研究结果将为进一步解析IAG调控红螯螯虾间性性别形成的分子机制提供重要信息.
关键词： 胰岛素样促雄性腺激素(IAG) 间性性别 酵母双杂交 基因表达 红螯螯虾
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高温胁迫对小黄鱼肝脏组织结构和细胞凋亡的影响
《浙江农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探究高温胁迫对小黄鱼(Larimichthys polyactis)肝脏组织结构和细胞凋亡的影响,研究通过人工控温,按照2℃·h-1的升温速率将水温从自然水温15℃升高至31℃(实验组)并维持此温度至96 h,同时设置15℃的常温对照组.分别于处理组水温达到31℃后的0、6、12、24、48、72、96 h时,同时采集处理组和对照组肝脏组织,进行组织切片观察肝脏组织的组织学变化,采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测肝脏组织细胞凋亡情况.结果显示,31℃处理0h时肝脏组织显微结构和超微结构与对照组相类似,无显著变化.但是,随着高温处理时间的延长,肝脏组织损伤逐渐加重,96 h后肝脏呈现严重损伤,表现为水肿、细胞核消失甚至溶解和肝组织局部坏死,以及肝细胞原有结构破坏等现象.此外,随着高温胁迫的持续,肝脏细胞凋亡现象逐渐加重.结果表明,高温胁迫对小黄鱼的肝脏组织造成一定程度的损害,并诱导大量细胞凋亡.研究结果明确了高温胁迫对小黄鱼肝脏组织的影响作用,对于小黄鱼养殖管理避免肝脏疾病发生具有重要的指导意义.
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不同品种草莓花器与花粉特征变异及SSR遗传多样性研究
《核农学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：草莓花器特征和花粉形态在品种之间存在一定的差异，这些差异对草莓品种的分类具有指导意义。为研究南方地区主栽的10个草莓品种花器、花粉及其与品种分类的关系，对其花部特征、花粉形态进行比较，并对13个花粉和花器性状进行相关性和主成分分析，同时进行了品种间简单重复序列（SSR）标记遗传多样性分析。花器特征显示，甜查理的花瓣长、花瓣宽和花萼宽的特征值显著高于其他9个品种，其次是宁玉和妙香7号，红颊、红玉和越心的花瓣长、花瓣宽、花冠径则明显低于其他品种。红颊、白雪公主、妙香7号和宁玉在极轴长、花粉大小、花粉形状、萌发沟长等花粉特性上高于其他品种。主成分分析结果显示，4个主成分累积贡献率为85.96%，其中花瓣长、花瓣宽和花萼宽的大小特征在第1主成分中具有较大载荷值。SSR分析结果显示，10个草莓栽培品种间的相似系数范围为0.47～0.85，在相似系数0.65处10个草莓品种分为两大类，红颊、章姬、红玉、粉玉1号、越心、白雪公主6个品种聚为一类，甜查理、越秀、妙香7号、宁玉4个品种聚为一类。结合草莓花器特征、花粉特性及其主成分分析与SSR标记聚类结果和系谱情况，花粉形态特性在草莓品种之间的差异不明显，花器特征的花瓣长、花瓣宽、花萼宽适用于品种分类，对指导育种亲本选择有参考意义。
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稻-虾共作模式下水体和土壤细菌群落特征研究
《扬州大学学报(农业与生命科学版) 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探究稻-虾共作模式对稻田水体、土壤细菌群落结构和多样性的影响，采用16S rDNA基因高通量测序技术对夏季稻-虾共作和水稻单作模式下稻田水体、土壤细菌群落组成及多样性进行比较。结果表明：与水稻单作相比，稻-虾共作模式水体细菌群落丰富度和多样性均呈上升趋势，土壤细菌群落丰富度变化不明显，但多样性有所下降，尤其9月显著下降。在细菌群落组成方面，稻-虾共作模式增加水体放线菌门（Actinobacteria）和蓝细菌门（Cyanobacteria）相对丰度，降低变形菌门（Proteobacteria）、厚壁菌门（Firmicutes）、酸杆菌门（Acidobacteria）和芽孢杆菌目（Bacillus）相对丰度，增加致病菌不动杆菌属（Acinetobacter）的相对丰度；降低土壤放线菌门（Actinorny cetes）、酸杆菌门（Acidobacteria）和根瘤菌目（Rhizobiales）相对丰度，增加变形菌门、硝化螺旋菌门（Nitrospirae）和Steroidobacterales目的相对丰度。功能预测分析发现，稻-虾共作模式下细菌碳水化合物代谢通路相对丰度在水体中呈上升趋势，在土壤中呈下降趋势。综上，稻-虾共作模式可改变水体、土壤细菌群落与功能，提高水体细菌群落的丰富度和多样性，降低土壤细菌群落的多样性。
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昆虫抗白僵菌免疫应答及其在害虫防治中的应用潜力
