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GA3与6-BA对'江南锦'甜樱桃糖分积累和果实成熟的影响

园艺学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:为探讨赤霉素(GA3)与6–苄氨基嘌呤(6-BA)对甜樱桃果实品质形成的影响,以南方地区设施栽培甜樱桃新品种‘江南锦’及传统品种‘雷尼’为试验材料,从盛花期到盛花末期,相隔10d分两次喷施不同浓度与比例的GA3与6-BA,对植株坐果率及果实品质指标进行测定,并对果实内源激素、相关酶活性及基因表达进行分析。结果表明,单独使用GA3处理,对促进‘江南锦’果实成熟与糖分积累、提高果实品质的效果较好,施用两次90 mg·L-1 GA3,‘江南锦’果实采收期单果达到5.65 g,可溶性固形物含量达到20.37%,并使果实成熟过程中内源激素动态变化趋势较对照提前,显著提高了果实中可溶性糖含量与相关酶活性,以及调控糖、花青素合成相关基因的表达水平。整体上,‘江南锦’比‘雷尼’适宜更低浓度的GA3处理。综上,适宜浓度GA3对于提高‘江南锦’甜樱桃坐果率和果实糖分含量,促进果实成熟具有积极作用,以盛花期施用90 mg·L-1 GA3,间隔10 d再施一次处理最佳。

关键词: 甜樱桃 赤霉素 6–苄氨基嘌呤 糖分积累 果实成熟 着色

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铁皮石斛DoUGT83A1基因克隆及表达特性分析

中草药 2025 北大核心 CSCD

摘要:目的 对铁皮石斛Dendrobium officinale中糖基转移酶基因DoUGT83A1进行克隆,并对其进行生物信息学及表达模式分析。方法 从铁皮石斛“雁荡山1号”叶组织中获得DoUGT83A1基因,利用软件进行生物信息学分析,利用MEGA11构建系统发育树,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测基因表达模式。结果 通过PCR扩增得到1个DoUGT83A1基因(GI:1622023669),该基因的CDS序列为1 347 bp,编码448个氨基酸。DoUGT83A1蛋白相对分子质量为54 330,理论等电点为5.75,为亲水性不稳定蛋白,无信号肽和跨膜区域,含有41个磷酸化位点,具有UDPGT和PSPG 2个保守结构域。氨基酸序列分析表明DoUGT83A1蛋白与金钗石斛Dendrobium nobile的UGT83A1蛋白的同源性最高,相似度为96.36%。分子对接结果证明DoUGT83A1蛋白对山柰酚具有较好的催化活性。组织特异性表达分析结果显示,DoUGT83A1在“雁荡山1号”不同组织相对表达量为:叶>茎>花>根(白根、绿根尖)。顺式作用元件分析结果表明,DoUGT83A1基因启动子序列含有多个与非生物胁迫响应相关的元件,且在低温、缺磷和菌根共生诱导下显著上调表达,推测该基因可能参与调控铁皮石斛菌根共生及非生物胁迫响应过程。结论 成功克隆获得铁皮石斛DoUGT83A1基因,并进行生物信息学分析和基因表达模式分析。为进一步探究DoUGT83A1基因功能及其在菌根共生和非生物胁迫响应中的作用机制提供理论依据。

