科研产出
转基因甘蓝型油菜中bar基因的表达分析
《分子植物育种 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：通过转草铵膦乙酰转移酶(bialaphos resistance gene, bar)基因获得具有除草剂耐受性的甘蓝型油菜(Brassica napus)，是解决甘蓝型油菜生产上草害问题的重要途径；而转化油菜植株中目标基因的表达水平及其对除草剂的耐受性是转基因作物安全评价的重要内容。为探讨甘露碱合成酶(mannopine synthase, mas)基因启动子驱动的bar基因在转基因甘蓝型油菜中的表达水平及其与除草剂耐受性的关系，对40个不同的转基因甘蓝型油菜株系进行了草铵膦(Glufosinate ammonium)耐受性鉴定和bar基因表达水平研究。结果表明，40个甘蓝型油菜转基因株系对草铵膦耐受性差异很大，9个株系药害级别为0级，达最高抗性水平，药害级别1～5级的株系数分别为6、3、3、8、11个。在转录水平，bar基因在不同转基因株系的表达丰度是内参基因BnAct2的0.16～0.46倍，同一抗性水平的不同株系bar基因转录水平差异很大，不同抗性水平的株系间bar基因转录水平差异也没有达到极显著水平，说明bar基因在转录水平的表达对除草剂抗性影响不大。在蛋白表达水平，不同转基因株系苗期叶片bar蛋白含量在0.84～89.12 ng/g，各个药害级别之间蛋白表达差异大约在1 020 ng/g，且5级药害与对照之间的蛋白表达量没有明显差异。本研究结果说明，bar基因转录后水平的调控是决定转基因甘蓝型油菜除草剂耐受性的关键因素。
关键词： 甘蓝型油菜 mas启动子 bar 转基因 抗除草剂
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球磨对生物炭表面特征及稀土钇(Ⅲ)吸附能力的影响
《环境科学与技术 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：生物炭是一种高芳香性多孔吸附材料，为明确球磨改性对生物炭吸附稀土离子钇（Ⅲ）(Y3+)的影响，该研究以稻壳炭（RBC）、秸秆炭（SBC）、猪粪炭（ZBC）为原料，采用球磨和加磷球磨方式改性生物炭，通过扫描电镜、X射线衍射光谱、傅里叶红外光谱分析结合单因素吸附实验（初始浓度、生物炭添加量和溶液初始pH），研究球磨对生物炭表面特征、官能团和稀土Y3+吸附能力的影响；吸附动力学揭示原始/球磨生物炭对Y3+吸附特性。结果表明，原始生物炭吸附能力大小关系为ZBC>SBC>RBC,pH升高有利于SBC和RBC及其改性生物炭对Y3+的吸附，pH为7时吸附效果最佳。球磨显著提高球磨稻壳炭（BRBC）和球磨秸秆炭（BSBC）对Y3+的吸附效果，加磷球磨进一步提升球磨红磷改性秸秆炭（BPSBC）的吸附能力。吸附过程符合准二级吸附动力学模型，偏向于化学吸附。吸附动力学拟合分析表明，球磨红磷改性稻壳炭（BPRBC）最大吸附量为（18.727±0.020） mg/g，相较于RBC提高了252%,BPSBC最大吸附量为（22.586±0.147） mg/g，比SBC提高了101%，球磨/加磷球磨对ZBC的Y3+最大吸附量无显著影响。SBC、RBC和ZBC及其球磨/加磷球磨生物炭对Y3+的主要吸附机制是表面官能团络合和沉淀作用。球磨过程显著减小了生物炭粒径，提高了其比表面积和孔容，增加了吸附位点数量，显著提高了生物炭对Y3+的吸附能力。加磷球磨将磷元素负载到生物炭上，增加了生物炭表面官能团的种类数量，进一步提高了生物炭对Y3+吸附能力。球磨/加磷球磨是提高大粒径生物炭吸附能力的有效改性方法。
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不同氮肥水平下水稻倒二叶叶鞘的转录组分析