《浙江农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：昆虫病原真菌白僵菌能成功侵染多种昆虫寄主并致其死亡，是农业生产中有效的生物杀虫剂。相应地，昆虫依赖多种策略抵御真菌感染，其中先天免疫防御是对抗真菌感染的重要手段。昆虫表皮是抵御真菌入侵的第一道屏障，表皮和外分泌腺可分泌多种抑菌化合物降低真菌毒力，当真菌孢子进入血淋巴后，细胞免疫和体液免疫共同作用产生系统性免疫应答，表达的多种防御效应因子在细胞包囊、细胞凋亡、黑化反应中发挥功能。然而昆虫强烈的免疫反应影响田间施用白僵菌的效果，导致该真菌制剂应用的局限性。文章详细阐述昆虫感染白僵菌后的免疫应答机制，参与抗真菌免疫的基因与作用手段。该研究为了解昆虫抗真菌免疫机制提供了详实的基础，为合理改造白僵菌、有效提高白僵菌毒力水平提供坚实基础，为农业虫害治理提供新的策略。
关键词： 虫生真菌 表皮免疫 免疫通路 抗真菌免疫应答 害虫防治
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铁皮石斛糖苷水解酶GH3基因家族鉴定及表达模式分析
《浙江农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：利用生物信息学方法对铁皮石斛GH3基因家族成员进行筛选、鉴定，对其基因结构、蛋白理化性质、亚细胞定位、系统进化、蛋白质二级结构及跨膜预测、基序及染色体定位进行分析，同时分析GH3基因家族在不同组织以及低磷与正常磷水平下的表达模式。在铁皮石斛全基因组中筛选得到13个GH3家族基因，其中一个基因存在可变剪切，表达为14个GH3蛋白。GH3基因家族蛋白可分为3个亚家族，各亚家族中不同基因相对保守；各成员均含有内含子与外显子，内含子相位在0～2,13个基因分布在8染色体上。GH3基因家族在铁皮石斛的8个组织中均有表达，其中白根和花蕾表达量高，茎和唇瓣低，推测GH3基因家族可能参与铁皮石斛根系生长以及开花现蕾。低磷与正常磷水平表达结果表明，低磷水平下叶中基因LOC110110392、LOC110100144表达上调，根中基因LOC110095762、LOC110107269表达上调。该研究对铁皮石斛糖苷水解酶GH3基因家族成员生物信息学、在不同组织以及正常磷与低磷条件下的表达水平进行研究分析，筛选响应低磷信号的糖苷水解酶基因，为后期研究糖苷水解酶参与低磷条件下铁皮石斛多糖代谢调节机制提供研究基础。
关键词： 铁皮石斛 糖苷水解酶GH3 生物信息学分析 基因表达模式
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兰属植物珍珠矮试管开花技术研究
《种子 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了保护和开发利用兰花新种珍珠矮，加快育种进程，本研究通过根状茎直接和再生植株间接的方式来诱导试管开花。结果表明，在含有1 mg/L 6-BA,30 g/L蔗糖以及2 g/L蛋白胨的调整MS培养基（165 mg/L NH4NO3、380 mg/L KNO3和850 mg/L KH2PO4）上直接诱导根状茎获得的正常试管花数量最高，平均为2.6个。含有3 mg/L 6-BA、1 mg/L NAA和100 mL/L椰汁的MS或1/2 MS培养基最适宜珍珠矮根状茎再生；在含有3 mg/L 6-BA和20 g/L蔗糖的MS培养基间接诱导再生植株获得试管花数量最高，平均为0.8个。
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Bt和Bar基因转化对水稻不同组织生态位微生物群落组成及潜在功能影响
《微生物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】转Bt基因和Bar基因植物的微生态效应是环境安全评价的重要因素，但关于Bt基因和Bar基因转化引起的水稻基因型改变对水稻不同组织生态位微生物群落组成和潜在功能的影响还无系统研究。【方法】以转Bt基因和Bar基因水稻T1C-1及其亲本对照Minghui63为研究对象，基于细菌16S rRNA基因和真菌ITS高通量测序技术，分析抽穗期T1C-1和Minghui63根际土壤微生物以及根、茎、叶内生菌的群落结构和潜在功能。【结果】细菌和真菌群落多样性在水稻不同组织生态位之间发生显著变化，地下部分组织生态位（根际土壤和根系）微生物多样性显著高于地上部分（叶和茎）。T1C-1显著影响叶片内生真菌的香农指数和辛普森指数，而对茎和根的内生菌以及根际土壤微生物多样性无显著影响。叶片内生真菌曲霉菌属（Aspergillus）和篮状菌属（Talaromyces）相对丰度在T1C-1显著增加，推测其参与碳素代谢、能量代谢和转录作用酶合成等过程。T1C-1和Minghui63微生物群落关联网络分析表明，T1C-1的平均聚类系数和平均度显著高于Minghui63，因而T1C-1提高了相关微生物群落网络复杂程度。通过重建未观测状态对群落进行系统发育研究（phylogenetic investigation of communities by reconstruction of unobserved states,PICRUSt2），对叶片内生真菌功能酶基因进行功能预测，相对于Minghui63,T1C-1显著改变了碳素代谢、脂类代谢和能量代谢等途径。【结论】相较于根际土壤，叶片内生真菌的群落组成和潜在功能对T1C-1更敏感。尽管如此，T1C-1并未导致叶片内生真菌的多样性指数降低。为了更准确地评估转基因植物的微生态效应，我们需要加强对不同组织生态位内生菌多样性的关注。
