科研产出
(木奈)褐变果实均一化全长cDNA文库的构建及部分ESTs序列分析
《热带作物学报 》 2013 CSCD
摘要:以发生褐变初期的(木奈)果肉总RNA为材料,对SMARTTMcDNA合成方法进行改良,并将长距离PCR、DSN处理和定向克隆相结合,成功构建(木奈)褐变果实均一化全长cDNA文库。经检测,该文库的初始滴度为2.0×106pfu/mL,重组率为99%,插入片段大小平均为1.8 kb,文库质量良好。随机挑取720个阳性克隆进行5′EST测序,共获得684条有效的ESTs序列;并将684条有效序列拼接后,58条被组装成21个重叠群(contigs),单拷贝(singlets)基因有626条,共得到647个单基因簇(unigenes),文库冗余率为8.4%。用Blast 2 go在线软件对测序结果进行功能注释和归类分析,结果显示,已知功能基因与能量代谢、蛋白质合成与降解、次生代谢物质、细胞壁代谢和转录因子有关。该文库的构建有利于从分子水平上研究(木奈)果实褐变发生的机制。
关键词: (木奈) 褐变 均一化全长cDNA文库 表达序列标签
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红萍LPC提取方法的研究
《中国食品学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:以卡州萍3001(A.caroliniana Wild.3001)为代表,通过比较直接加热法、酸提法、碱提法、酸化加热法、碱化加热法5种方法,确定酸化加热法为红萍LPC提取的最佳方法。酸化加热法提取红萍LPC的最佳工艺条件是:料液比1∶3,打浆时间4 min,加热温度65℃,加热时间7 min,pH 3.0。影响红萍LPC提取率的主次因素为加热温度>pH值>料液比>打浆时间>加热时间。采用上述工艺条件得到的红萍LPC的提取率为33.28%,得率1.34%。
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苹果酸乳酸转化高活力菌株的选育
《中国食品学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:选育苹果酸乳酸转化活力高的乳酸菌,为果酒的苹果酸乳酸发酵生物降酸提供新菌源。采用适宜的紫外亚硝基胍复合诱变条件处理植物乳杆菌R23,以降酸量及苹果酸乳酸转化活力为指标,对诱变获得的菌株进行筛选。紫外亚硝基胍复合诱变的适宜条件是:菌液浓度107cfu/mL,亚硝基胍质量浓度1.8 mg/mL,诱变时间60min。紫外线照射用功率15 W的紫外灯,距离20 cm,照射时间20 s。最终选育出1株降酸能力和苹果酸乳酸转化活力分别比出发菌提高77.5%与15.4%,遗传性能稳定的优良菌株RF17。
关键词: 乳酸菌 复合诱变 降酸能力 苹果酸乳酸转化活力 选育
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CMS-FA胞质杂交稻不育细胞质和核质互作的遗传效应分析
《福建农林大学学报(自然科学版) 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:利用4个CMS-FA胞质不育系、相应保持系和3个恢复系,研究不育细胞对11个产量相关性状的细胞质效应和核质互作效应.结果表明:CMS-FA胞质杂交稻不育细胞质对千粒重和生育期性状表现出显著正效应,对穗颈长性状表现出显著负效应,其他性状的不育细胞质效应不显著;单株穗数、千粒重、每穗总粒数、结实率、株高,穗长、穗颈长和生育期等性状的核质互作效应均达到了显著或极显著水平;不育胞质与核基因的互作使杂种F1的平均基因型预测值、群体平均优势和群体超亲优势在株高和穗颈长上得到明显增加;CMS-FA胞质杂交稻不育细胞质无不良细胞质效应,不育系可恢复性好,可作为杂交稻育种的优良不育胞质加以利用.
