科研产出
1株血清2型副猪嗜血杆菌的分离鉴定及致病性研究
《中国畜牧兽医 》 2025 北大核心
摘要:【目的】明确浙江地区某猪场副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)感染情况,明确分离株的血清型、生物学特性及致病性,为临床控制副猪嗜血杆菌提供理论参考。【方法】从发病猪的肺脏、心脏血液、关节液等病料中分离、纯化菌株,并对其进行革兰染色镜检、16S rRNA基因PCR扩增及测序,明确分离株的血清型,检测分离株携带毒力基因情况、对常见抗菌药物的敏感性及对小鼠的致病性,使用饱和硫酸铵法提取菌株分泌蛋白,并通过电泳分析蛋白主要富集区域。【结果】分离株在TSA培养基上生长出圆形、光滑湿润、颜色灰白、边缘整齐的针尖大小的菌落;接种至TSB培养基后,1~3 h生长缓慢,3~4 h进入对数生长期,4~12 h进入生长稳定期;革兰染色镜检呈红色短杆状、长杆状,长度不等,疑似副猪嗜血杆菌。16S rRNA基因PCR扩增结果显示,出现680 bp的特异性条带,与预期相符。血清型鉴定结果显示,检测到2型血清型副猪嗜血杆菌特异性条带。BLAST比对显示该分离株为血清2型副猪嗜血杆菌。毒力基因检测结果显示,分离株携带cdtA、cdtB、cdtC、vtaA1、rfaD、rfaE、gnd、cpaD、espP2、vacJ、rfaF、vtaA2、htrA和ompP2基因。该菌株以1.0×10~9 CFU/mL剂量感染BALB/c小鼠,在5~10 h出现死亡,并引起小鼠肝脏细胞核浓缩、坏死,肺泡腔内有大量浆液性渗出物,混有红细胞和菌体,脾脏组织炎性细胞浸润。药敏试验结果显示,分离株对头孢哌酮、头孢呋辛钠、哌拉西林、青霉素等药物耐药,对氯霉素表现中介,对环丙沙星、左氧氟沙星、阿奇霉素等药物敏感。该菌株分泌蛋白大小主要集中在25~180 ku。【结论】本研究分离鉴定获得1株血清2型副猪嗜血杆菌,该分离株编码多种毒力基因,具有致病性,对多种常用抗菌药物有明显的耐药性,并分泌多种蛋白。试验结果提示该猪场可使用喹诺酮类、大环内酯类及氨基糖苷类药物进行防控。


猪XCR1/FMDV双特异纳米抗体融合蛋白的制备与鉴定
《中国农业大学学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:为通过将FMDV抗原靶向提呈至猪DC细胞进而提高疫苗免疫效力,本研究利用原核系统表达了猪XCR1目的蛋白,以该蛋白为免疫原免疫羊驼,提取其外周血淋巴细胞的总m RNA并反转录为c DNA,构建噬菌体展示纳米抗体文库,经过3轮亲和筛选获得猪XCR1特异性纳米抗体;利用SOE-PCR技术将该纳米抗体和猪O型FMDV特异性纳米抗体Nb205连接,构建XCR1/FMDV双特异纳米抗体融合蛋白。结果表明:1)成功原核表达猪XCR1目的蛋白,SDS-PAGE和Western blot结果显示,其相对分子量大小约35 ku,符合预期。2)羊驼血清效价为1∶64 000,满足建库要求;构建的噬菌体展示文库库容量约为1.91×108 CFU/m L,插入率为91.3%,多样性好;经3轮亲和筛选成功获得了纳米抗体Nb75,间接ELISA结果显示该纳米抗体能特异性与XCR1结合。3)利用SOE-PCR技术成功构建XCR1/FMDV双特异纳米抗体融合蛋白Nb75-205;SDS-PAGE和Western blot显示,该蛋白在大肠杆菌中可溶性表达,且呈现二聚体结构,间接ELISA结果显示Nb75-205能同时与XCR1目的蛋白和FMDV抗原结合。综上,本研究采用噬菌体展示技术成功获得猪XCR1特异性纳米抗体,并构建XCR1/FMDV双特异纳米抗体融合蛋白Nb75-205,且该蛋白为天然二聚体结构,与XCR1目的蛋白和FMDV抗原均具有较好的结合活性,为进一步开展FMDV抗原的猪XCR1靶向提呈研究奠定基础。


