科研产出
具有转糖基活性几丁质酶和壳聚糖酶的研究进展
《食品工业科技 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:高聚合度的几丁寡糖和壳寡糖因其优越的功能活性而备受关注,但传统的制备方法存在诸多限制,如过程难以控制、分离纯化难等。近年来的研究发现,部分几丁质酶和壳聚糖酶不仅具备水解活性,还具有转糖基(transglycosylation,TG)活性,TG反应生产高聚合度寡糖时表现出底物易获得、生产成本低等优势。本文综述了近年来具备TG活性的几丁质酶和壳聚糖酶的研究进展,分析了影响几丁质酶TG活性的关键氨基酸位点,并探讨了通过对这些位点进行分子改造后对TG活性的影响。旨在为深入研究具TG活性的几丁质酶和壳聚糖酶的作用机制及其应用开发提供参考,以进一步推动高聚合度寡糖的绿色制备技术和产业化发展。
关键词: 转糖基活性 几丁质酶 壳聚糖酶 高聚合度 分子改造
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行动障碍野田村病毒(MDNV)自然感染贝类的初步研究
《渔业科学进展 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:行动障碍野田村病毒(movement disorder nodavirus, MDNV)是α野田村病毒属的一类新型野田村病毒。为了解MDNV在贝类中的自然感染情况,本研究综合运用TaqMan实时荧光定量PCR(TaqMan RT-qPCR)、组织病理和组织原位杂交等检测手段,对黄海海区野生贝类样品携带和感染MDNV的情况进行了系统分析。TaqMan RT-qPCR检测结果显示,所采集的太平洋牡蛎(Crossostrea gigas)和栉孔扇贝(Azumapecten farreri)中均有MDNV阳性检出,前者的阳性检出率为16.67%(1/6),后者的阳性检出率为33.3%(2/6);在魁蚶(Scapharca broughtonii)和菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)中均未检测到MDNV。组织病理分析显示,太平洋牡蛎外套膜组织中存在大量的嗜酸性包涵体,细胞核发生固缩;鳃组织上皮细胞受损,胞质内出现空泡化,部分细胞核固缩,鳃丝内充斥着大量的嗜酸性包涵体。栉孔扇贝消化腺上皮细胞的细胞核内可见异常嗜酸性包涵体,鳃组织中部分上皮细胞的细胞核发生核固缩。原位杂交结果显示,太平洋牡蛎和栉孔扇贝的病变部位均可见深紫色或淡紫色的MDNV探针杂交信号。来源于贝类的MDNV、虾类的MDNV和偷死野田村病毒(CMNV)的RNA聚合酶(RdRp)序列比对分析显示,太平洋牡蛎与栉孔扇贝的MDNV序列相似度为99.3%,而这二者与CMNV原始分离株序列片段的相似度为83.3%。本研究首次证实,MDNV在自然条件下能够感染近海区域的野生贝类,并导致靶组织发生明显的病理损伤,同时也表明,需密切关注患病贝类作为传染源或宿主导致MDNV在水产养殖动物中大规模传播和流行的风险。
关键词: 行动障碍野田村病毒(MDNV) 自然感染 宿主跳跃 太平洋牡蛎 栉孔扇贝
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三疣梭子蟹"黄选1号"新品种17代选育群体与野生地理群体间形态差异分析
《大连海洋大学学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:为了解三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)“黄选1号”新品种形态特征是否发生变异,挑选“黄选1号”、丹东、海州湾、莱州湾4个三疣梭子蟹群体共120只个体(每个群体30只),运用多元统计分析方法对三疣梭子蟹全甲宽、甲宽、甲长、体高、额宽、大螯不动指长、大螯长节长、第一侧齿间距、第二侧齿间距、第一步足长节、指节、前节12项可量形态性状指标进行差异分析。