关键词： 内生菌 生态位 根际微生物 Bt基因 微生物群落网络
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香榧油对肥胖小鼠脂质代谢紊乱的作用机制研究
《食品与发酵工业 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：肥胖是一种普遍存在的疾病,与许多严重的并发症有关.为了探究香榧油对肥胖小鼠脂质代谢影响的潜在分子机制,以高脂饮食建立肥胖小鼠模型,评估香榧油的降脂、抗氧化和抗炎症功能.结果表明,与高脂饮食(high-fat diet,HFD)组小鼠相比,香榧油高剂量(Torreya seed oil high-dose,SCH)组小鼠总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇的水平均显著降低,高密度脂蛋白胆固醇的水平显著升高(P<0.05).香榧油能显著抑制体重增长,降低肝脏系数和肾周脂肪积累.此外,香榧油干预后能降低肥胖小鼠血清中肿瘤坏死因子-α和白介素6水平,提高超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化酶酶活力,改善氧化应激和炎症反应.实时荧光定量PCR(re-al-time quantitative PCR,RT-PCR)结果显示,与 HFD 组相比,香榧油低剂量(Torreya seed oil low-dose,SCL)组小鼠固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element-binding protein-1 c,SPEBP-1c)表达水平显著降低(P<0.05),而腺苷酸活化蛋白激酶 α(adenosine monophosphate(AMP)-activated protein kinase alpha,AMPKα)和脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FAS)的表达水平略有降低但不显著;SCH组小鼠AMPKa、SPEBP-1c和FAS表达均显著降低(P<0.05).香榧油改善肥胖小鼠脂质代谢紊乱的作用机制可能是通过调节AMPKα/SREBP-1c信号通路,提高抗氧化水平和降低炎症反应实现.
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长期施肥对水稻土典型氨氧化菌和全程氨氧化菌种群活性和丰度的影响
《中国农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】通过研究长期施用有机肥和无机肥对硝化菌种群活性和丰度的影响，揭示其种群丰度变化与硝化活性之间的关系，为农业生产中减少温室气体排放和实现可持续发展提供科学依据。【方法】使用特异性抑制剂乙炔、1-辛炔和3,4-二甲基吡唑磷酸盐（DMPP）等，结合实时荧光定量PCR技术（qPCR），分析水稻土长期不施肥（CK）、单施化肥（NPK）、单施有机肥（M），以及化肥与有机肥配合施用（MNPK）4个处理的全程氨氧化菌（Comammox）、氨氧化细菌（AOB）、氨氧化古菌（AOA）种群活性和丰度，以及硝化螺菌（Nitrospira）和硝化杆菌（Nitrobacter）种群丰度差异。【结果】长期施用有机肥显著提高了Comammox和AOA的活性（双因素方差分析，P<0.001），在单施有机肥处理中，Comammox活性贡献比例高达64.2%，而施用无机肥仅显著促进了AOB的活性（双因素方差分析，P<0.001）。qPCR分析结果表明，有机肥处理显著提高了AOA、Nitrospira、Comammox分枝A和分枝B种群的丰度（双因素方差分析，P<0.001），而无机肥处理则显著提高了AOB和Nitrobacter的种群丰度（双因素方差分析，P<0.001）。相关性分析表明，AOA和Comammox的活性与土壤含水量、有机质、全氮、全磷、速效磷、碱解氮含量以及AOA和Nitrospira种群丰度显著正相关，Comammox活性还与Comammox分枝A丰度显著正相关；而AOB活性则与AOB和Nitrobacter种群丰度、硝态氮和速效钾含量呈显著正相关。【结论】Comammox对供试水稻土的硝化作用有着重要贡献，其活性和种群丰度主要受土壤含水量、有机质、全氮、全磷、速效磷和碱解氮等因子变化的影响。
关键词： 全程氨氧化菌 硝化活性 种群丰度 有机肥 化肥 实时荧光定量PCR技术
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