《中国水稻科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探明叶鞘对氮素响应的重要基因,为水稻氮素高效利用的遗传改良提供科学依据.[方法]将粳稻品种秀水 134 种植在低氮(LN)、中氮(MN)和高氮(HN)的渗漏池中,选取抽穗后第 10 天的倒二叶叶鞘进行转录组测序分析,以鉴定叶鞘对氮素响应的重要基因.[结果]转录组数据比较分析显示,三种氮素水平间存在1791 个差异表达基因.其中HN与MN、MN与LN、以及HN与LN组间的上调和下调表达基因数分别为 312个和 155 个,263 个和 160 个,1059 个和 542 个.三种施氮水平间的共有上调和下调差异表达基因分别为 15 个和 53 个,涉及营养元素吸收和转运、生物与非生物胁迫响应、植物激素响应以及光调控等生理生化过程.基于GO富集分析和KEGG代谢途经分析,最终鉴定出参与氮素利用及光合作用的已知功能基因分别为6个和4个,以及50个功能未知基因,推测这些基因在倒二叶叶鞘的氮素响应中发挥重要作用.[结论]研究结果初步明确了叶鞘对不同氮素水平响应的重要基因,这些基因在氮素利用的信号转导途径中发挥重要作用.
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南瓜果胶含量的全基因组关联分析与候选基因预测
《浙江农业学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为探究南瓜果胶含量的遗传调控机制，挖掘关键基因，为南瓜口感品质的遗传改良提供理论依据，该研究采用硫酸-咔唑比色法测定208份南瓜种质资源果肉的果胶含量，利用果胶含量数据与重测序获得的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)进行全基因组关联分析(genome-wide association study, GWAS),对显著关联区间进行候选基因筛选与功能注释。结果显示，南瓜果胶含量呈正态分布，在南瓜2、4、12、20号染色体上共获得了21个与南瓜果胶含量显著关联的SNP位点，其中有13个位于2号染色体8330664～8436445区间。筛选获得40个候选基因，其中3个基因(基因号为CmoCh02G014160、CmoCh02G014170、CmoCh02G014260)涉及糖代谢通路。这3个候选基因在南瓜种质资源中存在着大量的SNP和InDel变异，并且在南瓜果实中均有表达，可能参与南瓜果实中果胶的合成。该研究结果可以为优化南瓜果胶含量，改良南瓜品质提供新的标记与候选基因。
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浙江省猪源多杀性巴氏杆菌的血清型分型、毒力因子及耐药性分析
《中国兽医学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：采用形态学筛选和聚合酶链式反应(PCR)从2010-2024年浙江省猪场送检的鼻拭子和肺脏组织样品中分离鉴定出119个多杀性巴氏杆菌临床分离株。用PCR技术和纸片琼脂扩散法(K-B)对分离的多杀性巴氏杆菌进行荚膜血清型分型、脂多糖血清型分型、毒力因子检测及耐药性分析。结果显示，荚膜血清型中A型有64株(占53.7%)、D型有54株(占45.3%)、F型有1株(占0.9%);脂多糖血清型中L1型有10株(占8.4%)、L3型有20株(占16.8%)、L6型有86株(占72.2%)、未定型有3株(占2.6%)。