科研产出
不同预处理方法对真空冷冻干燥香菇脆片感官品质的影响
《食品科学 》 2017 EI 北大核心 CSCD
摘要：利用漂烫超声浸渍、漂烫真空浸渍、漂烫调味液煮、熏蒸超声浸渍、纤维素酶解5种不同预处理方法处理香菇,再用真空冷冻干燥工艺将其制成即食脆片,对香菇脆片感官品质特性(包括水分含量、色泽、质构)以及微观结构等进行比较。结果表明:与其他4种预处理方法相比,经过纤维素酶解处理后的香菇制备成冻干脆片水分含量为3.59%、?E为107.35±2.16、硬度为718.20 g、脆度为0.92 mm、感官评分为8.1±0.2,其感官品质最佳,纤维素酶处理有助于香菇脆片形成疏松多孔结构。
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体外诱导禽巴氏杆菌环丙沙星耐药株及耐药机制的初步分析
《黑龙江畜牧兽医 》 2017 北大核心
摘要：为了探讨在环丙沙星(ciprofloxacin,CIP)药物培养后,多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm)对CIP的药物敏感性变化及其耐药机制,试验采用体外递增药物浓度的方法诱导出禽源Pm标准株C48-1对CIP的耐药菌株,并对CIP耐药菌株的最小抑菌浓度(MIC)值变化及耐药稳定性、生化特性、生长曲线和基因组位点突变进行了研究。结果表明:诱导的CIP耐药菌株的MIC由0.25μg/mL上升至16μg/mL;与亲本株比较,生化特性与生长曲线无显著差异,但诱导株的喹诺酮类耐药决定区(QRDR)gyrA基因编码的氨基酸发生了Thr99→Ala的变化,该位点突变首次发现,gyrB、parC、parE耐药基因均未发生变化。说明逐步递增药物浓度可以诱导禽源Pm对氟喹诺酮类药物的耐药性,并导致靶基因发生突变。
关键词： 禽源多杀性巴氏杆菌 体外诱导 环丙沙星 耐药决定区 位点突变 耐药机制
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紫薯花青素微胶囊工艺的研究
《食品工业 》 2017 北大核心
摘要：以紫色甘薯为原料,通过紫薯花青素的提取、纯化、制粉等技术制备高纯度花青素粉末,利用微胶囊化技术制备紫薯花青素微胶囊。通过单因素试验和正交优化试验对影响紫薯花青素微胶囊包埋率及产率的因素如壁材的选择、壁材比、喷雾干燥进风口温度和喷雾干燥进料速度等进行优化,研究表明,紫薯花青素微胶囊化产品的最佳工艺条件:以β-环糊精+阿拉伯胶为壁材,壁材β-环糊精与阿拉伯胶比例为5︰3,喷雾干燥进风口温度为190℃,喷雾干燥进料速度为40 mL/min,此条件下紫薯花青素微胶囊的包埋率为91.84%。
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湖北引种高氨基酸茶树品种的绿茶适制性分析
《浙江农业学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：为了解湖北茶区引种的3个高氨基酸茶树品种黄金茶1号、安吉白茶和中黄1号的绿茶适制性,以湖北茶区主栽品种鄂茶1号为对照,分析了这3个引进品种所制绿茶的主要滋味成分、香气组分和感官品质。结果表明:3个引进品种的水浸出物、茶多酚、儿茶素和酚氨比均显著低于鄂茶1号,氨基酸总量及18种氨基酸组分(除亮氨酸、苯丙氨酸外)均高于鄂茶1号;黄金茶1号、安吉白茶和中黄1号依次检测出香气成分37、35和36种,各香气类别、组分及所占比例与鄂茶1号有明显差异;感官审评结果显示,3个引进品种所制绿茶中,安吉白茶品质最优,黄金茶1号次之,而中黄1号与鄂茶1号品质相近。3个品种引种到湖北后,所制绿茶具有苦涩味低、嫩香浓郁、滋味鲜醇淡爽等优良品质特征。
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一种用于提高基因打靶效率的双荧光筛选策略
《中国生物工程杂志 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：同源重组介导的基因打靶技术因其准确性高、引入的突变可以预测,已经成为功能基因组研究的重要工具。但是在真核生物体内,天然同源重组的概率极低,对后续的筛选和鉴别造成很大困扰。因此,建立一个广谱性的高效筛选策略极为重要。研究基于"双荧光"的可视化筛选,通过提高筛选效率,从而建立了一种显著提高同源重组打靶效率的新策略。该策略以绿色荧光蛋白基因和新霉素基因为正筛选标记,以红色荧光蛋白基因为负筛选标记。经过G418筛选后,挑取仅表达绿色荧光蛋白的抗性克隆,用于跨界PCR检测。研究尝试运用上述新策略,借助CRISPR/Cas9技术,对猪肌抑素基因进行同源重组介导的基因打靶。在选取的T1和T2两个靶位点处,"双荧光"策略筛选的细胞阳性率分别达到80.5%和86.7%,筛选效率得到显著提高。研究建立的"双荧光"可视化筛选策略具有高效性和广谱性,在动物基因编辑领域具有广阔的应用前景。
关键词： 基因打靶 CRISPR/Cas9 同源重组 肌抑素
