科研产出
活性氧调控海带配子体生长发育的研究
《中国海洋大学学报(自然科学版) 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：本研究旨在揭示海带（Saccharina japonica）配子体营养生长和生殖发育的调控机制，为基于配子体克隆的杂交育种和苗种繁育提供理论依据和技术支撑。研究对雌配子体自然生长发育过程中的活性氧（Reactive oxygen species, ROS）进行观察，并通过添加外源H2O2和ROS抑制剂(二苯基氯化碘盐（Diphenyleneiodonium chloride, DPI）)观察配子体生长发育过程，发现雌配子体破碎后ROS水平呈上升趋势，破碎后12 h ROS上升到最高水平，破碎后48 h ROS水平恢复至初始状态，这表明破碎（机械损伤）会导致雌配子体产生ROS。在生殖发育条件下，雌配子体在营养生长期（第1天到第9天）ROS水平处于上升趋势，从第9天幼苗开始产生到第12天，ROS水平继续上升，而对于一直处于营养生长状态的雌配子体，其ROS在第9天达到最大值，在后续的营养生长中（第12天）又降低到第3天时的水平。DPI对配子体发育有抑制作用，且随着DPI浓度的增加，其抑制程度增加；适宜的外源H2O2对配子体发育有促进作用，但随着H2O2浓度的增加，其促进作用逐渐降低，甚至会产生抑制作用。研究结果表明，ROS是调控海带配子体生长发育的信号分子。
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产细菌素肠球菌筛选鉴定及其对耐万古霉素菌跨膜抑菌效应的研究
《海洋渔业 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：细菌素是一种对亲缘微生物具有高效抑制作用的抗菌肽，是可以有效代替抗生素的抗菌物质之一。从江苏琼港采集的文蛤(Meretrix meretrix)中特异性分离肠球菌(Enterococcus),并以非入侵性的耐万古霉素的屎肠球菌(VREfm)和金黄色葡萄球菌(VRSA)为指示菌，筛选具有抑制耐万古霉素菌株的肠球菌细菌素。结果显示，从江苏文蛤共提取出36株肠球菌，其中，有2株肠球菌对VREfm有抑制作用，经分子鉴定，这2株肠球菌分别为耐久肠球菌(E.durans)和海氏肠球菌(E.hirae);有1株肠球菌对VREfm和VRSA均有抑制作用，经分子鉴定为粪肠球菌(E.faecalis)。该粪肠球菌所产生的抑菌物质具有热稳定性强、耐低pH和易被蛋白酶分解等细菌素典型特征。此外，利用粪肠球菌细菌素粗提物对VREfm进行处理发现，粪肠球菌细菌素对细菌的抑制作用与浓度呈正相关性，随着浓度的升高，宏观上，菌液中蛋白质浓度、电导率、核酸含量和碱性磷酸酶显著升高(P<0.05);微观上，从荧光、透射和扫描显微镜的结果看，粪肠球菌细菌素对耐万古霉素菌的细胞壁结构有破坏作用，可以形成孔状结构，造成细胞质泄漏，从而对耐万古霉素菌有跨膜抑制作用。
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养殖大黄鱼摄食颗料饲料的声学行为特征
《南方水产科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：近年来，中国在深远海大黄鱼(Larimichthys crocea)养殖方面取得显著成效，不仅产量提升，品质也明显改善。但受台风、强海流等自然灾害的影响，投喂工作面临挑战。为促进大黄鱼深远海养殖技术的进一步发展，以初始体质量为(122.62±11.08) g、体长为(17.9±1.04) cm的大黄鱼为实验对象，利用水下声音测量系统(带宽20 Hz～20 kHz)记录了大黄鱼的水下声音和行为反应。结果表明：大黄鱼的摄食声信号可分为仅吞食和吞食+咀嚼2种类型；吞食和咀嚼声的频率主要集中在6～13 kHz范围内；投饵前，大黄鱼的发声信号极少，而投饵后发声信号数量显著增加；在1个摄食周期内，单尾大黄鱼表现出4～7次摄食行为，其中仅吞食行为较少；吞食行为通常伴随1～2个脉冲的发声，单脉冲持续时间较短，双脉冲持续时间较长，信号持续时间介于0.05～0.25 s，产生的平均声压级约为(74.51±3.91) dB；咀嚼行为则以5～7次居多，且咀嚼强度从(73.27±2.62) dB逐渐减至(55.82±1.43) dB。此外，随着摄食次数的增加，大黄鱼的摄食持续时间显著延长，两者呈线性正相关。
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养殖大鳍鳠雌性亲鱼卵巢发育及性类固醇激素含量的周年变化