关键词: 铁皮石斛 DoUGT83A1基因 生物信息学分析 表达特性分析 qRT-PCR

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喷施氨基酸钙对红美人杂柑果皮龟裂与品质的影响

浙江农业学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:采用留树保鲜和不留树保鲜的方式,研究采前喷施氨基酸钙对红美人杂柑果蒂周边果皮龟裂、褐变,果实落果,果实品质,及贮藏期间果实病害发生的影响。结果发现,采前喷施氨基酸钙,在留树保鲜和不留树保鲜的过程中均可以显著(p<0.05)减少龟裂数。贮藏40 d时,对于留树保鲜与不留树保鲜的处理,采前喷施氨基酸钙均可显著降低果蒂周边果皮组织中苯丙氨酸解氨酶和多聚半乳糖醛酸酶的活性。不留树保鲜下,喷施氨基酸钙显著降低了果实贮藏75 d时褐色蒂腐病、青绿霉病、酸腐病、炭疽病的发病率。留树保鲜下,喷施氨基酸钙显著降低了后期果实的落果率。在留树保鲜和不留树保鲜的过程中,喷施氨基酸钙显著提高了贮藏10 d时果实中的可溶性固形物、总糖、可滴定酸含量。总的来看,喷施氨基酸钙有助于减少果皮龟裂,降低病害发生率,提高果实品质。

关键词: 氨基酸钙 杂柑 果皮龟裂 果实品质

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浙江柑橘碎叶病的发生、分布及其病原物的遗传多样性分析

果树学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:【目的】明确柑橘碎叶病在浙江省的发生、分布情况及其病原物种群的多样性和遗传分化,探索柑橘碎叶病毒(citrus tatter leaf virus,CTLV)的起源和演化。【方法】对浙江省11个地级市的柑橘产区开展调查和抽样检测,测定202个CTLV分离物外壳蛋白基因序列,并进行同源性分析和系统发育分析。【结果】柑橘碎叶病在浙江省柑橘产区发生普遍,11个地级市中10个有检出,951份样品中有311份为阳性,阳性率为32.70%。阳性率在不同地区间和不同寄主品种间存在明显差异,以绍兴市和宁波市较高,分别为57.14%和55.91%;杭州市和湖州市较低,为6.52%和0.00%。在检测的43个品种(品系)中,以佛手和枸头橙最高,达100.00%;以枳壳、柠檬、脆蜜金柑和金橘最低,为0.00%。CTLV各分离物之间的遗传多样性丰富,外壳蛋白基因的核苷酸序列和氨基酸序列相似率分别为87.70%~100.00%和91.60%~100.00%。基于外壳蛋白基因序列的系统发育分析发现,来自浙江8个地级市20个寄主品种的111个CTLV分离物明显地分为2个大的分支,其分支与地理来源和寄主品种不存在明显的相关性。【结论】柑橘碎叶病在浙江柑橘产区发生普遍,且广泛危害不同的柑橘品种(品系),其病原物种群存在丰富的遗传多样性,但其分化与地理隔离和寄主品种不存在明显的相关性。研究结果为进一步探究CTLV的起源、系统演化和致病性分化研究奠定了基础,同时也揭示了规范化品种引进和苗木调运程序是预防该病害发生的关键。