关键词: 杂交稻 CMS-FA 细胞质效应 核质互作 产量相关性状
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福建省农村实用技术远程培训的媒介分析——基于农户的视角
《中国农学通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:农村实用技术远程培训是利用网络技术开展的农业科技信息传播,以农户技术观念和行为的改变为关键目标,因此有必要从传播媒介及农户的视角对其进行探索。首先,归纳了农村实用技术远程培训的媒介传播现状,包括作为农业科技信息传播工具的媒介和作为农业科技信息传播重要影响力量的媒介。其次,从农户认知、情感、意动的三大行为基础出发,分析了农村实用技术远程培训的媒介传播困境。最后,提出了促进有效认知、增进情感认同、构建真实意动的媒介传播建议。
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一次性消解连续测定食品中砷、硒和汞的研究
《中国农学通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:为了提高同时测定食品中砷、硒和汞3种元素含量的速度,采用一次性消解样品后用HG-AFS法连续完成测定食品中3种元素含量的新方法。在选定的最佳试验条件下测得Se、As、Hg的RSD分别为:3.7%,2.8%,和4.7%;回收率分别为:95.0%、102.0%和91.9%;采用该法和国标法对同一样品进行比较测定,结果经t值检验P>0.05,差别无显著性。该法具有快速、简单、准确性好,和国标法分别消解样品相比,有一次性消解样品,可连续完成测定3种元素含量,操作简单,快速,节省试剂,工作效率高等优点,值得推广应用。
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感染新型鸭呼肠孤病毒的番鸭肝脏蛋白质组双向电泳方法的建立
《中国农学通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:为建立感染新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)的番鸭肝脏蛋白质组双向电泳(2-DE)方法。本研究通过对人工感染NDRV的雏番鸭肝脏病变的观察,对肝脏蛋白质提取裂解液的配方、样品上样量、一向等电聚焦(IEF)参数等条件的对比和优化,建立了有效的番鸭肝脏2-DE方法。结果表明:采用攻毒后病变最典型的第5天的番鸭肝脏作为研究样品;采用研磨-超声-裂解液(7 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、4%CHAPS、65 mmol/L DTT、40 mmol/L Tris-base、0.5%IPG buffer)法提取肝脏蛋白质,结合2D clean-up kit以及去拖尾DeStreak试剂纯化蛋白,按1100μg上样,设置IEF参数为:50 V 12 h、200 V 1.5 h、500 V 1 h、1000 V 1 h、8000 V 3 h、8000 V 60000 V h、500 V维持,采用胶体考马斯亮蓝染色,能获得分辨率高、重复性好的2-DE图谱。应用建立的2-DE方法和PDQest 8.0分析软件,发现26个与正常番鸭肝脏蛋白表达水平超过3倍的差异蛋白点。该方法的建立为进一步寻找NDRV感染宿主组织相关蛋白以及水禽呼肠孤病毒差异蛋白质组学研究提供了技术支持。
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不同类型的东方百合小鳞茎冷藏生理变化和活性研究
《中国农学通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:以自繁的东方百合‘Siberia’小鳞茎(围径4~6 cm)为材料,选择珠芽、分生繁殖、扦插繁殖、试管繁殖途径获得的小鳞茎,研究(2±0.5)℃条件下冷藏生理和活性的一些指标变化特征。结果表明:不同类型的百合小鳞茎,在冷藏期间,可溶性糖含量、可溶性蛋白含量、硝酸还原酶活性等生理指标都具有一个低谷和一个跃升高峰,珠芽、分生和扦插形成的小鳞茎生理变化表现相近,试管鳞茎的生理变化则明显迟滞一个时期;试管小鳞茎水分含量高,水分散失快,冷藏过程中呼吸强度偏高,出库后测定的发芽率和活力指数均低于珠芽、分生和扦插繁殖的小鳞茎。
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猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)福建分离株核衣壳蛋白基因(N)的克隆与表达分析
《农业生物技术学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:猪传染性胃肠炎(swine transmissible gastroenteritis,TGE)是一种高度接触性肠道传染病,是我国法定检疫的疫病。为研究福建省猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)核衣壳蛋白基因(N)的分子特征及其原核表达产物的抗原性,参照GenBank中的TGEV全基因序列,设计合成一对扩增TGEV福建(FJ)分离株N基因的特异性引物,进行克隆和序列分析,结果表明,TGEV-FJ株N基因全长1149bp,编码382个氨基酸(GenBank登录号JQ700302),与国内外23株TGEVN基因的核苷酸同源性,氨基酸同源性进行比较分析,N基因核苷酸的同源性为95.4%~99.8%,氨基酸同源性为96.1%~100%。TGEV-FJ株N基因克隆至原核表达载体pET-32a中,并转化到大肠杆菌(Escherichia coli)Rosetta(DE3)中进行表达。SDS-PAGE分析表明,重组蛋白约为68kD,与预期分子量一致;Western blot分析表明,重组蛋白能与抗TGEV阳性血清反应出现特异性条带;以纯化的重组TGEVN蛋白为包被抗原建立的间接ELISA抗体检测方法具有良好的特异性,送检20份猪(Sus scrofa)TGEV阳性血清样本中检出16份阳性结果、10份阴性血清样本中检出9份阴性结果。利用纯化的TGEV重组N蛋白免疫Balb/c小鼠,杂交瘤技术制备单克隆抗体,获得了1株特异性好并能稳定分泌抗TGEVN蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株(命名为1-27),间接免疫荧光试验证明,该单抗能特异性识别TGEV全病毒抗原。TGEVN蛋白的单克隆抗体制备为建立TGEV免疫学检测方法提供了基础资料。
关键词: 猪 传染性胃肠炎病毒(TGEV) TGEV-福建(Fujian)分离株 核衣壳蛋白 N基因 原核表达
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