《中国水产科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：大鳍鳠(Hemibagrus macropterus)是我国重要的特色经济养殖鱼类,为加强对养殖大鳍鳠亲鱼的性腺发育调控,本研究采用形态测量法、组织学和酶联免疫吸附法,探讨了人工养殖条件下大鳍鳠雌性亲鱼卵巢发育及性类固醇激素含量的周年变化.结果表明,大鳍鳠雌性亲鱼性腺指数(GSI)在5月达到峰值(12.16±0.67)%,标志其进入繁殖期;8月GSI显著下降至(0.89±0.24)%,卵巢开始退化;从11月的(0.57±0.03)%至次年2月的(0.82±0.05)%,大鳍鳠GSI值无显著变化(P>0.05).大鳍鳠亲鱼卵巢内卵母细胞类型根据形态学特征可分为6个时相,即卵原细胞时期(Ⅰ)、卵母细胞初始生长期(Ⅱ)、皮层小泡期(Ⅲ)、卵黄生成期(Ⅳ)、成熟期(V)、退化期(Ⅵ).根据卵巢内各时相卵母细胞的占比可将其卵巢周年发育分为启动发育期(11月)、繁殖前期(2月)、繁殖期(5月)、退化期(8月).性类固醇激素含量测定结果显示,大鳍鳠雌性亲鱼血清中雌二醇(E2)含量在5月升至峰值(301.15 pg/mL),随后显著下降;血清中11-酮基睾酮(11-KT)含量则在8月最高(135.00 pg/mL),且与其他月份差异显著(P<0.05).以上结果表明,养殖雌性大鳍鳠全年GSI只有一个峰值,为一次产卵类型,5月进入繁殖期;血清中的性类固醇激素水平与大鳍鳠卵巢发育阶段紧密相关,可作为评估养殖大鳍鳠卵巢发育状况的重要指标.本研究结果可为深入研究大鳍鳠亲本的繁殖调控以及提高人工繁殖效率提供参考.
关键词： 大鳍鳠 亲鱼 卵巢周年发育 性腺指数 雌二醇 11-酮基睾酮
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三峡库区不同鲢群体耳石微化学差异分析
《水生生物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：研究以三峡库区的鲢为研究对象,通过分析不同群体耳石微化学(微量元素Sr:Ca、Ba:Ca等及稳定同位素δ13C、δ18O)的差异,探讨鲢耳石微化学组成对栖息环境的指示性,筛选导致差异的关键指标,为开展鲢生境履历研究及野生群体和增殖放流群体的鉴别提供新的技术手段。基于耳石边缘区微量元素比值的分析结果表明三峡库区江津区、巴南区、丰都县、太平溪镇等4个样点鲢的判别成功率均值为83.6%,单因素方差分析显示Li/Ca、Na/Ca、Co/Ca、Sr/Ca、Ba/Ca在4个样点之间存在显著的差异,主坐标分析结果显示不同样点之间鲢耳石的微量元素比值存在显著差异,第一成分贡献率较高的指标是Sr/Ca （35.3%）、Co/Ca （28.4%）、Ba/Ca （20.2%）,表明Sr/Ca、Co/Ca、Ba/Ca可以作为鲢生境履历重建研究的关键微量元素指标。基于耳石稳定同位素数据的单因素方差分析显示6个群体的δ13C和δ18O值均存在显著差异,δ13C和δ18O值双位图显示太平溪镇、万州区、丰都县聚为一组,巴南区、北碚区原种场、巴南区原种场聚为一组,表明巴南区采集的野外个体可能是来自增殖放流。综上所述,耳石微量元素Sr/Ca、Co/Ca、Ba/Ca和稳定同位素δ13C、δ18O在不同鲢群体中存在显著差异,可以作为鲢生境履历重建研究的关键指标,其中δ13C和δ18O值分析可以有效实现野生群体和增殖放流群体的鉴别。
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胶州湾滩涂生计渔业渔获物"蚝艮"的分类鉴定及其分布记录
《渔业科学进展 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为明确胶州湾滩涂生计渔业渔获物“蚝艮”的种类及其分布信息，本研究利用形态学方法和DNA条形码技术对该物种开展了分类鉴定。在胶州湾北部滩涂生计渔业的传统作业区共采集“蚝艮”样品10尾。形态学研究选取了7个可数性状和8个可量性状对样品进行定量分析，并通过与历史文献记录比较，初步确定该物种为长体刺虾虎鱼[Acanthogobius elongatus(Fang, 1942)]。测序获取样品DNA条形码序列10条，在GenBank数据库中进行相似性比对，结合已报道的8种虾虎鱼类DNA条形码进行分析，构建系统进化关系，进一步确定样品的种类及分类地位。结果显示，“蚝艮”的DNA条形码与已报道的长体刺虾虎鱼序列具有高度的相似性，二者的遗传距离为种内差异水平；在系统发育树中，“蚝艮”与长体刺虾虎鱼聚为一支，支持将“蚝艮”鉴定为长体刺虾虎鱼。本研究首次对“蚝艮”实施了科学鉴定，并记录了其在胶州湾的分布，解决了该生计渔业渔获物长期以来种类不明的问题。研究结果将丰富胶州湾鱼类多样性认知，并为胶州湾渔业资源的养护和生计渔业管理措施的制定提供科学基础。