对10种毒力基因的扩增结果显示，毒力基因hgbA、hgbB和fimA的检出率在86.0%以上，toxA的检出率为8.4%,而毒力基因tbpA并未检出；不同毒力基因在不同荚膜血清型的分布情况和检出率也存在差异，pfhA只在荚膜血清A和F型中检出，在D型中并未发现；黏附素tadD在A型的检出率(92.2%)明显高于D型的检出率(9.3%),相反，黏附素hsf-1在D型的检出率(90.7%)明显高于A型的检出率(20.3%)。耐药性分析发现，多杀性巴氏杆菌对阿莫西林、氨苄西林、头孢类、强力霉素、氟苯尼考和环丙沙星等抗菌药物表现出较高的敏感性；对林可霉素、复方新诺明、庆大霉素及阿米卡星等抗菌药物的耐药性较强，多重耐药菌株有54株(78.3%)。综上，荚膜血清型以A和D型为主，脂多糖血清型以L6型为主，部分毒力基因在不同血清型间的分布差异较大，多重耐药菌株比例较高，为本病的防控提供了参考。
关键词： 多杀性巴氏杆菌 分离鉴定 血清型分型 毒力因子 耐药性
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鸭瘟病毒疫苗株UL35缺失株的构建及其免疫保护效果评价
《畜牧兽医学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为研究鸭瘟病毒（duck enteritis virus, DEV）UL35基因缺失DEV疫苗株的生物学特性和对强毒株攻击的免疫保护效果，本研究在鸭瘟病毒疫苗株感染性克隆pDEV-EF1基础上，通过“Red E/T两步重组”技术，构建了UL35基因缺失的pDEV-ΔVP26突变体克隆，并转染鸡胚成纤维细胞（CEFs）获得了重组病毒rDEV-ΔVP26,进而对重组病毒细胞生物学特性和免疫保护能力进行了评估。病毒一步生长曲线测定表明，rDEV-ΔVP26的滴度从24～84 h稳步上升，达到峰值105.36 TCID50·0.1 mL-1。在此期间，rDEV-ΔVP26滴度较亲本毒株rDEV-EF1相比有所降低。蚀斑面积测定发现rDEV-ΔVP26蚀斑面积较亲本株rDEV-EF1减少了10.60%,说明UL35基因缺失会轻微影响病毒扩散并降低病毒滴度。动物试验表明，1×106 TCID50的rDEV-ΔVP26对30日龄麻鸭无致病作用，且1×105 TCID50滴度的rDEV-ΔVP26免疫组在强毒株攻击下的保护率与相同剂量的rDEV-EF1对照组一致。该研究表明，UL35为DEV复制非必需基因，且当接种合适剂量的病毒液时，UL35缺失不影响鸭瘟病毒疫苗株的免疫保护效果。该研究为研发用于区分疫苗免疫和野毒感染的DEV鉴别诊断疫苗奠定了基础。
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高粱弯孢叶斑病病原菌鉴定、生物学特性研究及防治药剂筛选
《浙江农业学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为鉴定引起高粱叶斑病的病原菌,从浙江省绍兴市平水镇采集发病的高粱叶片,进行病原菌分离、致病性测定和分子生物学测定,在不同碳源、氮源、温度、pH值和光照等条件下,测定高粱叶斑病病原菌的生物学特性,并采用菌丝生长速率法测定4种化学药剂对菌株的抑制作用和田间防治试验.结果显示,引起高粱叶斑病的病原菌为新月弯孢(Curvularia lunata),将分离菌株命名为GLYB3.菌株GLYB3可充分利用6种碳源,最适氮源为酵母粉,最适温度为25℃,最适pH值为7.30%己唑醇悬浮剂、43%氟菌·肟菌酯悬浮剂、450 g·L-1咪鲜胺水乳剂和50%啶酰菌胺水分散粒剂对GLYB3具有较强的抑制作用,EC50值分别为0.001 6、0.001 9、0.003 1、0.007 8 mg·L-1.田间防治试验表明,4种药剂的相对防治效果分别为79.0%、77.8%、79.5%和 81.5%.