结果表明:单因素方差分析发现,大螯不动指长/全甲宽(E/A)、第一步足长节长/全甲宽在各群体间无显著性差异(P>0.05),其余指标在各群体间均存在显著性差异(P<0.05);聚类结果发现,海州湾和莱州湾群体形态最为接近,“黄选1号”群体趋异程度最大;主成分结果发现,前三个主成分对总变异的解释度依次为30.455%、23.948%、13.849%,累计贡献率为68.252%;判别分析结果发现,基于6个形态比例参数构建的4个群体判别公式,判别准确率P1为70.0%~96.7%,P2为70.0%~90.0%,综合判别准确率为84.6%。研究表明,4个三疣梭子蟹群体某些形态性状差异显著,“黄选1号”群体与野生群体间差异表现在头胸甲、步足和大螯,差异形成可能与生活习性、生存环境及人工选育有关,本研究结果可以为三疣梭子蟹种质资源保护及遗传改良提供重要的基础资料。
关键词: 三疣梭子蟹 “黄选1号”新品种 地理群体 形态差异 多元分析
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配合饲料替代活饵对翘嘴鳜生长性能、消化功能及抗氧化能力的影响
《中国农业科技导报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:鳜鱼(Siniperca chuatsi)是我国重要的淡水养殖优质鱼类,天生吃活饵,是凶猛的肉食性鱼类.采用人工驯化的方法改变肉食性鱼类的食性可以降低养殖成本并减少对自然资源的依赖.为探究配合饲料替代活饵对翘嘴鳜生长性能、消化功能及抗氧化能力的影响,将驯化的翘嘴鳜幼鱼(23.17±0.75 g)分别饲喂配合饲料(F组)、活饵(B组)、1餐饲料和1餐活饵(M组),养殖3个月后测量其生长指标及消化酶和抗氧化酶活性,并观察胃肠道组织显微结构.结果显示,F组的体质量和体长显著高于M组,F组的饲料系数显著低于B组,全长、体高、肥满度、肝体比和脏体比在3组之间均无显著差异;F组和M组的超氧化物歧化酶活性显著高于B组,B组和M组的过氧化氢酶活性显著高于F组,F组的还原型谷胱甘肽含量、谷胱甘肽过氧化物酶活性显著高于M组,B组的总抗氧化能力显著高于M组,3组之间的丙二醛含量差异不显著.在胃组织中,M组胰蛋白酶活性显著低于B组,F组淀粉酶活性显著高于B组,胃脂肪酶活性和肠道消化酶活性在3组间差异不显著;F组肠道绒毛高度显著高于B组和M组,相比B组,F组和M组肠道绒毛较稀疏,肠腔中绒毛间空隙增大.综上,翘嘴鳜经过驯化后摄食配合饲料不会影响其生长性能,但M组的饲喂效果不及另外2组.鱼体通过提高淀粉酶活性和部分抗氧化酶活性,以及增加肠道绒毛高度和绒毛间空隙,对饲料养殖具有一定的适应性.研究结果为鳜鱼的大规模饲料养殖以及饲料成分的进一步优化提供了理论依据.
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南极磷虾胰蛋白酶基因克隆、异源表达及其降解塑化剂研究
《中国水产科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:本研究旨在从南极磷虾中筛选克隆获得胰白蛋酶基因(EsTRY),构建重组表达载体EsTRY-pCold-SUMO,在大肠杆菌中实现高效异源表达,研究该酶对邻苯二甲酸酯类化合物(PAEs)的降解活性.南极磷虾胰蛋白酶(EsTRY)的基因长1350 bp,编码449个氨基酸,理论分子量(MW)为47040.35 Da,理论等电点(pI)为4.90.结构分析表明,EsTRY含有典型的催化三联体(Asp/Glu-Ser-His)及一个底物特异性结合位点,属于丝氨酸蛋白酶家族.EsTRY的酯酶活性达到18973 U/mL,比酶活为5802.15 U/mg.最适反应温度为25 ℃,最适pH为7.0.酶催化降解实验表明,EsTRY 对 PAEs 有较强的降解能力,15 min 内分别降解 13.2%、34.4%、63.5%、48.9%的 1 mmol/L DMP、DEP、DPRP、DBP;5 h内降解率分别达到39.4%、62.7%、86.8%、98.7%.本研究发现EsTRY对PAEs具有降解活性,为塑化剂污染的生物治理提供了新的潜在工具,同时也为南极磷虾的高效利用与高值开发提供了科学依据.