关键词: 柑橘碎叶病 发生 分布 检测 外壳蛋白基因 遗传多样性

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三叶青多糖对巴氏杆菌灭活疫苗佐剂作用的研究

中国预防兽医学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:为研究三叶青多糖(THP)作为佐剂对巴氏杆菌(Pm)灭活疫苗诱导小鼠免疫应答的影响,本研究将96只ICR雌性小鼠随机均分为4组:空白组(BC组)、Pm灭活疫苗组(Pm),含铝胶佐剂Pm疫苗组(Alum-Pm)、含THP佐剂的Pm疫苗组(THP-Pm),分别免疫相应疫苗两次,每次间隔两周.采用ELISA方法分别检测小鼠二免后7 d、14 d、21 d、28 d、35 d和42d时血清IgG抗体水平,以及二免后28d血清IgG1、IgG2a抗体亚类水平,以及Th1型(INF-γ)、Th2型(IL-4、IL-5)和Th17型(IL-17)细胞因子水平.结果显示,与Alum-Pm组相比,THP-Pm组小鼠血清中IgG抗体水平在二免后14d和28d显著升高(P<0.05),于28d达到峰值,且THP-Pm组小鼠血清中IgG1和IgG2a抗体亚类水平显著高于其它各组(P<0.05).与BC组相比,THP-Pm组小鼠血清IFN-γ和IL-17细胞因子分泌水平显著升高(P<0.05),IL-4和IL-5极显著升高(P<0.01、P<0.001);与Pm组相比,THP-Pm组小鼠血清IFN-γ和IL-5细胞因子的分泌水平显著升高(P<0.05),细胞因子IL-4的分泌水平极显著升高(P<0.01);与Alum-Pm组相比,仅IL-4的分泌水平显著升高(P<0.05).二免后28d取各组小鼠脾脏,制备脾淋巴细胞悬液,采用CCK-8法检测各组小鼠淋巴细胞增殖水平,采用荧光定量PCR(qPCR)检测淋巴细胞中T-bet和GATA-3基因的相对转录水平,采用流式细胞术检测淋巴细胞中CD4+与CD8+T淋巴细胞亚群的比值.CCK-8法检测结果显示,分别经灭活的Pm和LPS刺激后,THP-Pm组小鼠淋巴细胞的增殖水平极显著高于其余各组(P<0.01、P<0.001、P<0.0001),经ConA刺激后THP-Pm组小鼠淋巴细胞的增殖水平极显著高于BC组和Pm组(P<0.01).qPCR检测结果显示,经Pm刺激后,THP-Pm组小鼠淋巴细胞T-bet mRNA的相对转录水平极显著高于BC组(P<0.0001)和Pm组(P<0.001),显著高于Alum-Pm组(P<0.01);THP-Pm组小鼠淋巴细胞GATA-3 mRNA的相对转录水平极显著高于BC组(P<0.001),显著高于Pm组和Alum-Pm组(P<0.05).流式细胞术检测结果显示,与Pm组相比,THP-Pm组小鼠淋巴细胞CD4+/CD8+T淋巴细胞的比值显著升高(P<0.05).二免后49d通过攻毒试验检测免疫不同佐剂的Pm疫苗对小鼠的保护作用,结果显示,攻毒后10d内BC组、Pm组、Alum-Pm组、THP-Pm组小鼠的存活率分别为0、33.3%、66.7%、83.3%,其中THP-Pm组小鼠的存活率极显著高于BC组和Pm组(P<0.01).本研究首次证实THP佐剂可显著增强Pm灭活疫苗的免疫保护效果,为THP作为新型疫苗佐剂的开发与应用提供了重要参考依据.

关键词: 三叶青多糖 巴氏杆菌 灭活疫苗 佐剂 免疫保护

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十字花科蔬菜抗根肿病分子标记开发及其在育种上的应用

浙江农业学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:十字花科根肿病是由芸薹根肿菌引起的土传病害,严重威胁白菜、甘蓝、萝卜等经济作物的安全生产。利用分子标记辅助选择育种已经成为培育抗病品种的一种经济有效的方法。本文根据已公布的抗根肿病研究报道,总结已公布的抗根肿病基因、分子标记以及育种上的最新成果,讨论抗根肿病研究及育种上存在的困难,为未来抗根肿病育种工作提供理论参考。

关键词: 根肿病 抗病基因 分子标记 育种

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非生物胁迫对灵芝生长发育及其响应机制的影响

浙江农业学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:在灵芝生长发育过程中,会受到高温、干旱、光照、金属污染等非生物胁迫。非生物胁迫会影响灵芝生长速度,改变灵芝的表型,蛋白质、磷脂酸等调节渗透物质含量发生变化,调节抗氧化系统清除活性氧(ROS),刺激合成灵芝三萜、灵芝多糖等次生代谢物来缓解胁迫对灵芝造成的破坏;灵芝会通过ROS等信号分子,调节相应基因和生理反应来响应胁迫。本文从温度胁迫、水分胁迫、光质胁迫和金属胁迫4个方面进行梳理,分析非生物胁迫对灵芝形态特征、生理生化、代谢物和分子响应的影响,旨在为灵芝抗逆机制研究、选育抗性和高产活性成分品种,以及高效栽培提供理论参考。