马齿苋水提物不同饲喂方式对蛋鸡生产性能血清生化指标及生殖激素的影响
《农业与技术 》 2025
摘要:本试验旨在研究马齿苋水提物不同添加方式对海兰褐蛋鸡产蛋性能、血液生化指标等的影响。选取216只大小均一且健康的300日龄海兰褐鸡,随机分为4组(A、B、C、D),每组6个重复,每个重复9只鸡,每重复每日喂食990g饲料。A组为对照组,饲喂基础日粮与正常饮水;B组为日粮添加组,在基础日粮中添加200mg·kg-1马齿苋水提物,正常饮水;C组为混合添加组,在基础日粮中添加100mg·kg-1马齿苋水提物,同时每日每重复在饮水中添加马齿苋水提物0.099g; D组为饮水添加组,在饮水中每日每重复添加马齿苋水提物0.198g,饲喂基础日粮。保障B组、C组、D组每日每只鸡摄入22mg马齿苋水提物。整个试验周期为49d,其中预试验7d,正式试验42d。结果表明:马齿苋水提物不同饲喂方式对蛋鸡生产性能无显著影响(P>0.05),但B组蛋壳强度显著高于A组(P<0.05);B组血清中谷丙转氨酶显著(P<0.05)低于A组,D组血清中低密度脂蛋白显著(P<0.05)低于A组;C组、D组血清中MDA含量显著低于A组(P<0.05);试验组血清中E2含量显著(P<0.05)高于A组的同时,FSH含量显著(P<0.05)低于A组。马齿苋水提物饮水添加方式能够降低鸡血清LDL及MDA含量,较为有效改善机体代谢;若考虑蛋品质量也可考虑在日粮中直接添加马齿苋水提物。


低温鸡肉肠中蜡样芽孢杆菌分离鉴定及其毒力基因与药敏性分析
《肉类研究 》 2025
摘要:依据GB 4789.14—2014《食品安全国家标准食品微生物学检验蜡样芽孢杆菌检验》对低温鸡肉肠及其加工环境样品中的蜡样芽孢杆菌进行计数。采用聚合酶链式反应法结合生化试验对8株分离菌株进行鉴定,并对其毒力基因进行检测。采用纸片扩散法对分离菌株进行药敏试验。结果表明:抽检的5种低温鸡肉肠腐败样品中蜡样芽孢杆菌检出率达100%,结合生化试验、16S rDNA测序及管家基因gyrB和苏云金芽孢杆菌特异性基因cry的检测结果表明,8株分离菌株均为蜡样芽孢杆菌,且均至少携带5种以上毒力基因,非溶血性肠毒素基因检出率最高,有5株蜡样芽孢杆菌同时携带nheA、nheB和nheC基因;呕吐毒素基因ces未检出。菌株A3携带除ces外的所有毒力基因,是携带毒力基因最多的菌株。在22种抗生素中,8株蜡样芽孢杆菌对头孢他啶、头孢唑啉、氨苄西林、链霉素、青霉素、卡那霉素、复方新诺明和头孢呋辛钠8种抗生素均有耐药性。综上所述,低温鸡肉肠中蜡样芽孢杆菌污染程度较高,毒力基因携带种类多且耐药性较强,具有引起食源性疾病风险,对食品安全具有威胁。


堆肥腐植酸吸附铵态氮和氨气的性能与机理
《农业环境科学学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:为探讨堆肥腐植酸对NH4+与NH3的吸附效果及机理,提取并纯化农业废弃物堆肥胡敏酸(C-HA)和富里酸(C-FA),并与商品胡敏酸(B-HA)、富里酸(B-FA)吸附NH4+与NH3效果相比较,借助元素分析仪、扫描电镜、比表面积分析(BET)、傅里叶红外光谱(FTIR)等对腐植酸理化性质进行表征,进行了动力学吸附试验和等温吸附试验。结果表明:商品腐植酸和堆肥腐植酸的比表面积和总孔容均较小,孔隙结构不发达。C-HA的总酸性基团和酚羟基含量分别比B-HA高出27.1%、14.1%。吸附NH4+或NH3以后,羟基对应的峰强明显变小。C-HA、B-HA对NH4+的最大吸附量分别为5.347、5.099 mg·g-1,吸附过程符合准二级动力学方程和Langmuir等温吸附模型,表明此吸附过程为单分子层吸附并受化学吸附控制。C-HA、B-HA、C-FA、B-FA对NH3的吸附容量分别为38.98、23.17、57.07、66.96 mg·g-1。C-HA对NH4+、NH3的吸附容量高于B-HA,这主要与其较高的酚羟基、羧基等含氧酸性官能团的含量有关。研究表明,堆肥腐植酸具有作为NH4+和NH3的吸附材料的潜力。