关键词: 南极磷虾 胰蛋白酶 异源表达 PAEs 降解 塑化剂
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季节变化对光唇裂腹鱼体组成及肠道菌群结构影响的研究
《淡水渔业 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:为探讨季节变化对光唇裂腹鱼(Schizothorax lissolabiatus Tsao)体组成及肠道菌群结构的影响,本研究2023年3月和6月对光唇裂腹鱼进行采样,测定了鱼类的体成分、肌肉中的氨基酸和脂肪酸含量,并利用高通量测序技术分析了肠道微生物多样性和群落结构。结果显示:不同月份(季节)光唇裂腹鱼粗蛋白含量有显著差异,3月份的鱼体粗蛋白含量显著高于6月;而3月鱼体的饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸含量低于6月份。此外,季节性温度变化对肠道微生物群落结构也有显著影响,表现在春季(3月)的肠道微生物多样性和均匀度高于夏季(6月)。肠道菌群的PICRUSt2功能预测结果显示两组鱼的肠道菌群在碳水化合物代谢、氨基酸代谢、辅酶因子和维生素代谢、萜类和多酮类的代谢、外源物质生物降解和代谢以及脂质代谢等功能上均表现出显著差异。本研究结果表明季节变化可对光唇裂腹鱼体组成和肠道微生物多样性产生显著的影响。
关键词: 光唇裂腹鱼(Schizothorax lissolabiatus Tsao) 肠道菌群 季节变化 体组成
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红九棘鲈胚胎发育及仔、稚鱼形态观察
《水产学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:[目的]查明红九棘鲈胚胎发育时序及仔、稚鱼形态特征变化,为建立批量化人工育苗技术、制定规模化繁育策略奠定基础. [方法]利用体视显微镜对红九棘鲈胚胎发育及仔、稚鱼发育过程进行观察和图像采集,记录分析其各时期的形态特征和发育特点. [结果]红九棘鲈受精卵属浮性卵,呈现透明球状,平均卵径(864.5±29.6)μm.受精卵中央具油球1个,油球平均直径(174.2±5.3)μm.受精卵经历卵裂、囊胚、原肠胚、神经胚、器官形成和孵化等6个阶段,历时24 h 30 min完成胚胎发育.初孵仔鱼平均全长(1.84±0.11)mm,仔鱼孵化3 d后卵黄囊消失,转变为外源性营养,成为晚期仔鱼;晚期仔鱼发育至24日龄时全长(16.83±2.38)mm,各鳍鳍条形成,变态成为稚鱼;稚鱼期开始出现鳞片和体色,生长速率加快,组织、器官形态分化更加完善,60日龄稚鱼全长(65.83±6.71)mm,各器官发育完善,体色为暗红色,特征与成鱼类似. [结论]本研究首次系统揭示了红九棘鲈胚胎至稚鱼阶段的发育规律,查明了胚胎发育时序、胚后阶段划分标准及关键生长参数.研究结果为建立红九棘鲈苗种规模化生产技术提供了理论基础,对减少野生资源依赖、开发适合工厂化和深远海养殖的名贵鱼类具有重要意义.