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单细胞PCR体系的建立及其在CRISPR/Cas9靶点活性检测中的应用
《中国生物工程杂志 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：单细胞PCR是以单个细胞所含的DNA或RNA为模板进行扩增,因此其模板的制备是影响整个反应成功与否的关键因素。利用三种不同蛋白酶K细胞裂解液(SDS细胞裂解液、NP-40细胞裂解液、Tween-20细胞裂解液)分别对体外培养成熟的单个猪卵母细胞进行裂解,并直接作为模板进行PCR扩增,结果表明:NP-40细胞裂解液制备的模板质量最好,其扩增效率为95%;其次为Tween-20细胞裂解液,其扩增效率为65%;SDS细胞裂解液产物中未检测到阳性条带。结合显微注射技术对sgRNA靶点活性进行检测,结果表明利用单细胞PCR结合显微注射的方法,在受精卵内对CRISPR/Cas9靶点活性进行检测确实可行,检测结果真实可靠。
关键词： 基因修饰动物 单细胞PCR 细胞裂解液 靶点活性检测
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基于EST-SSR标记的湖北茶树种质资源遗传多样性分析
《分子植物育种 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：利用EST-SSR标记对76份湖北茶树种质资源遗传多样性和指纹图谱进行了研究。60对引物76份资源共检测到等位基因207个,平均每对引物产生3.45个;共检测到472个基因型,平均每对引物所扩增的基因型有7.87个,遗传多态性信息含量为0.02~0.84,平均0.44,表明SSR标记具有较高的多态性,以及湖北省茶树种质资源多态性属于中度偏高。
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鸡骨泥酶解和发酵产物的成分分析及抗氧化活性比较
《中国调味品 》 2017 北大核心
摘要：将鸡骨泥采用蛋白酶酶解和混菌发酵处理,对原料、酶解产物和发酵产物中的活性成分进行分析并对其抗氧化活性进行研究,结果表明:酶解和发酵处理可使鸡骨泥的活性成分含量显著提高,尤其是经酶解-发酵联用技术处理样品后多肽、氨基酸态氮、总酸和呈味核苷酸二钠的含量较酶解产物进一步提高17.61%,38.93%,164.74%和32.95%。抗氧化实验结果表明:相同试样浓度下样品对DPPH和羟基自由基的清除能力大小顺序为发酵产物>酶解产物>原料,表明酶解-发酵技术不仅可以提高原料的利用率和风味,还可增强其营养保健功能。
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牛ACOX1基因过表达载体构建及对脂肪沉积的初步研究
《中国畜牧杂志 》 2017 北大核心
摘要：实验旨在阐明牛酰基辅酶A氧化酶1(Acyl-Co A Oxidase 1,ACOX1)在肌内脂肪沉积过程中的作用,为优质肉牛品种培育提供理论依据。首先扩增牛ACOX1基因的CDS序列,构建ACOX1基因的过表达载体,然后将过表达载体转染3T3-L1细胞,利用油红O染色技术检测脂滴沉积情况,利用荧光定量PCR、Western blotting技术检测成脂分化基因PPARγ及C/EBPα的表达量。BLAST分析及酶切鉴定结果显示,成功构建了牛ACOX1基因的过表达载体;油红O结果表明,过表达ACOX1基因抑制了3T3-L1细胞的脂滴沉积;荧光定量PCR及Western blotting结果表明,过表达ACOX1基因显著性抑制了C/EBPα的表达量而对PPARγ的表达量无显著性影响。本研究结果显示,ACOX1可能抑制肌内脂肪沉积。
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糙皮侧耳凝集素基因Plectin的克隆和表达分析
《园艺学报 》 2017 北大核心 CSCD
摘要：基于cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆了两个糙皮侧耳凝集素基因Plectin1和Plectin2。结构分析显示Plectin1和Plectin2基因全长分别为1 371和1 359 bp,二者均含有5个外显子和4个内含子;Plectin1开放阅读框长1 134 bp,编码377个氨基酸,Plectin2开放阅读框长1 122 bp,编码373个氨基酸。Southern杂交试验证实Plectin1和Plectin2在糙皮侧耳基因组中均只有1个拷贝。利用qRT-PCR分析了Plectin1和Plectin2在糙皮侧耳不同生长阶段的表达量,结果显示Plectin1和Plectin2分别在成熟子实体阶段和幼嫩子实体阶段表达量最高,这表明Plectin1和Plectin2基因可能在糙皮侧耳子实体生长发育中起到一定的调控作用。
关键词： 糙皮侧耳 凝集素 Southern杂交 荧光定量PCR
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