水生植物对浮游菌群和中华绒螯蟹肠道菌群结构与功能的影响
《淡水渔业 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:为理清蟹塘水生植物对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)生态养殖的微生态学贡献,实验设置伊乐藻(EN)、浮床蕹菜(IA)和浮床水稻(OS)三种水生植物处理,并对螃蟹产量、水体质量、浮游菌群和肠道菌群进行分析。结果显示:水生植物对螃蟹产量和水质均有显著影响,其中IA处理螃蟹产量较高且水质显著提升。水生植物同时显著改变了浮游菌群与肠道菌群相对丰度,浮游菌群中α-变形菌门、γ-变形菌门和放线菌门是主要类群(>10%);肠道菌群中软壁菌门和厚壁菌门为主要类群(>10%)。值得注意的是,IA处理肠道菌群具有更高的潜在有益菌和更低的潜在致病菌。同时,水生植物也显著改变浮游菌群和肠道菌群生物多样性,其中IA处理α多样性指数高于其余处理,群落更稳定。降维分析表明水生植物处理后浮游菌群分组差异明显,且水体pH和硝态氮是主要环境驱动因子。PICRUSt2功能预测揭示水生植物对浮游菌群的影响主要涉及微生物碳氮和能量代谢,而对肠道菌群的影响主要涉及蛋白质输出与同源重组。结果表明,蟹塘水生植物对浮游和肠道菌群的结构和功能均产生了显著影响,有必要进一步优化蟹塘水生植物,以提升中华绒螯蟹生态养殖水平。
关键词: 中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis) 水生植物 肠菌菌群 浮游菌群 水体质量


改进粒子群的多无人机协同搜索路径优化
《兵器装备工程学报 》 2025
摘要:粒子群算法具有收敛速度快、结构简单、计算复杂度低等优点广泛应用于搜索领域,然而多无人机采用传统粒子群算法协同搜索时,由于算法具有随机性且群体内共享信息并未进行筛选,会出现搜索路径大量重复的现象,造成额外的资源消耗。针对此问题,提出一种改进粒子群的多无人机协同搜索算法。将传统粒子群算法应用于多无人机协同搜索,在此基础上利用蚁群算法对粒子群进行改进,通过蚁群算法对群体内共享的位置信息进行筛选,计算出信息素指引位置,然后将信息素指引位置用于无人机搜索过程中粒子群算法的迭代,从而减少无人机往复搜索的问题。仿真实验表明:该搜索算法可以有效降低搜索的重复路径,减少搜索的总路程。
关键词: 多无人机 粒子群算法 蚁群算法 协同搜索 路径优化


不同秸秆还田量和生石灰量对羊肚菌品质的影响
《食用菌学报 》 2025 北大核心
摘要:采用双因素随机区组设计,研究每667 m2秸秆还田量[0 (A0)、200 (A1)、400 (A2)、800 kg(A3)]和生石灰量[0 (B0)、25 (B1)、50 (B2)、75 kg(B3)]对六妹羊肚菌(Morchella sextelata)感官品质(色泽、质地)与营养品质(游离氨基酸、总酚、粗多糖和营养元素)的影响,使用电子鼻和电子舌检测不同处理羊肚菌风味和滋味的差异,探明秸秆还田量、生石灰量及其互作对羊肚菌营养品质的效应。结果表明:在实验范围内,与对照(A0B0)相比,A3B1的菌盖和菌柄的脆度、鲜味、咸味较高(P<0.05),苦味较低(P<0.05);A3B2的氨基酸总量、必需氨基酸、非必需氨基酸、鲜味氨基酸、苦味氨基酸和甜味氨基酸含量分别比A0B0高51.2%、51.2%、50.7%、60.9%、40%和45.4%,A0B1的总酚含量较高(P<0.05),A1B1的四种营养元素K、Ca、Fe、Se含量较高(P<0.05);主成分分析结果显示不同秸秆还田量和生石灰量处理的羊肚菌风味和滋味可被有效区分。秸秆还田量和生石灰量均可调控羊肚菌的营养品质,以秸秆还田量和生石灰量互作效应最大,秸秆还田量次之。研究结果为稻菌轮作模式下羊肚菌栽培提供参考。