关键词: 灵芝 非生物胁迫 生长发育 抗逆机制

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万古霉素耐药菌流行率及耐药机制研究进展

遗传 2025 北大核心 CSCD

摘要:万古霉素是一种糖肽类抗生素,是临床治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、肠球菌和艰难梭菌等细菌感染的最后一道防线,但目前全球多个国家和地区已发现了多种万古霉素耐药菌。基于“Onehealth”理念,本文统计了近15年国内外40个地区的人源、动物源、环境来源及食品来源的万古霉素耐药菌流行率。统计结果显示,万古霉素耐药菌主要集中于医院及周围环境。南非部分医院废水中的检出率高达96.77%;其次是巴基斯坦和中国台湾医院患者,检出率分别是56.5%和29.02%;国内人源细菌万古霉素平均耐药率(1.41%)要高于国外人源(0.47%);各地区儿童患者中耐药菌的检出率较低(<1%)。值得注意的是尽管万古霉素禁止在畜禽养殖中使用,但是其耐药菌在畜禽、畜禽产品以及相关环境中都有一定的检出率,对人类健康造成一定威胁。基于统计分析结果,本文对万古霉素耐药菌的耐药及传播机制进行了综述,明确了耐药菌在“人-动物-食品-环境”流行率差异,以期解析万古霉素耐药菌在全球不同宿主中的分布和传播风险,为耐药菌的防控提供参考。

关键词: 万古霉素耐药率 肠球菌 金黄色葡萄球菌 传播机制

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沙棘黄酮的提纯及生物活性研究进展

食品与发酵工业 2025 北大核心 CSCD

摘要:沙棘是一种药食同源的天然植物,我国拥有世界95%以上的沙棘分布面积。黄酮是沙棘中一类重要的生物活性物质,其具有良好的抗氧化、抗炎、抗癌、降血糖、降血脂、免疫调节等多种生理功能。沙棘黄酮主要是异鼠李素、槲皮素、山奈酚、杨梅素等苷元组成的黄酮醇亚类,通过不同的提取纯化方式获得的黄酮种类不同,绿色高效的提取纯化工艺对于沙棘的高附加值利用具有重要意义。因此,该文对沙棘黄酮提取纯化方法的研究现状进行总结,且对比分析这些方法的优缺点;总结了包埋技术在提高黄酮类化合物的生物利用度的应用;重点综述沙棘黄酮的生物活性及作用机制,并展望了沙棘黄酮的应用前景,以期为沙棘及沙棘黄酮的综合利用提供理论依据。

关键词: 沙棘 黄酮 提取 纯化 生物活性

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利用CRISPR/Cas9技术定向编辑水稻nsLTPs家族基因OsLTPL166

分子植物育种 2025 北大核心 CSCD

摘要:非特异性脂质转移蛋白(non-specific lipid transfer protein, nsLTPs)广泛存在于植物界中,参与许多关键的生物学过程,如花粉的发育、种子发育及细胞壁的延伸等。OsLTPL166基因编码区长度是465 bp,其编码的蛋白质由154个氨基酸组成;根据跨膜结构域及信号肽预测,OsLTPL166在13~35氨基酸处含有跨膜结构域,N端存在一个32个氨基酸残基的信号肽,切割位点位于氨基酸残基32和33之间,产生具有122个氨基酸残基的成熟蛋白质。组织表达分析发现,OsLTPL166仅在种子中特异性表达,且种子发育后期表达量较高。为了研究水稻Os LTPL166在种子发育中的功能,本研究以‘浙辐粳83’为遗传背景构建了敲除载体,利用CRISPR/Cas9技术对OsLTPL166进行定点编辑,共获得24个独立的转基因株系,其中纯合突变株系有7株,编辑方式主要为碱基的插入和缺失,导致氨基酸序列发生移码,成功获得OsLTPL166功能缺陷型突变体。本研究为进一步探究该基因在种子发育进程中的生物学功能提供了遗传材料。

关键词: 水稻 种子发育 非特异性脂质转移蛋白 CRISPR/Cas9

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