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鱼菜共生与循环水养殖系统中细菌和微真核生物群落特征对比
《渔业科学进展 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:为探究鱼菜共生系统与循环水养殖系统的微生物群落特征差异,解析两种养殖模式下细菌与微真核生物群落间的互作关系,本研究设置3组循环水养殖系统为对照组,3组鱼菜共生系统为实验组,开展78 d养殖实验。结果显示,鱼菜共生组与循环水养殖组间的细菌群落的多样性和微真核生物群落的结构存在显著差异。在优势微生物群落组成分析中发现,在门水平上,拟杆菌门(Bacteroidota)和梭杆菌门(Fusobacteriota)在鱼菜共生组中的相对丰度更高,绿藻门(Chlorophyta)的相对丰度低于对照组。在时间动态分析中发现,鱼菜共生组中的绿藻门相对丰度随时间变化持续降低,而在对照组中其相对丰度持续上升。在属水平上,黄杆菌属(Flavobacterium)、鲸杆菌属(Cetobacterium)及Anurofeca属在鱼菜共生组中的相对丰度高于对照组。共现网络分析结果显示,鱼菜共生系统养殖水体内的细菌与微真核生物群落内部具有更复杂的相互作用关系和网络结构,微真核生物群落内部竞争关系比细菌群落更为明显。两组间细菌–微真核生物互作网络分析发现,相较于循环水养殖系统,鱼菜共生系统细菌–微真核生物互作网络中的竞争关系更为激烈,有助于提高资源利用效率。本研究阐明了不同养殖模式下细菌群落与微真核生物群落的多样性、组成结构、微生物网络结构差异,明确了鱼菜共生系统微生物网络的复杂性与稳定性,凸显微真核生物群落对系统运行的重要意义,以期为鱼菜共生系统的运行提供微生物理论依据。
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杂交石斑鱼亲本种源鉴定方法的建立与应用
《渔业科学进展 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:石斑鱼(Epinephelus)养殖是我国海水养殖的重要产业之一,近年来规模化的种间杂交已成为石斑鱼繁育采用的普遍方法。石斑鱼种间杂交选育虽然有力促进了石斑鱼养殖业发展,但也为石斑鱼的种类鉴定和种质保存带来了困扰,且杂交斑逃逸也会对物种基因库造成污染。杂交斑兼具双亲的形态特征,仅根据形态鉴定比较困难。因此,迫切需要对杂交石斑鱼及其亲本进行精准判别和鉴定,以保障石斑鱼产业健康可持续发展。本研究在比较杂交石斑鱼F1代及其亲本形态学特征差异的基础上,使用线粒体基因COⅠ和核基因RYR3双重分子标记对云龙石斑鱼(E. moara♀×E. lanceolatus♂)、虎龙杂交斑(E. fuscoguttatus♀×E. lanceolatus♂)、金虎杂交斑(E. fuscoguttatus♀×E. tukula♂)、杉虎斑(E. fuscoguttatus♀×E. polyphekadion♂)、龙鼠斑(C. altivelis♀×E. lanceolatus♂)等5种常见杂交斑进行亲本种源鉴定。结果显示,杂交斑体型与母本相似,例如,云龙石斑鱼、虎龙杂交斑、金虎杂交斑和杉虎斑均为椭圆形,而龙鼠斑头部尖突、背部隆起。杂交斑的体色和花纹兼具双亲特征,其中,金虎杂交斑和杉虎斑均与其双亲体色及花纹相似性较高,难以通过体色区分杂交后代与父母本;云龙石斑鱼、虎龙杂交斑、龙鼠斑则融合双亲颜色,表现出新的体色模式;5种杂交斑与各自母本的COⅠ基因遗传距离为0.000~0.002,均小于0.020;其系统发育树中,杂交斑均与各自母本聚为一支。可见,COⅠ基因能够准确甄别杂交斑的母本;鉴于杂交斑核基因携带双亲遗传信息,通过计算杂交斑的亲本间RYR3基因遗传距离范围(0.006~0.023)和构建系统发育树,可以有效区分每个纯种的石斑鱼,说明RYR3适合作为分子标记辅助COⅠ基因用于杂交石斑鱼的父母本判别;基于上述结果,建立了COⅠ与RYR3双重分子标记的杂交石斑鱼亲本种源鉴定方法。首先,根据待测样品的RYR3基因序列的杂合度判定是否为杂交斑;同时,经序列比对确认其亲本信息;如果为杂交斑,再结合COⅠ鉴定结果甄别父母本;应用该方法对16份杂交石斑鱼样品的父母本进行种源鉴定,鉴定结果均与其记录双亲信息一致,表明杂交斑亲本种源鉴定方法可行有效。以上结果表明,COⅠ与RYR3双重分子标记技术可实现杂交石斑鱼亲本的准确判别,可为石斑鱼种质资源保护及其遗传育种提供重要参考。
关键词: 杂交石斑鱼 亲本种源鉴定 分子标记 COⅠ RYR3
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