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不同代数脱毒果蔗田间表现分析
《作物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为探究脱病毒种苗对果蔗的影响,本研究以广东黄皮果蔗为试验材料,进行了自留种、脱毒一代、脱毒二代果蔗种苗的田间性状和果汁品质的比较研究。结果表明, 3种材料中,脱毒二代果蔗的田间生长状态最佳,与自留种和脱毒一代相比,其地上株高分别提高9.08%、5.80%（其中可食部分高度分别提高13.64%、7.19%）,茎粗分别提高13.98%、9.71%,产量分别提高47.76%、63.72%(达到159.5 t hm–2),出汁率分别提高3.64%、9.17%,蔗汁的总糖含量分别下降10.14%、12.73%;脱毒对果蔗蔗汁的密度、锤度和纤维含量无显著影响;脱毒苗第一代果蔗与自留种的产量和蔗汁品质无显著差异,脱毒组培苗作为第一代种苗可用于繁育脱毒果蔗种茎, 3—4月份适宜移栽。因此,相对于一代组培苗,采用脱毒第二代种苗（脱毒第一代种苗种植收获的果蔗种茎）进行商品蔗种植效果更好,可促进果蔗田间生长,显著提高果蔗的产量。
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基于重组酶聚合酶扩增的转基因玉米和大豆现场快速检测方法
《遗传 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：随着我国转基因玉米和转基因大豆的商业化种植，为了保证我国生物育种产业的健康发展，迫切需要开发转基因玉米和大豆的现场快速检测技术。本研究针对转基因玉米和大豆现场快速检测技术的不足，提出了一种基于重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)的快速检测方法。选择具有代表性的转基因玉米(双抗12-5、DBN9936、MON810)和大豆(DBN9004、GTS40-3-2、SHZD32-1)为检测对象，根据其侧翼序列，筛选特异性引物和探针，建立了高特异性、灵敏度达20拷贝的RPA扩增体系。为了快速获取DNA，种子样品利用核酸释放剂获得可用于RPA扩增的模板，为了消除叶片中叶绿素并快速获取DNA，叶片样品利用本实验室研发的核酸快速一体化提取装置快速获取DNA，以消除叶绿素干扰。结合便携式金属浴启动RPA扩增，蓝光切胶仪用于可视化检测，构建了转基因玉米和大豆的现场快速检测方法。该方法检测时间约为20 min，与常规PCR检测结果一致，适用于现场快速检测，无需大型设备，具备较强的实用性和适应性。该方法为转基因作物现场检测提供了技术支持，并为其他核酸快速检测技术的应用提供参考。
关键词： 转基因作物 RPA反应 荧光可视化 现场检测 快速提取
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绿嘉黑猪的不同杂交组合生长性能、胴体品质、产肉性能和收益比较研究
《浙江农业学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为探究以绿嘉黑猪为母本的杂交利用模式，该试验开展了长白猪♂×绿嘉黑♀(长绿)、大白猪♂×绿嘉黑♀(大绿)、杜洛克猪♂×绿嘉黑♀(杜绿)的杂交组合，测定180日龄3个杂交组合后代的生长性能，并比较了杜长大和3个杂交组合后代的胴体品质、精细化分割部位的产肉性能及收益情况。结果表明，生长性能方面：长绿和大绿的体长显著高于杜绿(P<0.05);杜绿的体高显著高于大绿和长绿(P<0.05);长绿和大绿的活体背膘厚度显著低于杜绿(P<0.05)。胴体品质方面：长绿和大绿的体斜长显著高于杜绿(P<0.05);杜绿的胴体重量等级有35.71%评为二级，64.29%评为三级，表现最好。产肉性能及收益方面：杜绿与杜长大的大排占胴体比例均显著高于长绿(P<0.05);杜绿的大排、腹膘、后脚圈占胴体比例显著高于大绿和长绿(P<0.05);杜绿、大绿、长绿和杜长大半胴体精细化分割的销售收入分别为1 402.83元、1 385.21元、1 309.05元和1 108.65元；杜绿精细化分割销售收益最高。以绿嘉黑为母本与长白猪、大白猪、杜洛克猪进行杂交，杂交组合后代中长绿生长速度最快，杜绿胴体品质好且精细化分割收益高。
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