关键词： “蚝艮” 胶州湾 生计渔业 DNA条形码 物种鉴定 长体刺虾虎鱼
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乙醇梭菌蛋白替代鱼粉对日本沼虾生长及代谢的影响
《水生生物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为评估新型蛋白源乙醇梭菌蛋白(CAP)在水产饲料中应用的可行性,文章以日本沼虾(Macrobrachium nipponense)为研究对象,探讨了CAP替代鱼粉后对其生长、代谢等影响。试验设计6组等氮等脂饲料包括D1(对照组、含25%鱼粉)、D2(CAP替代10%鱼粉)、D3(CAP替代20%鱼粉)、D4(CAP替代30%鱼粉)、D5(CAP替代40%鱼粉)和D6(CAP替代50%鱼粉), 1200尾初始体重约0.1 g的日本沼虾幼虾随机分配到24个圆形塑料养殖桶,设6个处理组,每组4个平行,饲养8周。结果显示, CAP不影响日本沼虾存活率(P>0.05)。与对照组相比,在CAP替代20%鱼粉时,日本沼虾增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、饲料系数(FCR)和蛋白质效率(PER)等生长指标均差异不显著(P>0.05);但当鱼粉替代水平超过30%以后,日本沼虾WGR、SGR和PER显著降低, FCR显著升高(P<0.05)。CAP替代鱼粉对日本沼虾水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分影响不显著(P>0.05)。在CAP替代鱼粉后,显著提高了日本沼虾肌肉中非必需氨基酸和总氨基酸含量,特别是甘氨酸的含量(P<0.05)。在CAP替代10%鱼粉时,日本沼虾血淋巴总蛋白含量与对照组差异不显著(P>0.05),肝胰腺脂肪酶活性显著高于对照组(P<0.05);但是CAP替代高于10%鱼粉时,血淋巴总胆固醇、甘油三酯显著降低(P<0.05),葡萄糖显著升高(P<0.05)。在CAP替代20%鱼粉时, tor和sr-bⅠ基因相对表达量较对照组显著升高(P<0.05)。与D2组相比, D3组s6k1、atf4、acc、fas和hsl基因相对表达量显著升高(P<0.05)。除D3组tor、sr-bⅠ基因和D6组fas基因外(P<0.05),其他各试验组日本沼虾肝胰腺中s6k1、atf4、acc和hsl基因的相对表达量与对照组差异不显著(P>0.05)。总之,在日本沼虾饲料中利用CAP替代20%鱼粉对其生长、蛋白质和脂质代谢无显著影响, CAP可以作为一种新型蛋白源应用于日本沼虾配合饲料中,为菌体蛋白在水产养殖中的应用提供数据支撑。
关键词： 乙醇梭菌蛋白 鱼粉替代 生长 营养代谢 肝胰腺 基因表达 日本沼虾
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基于耳石微化学探究瓯江口刀鲚生境履历
《水产学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：【目的】探明瓯江口刀鲚的“生境履历”，掌握其洄游及生活史模式。【方法】利用X射线电子探针显微分析技术（EPMA）对瓯江口的15尾刀鲚矢耳石中锶（Sr）、钙（Ca）元素的微化学特征进行了测定分析。【结果】刀鲚耳石元素Sr/Ca值变化具有多样性，既有对应淡水生境的低值阶段（Sr/Ca值≤3），又有对应河口半咸水（3
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白斑狗鱼zpax4基因表达分析及其敲除模型的建立
《南方农业学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：[目的]探究ZP基因家族中zpax4基因在白斑狗鱼性腺生长发育中的表达情况,利用CRISPR/Cas9技术建立白斑狗鱼zpax4基因敲除模型,为后续探究其生物学功能提供参考依据.[方法]利用RACE克隆白斑狗鱼zpax4基因的全长cDNA序列,利用生物信息学软件进行zpax4蛋白理化性质、结构特点和系统进化分析;应用实时荧光定量PCR分析zpax4基因在白斑狗鱼126、180和320 d 3个时期8个组织中的相对表达量;设计并筛选合适的sgRNA,通过对受精卵的显微注射,建立白斑狗鱼zpax4基因的CRISPR/Cas9敲除模型,并对获得的F0代敲除嵌合体进行组织切片观察.[结果]白斑狗鱼zpax4基因cDNA全长2771 bp,其中,5'非编码区(5'-UTR)为162 bp,3'非编码区(3'-UTR)为150 bp.zpax4基因编码811个氨基酸残基,蛋白分子式C4117H6364N1092O1209S39,理论分子量为91.752 kD,理论等电点(pI)为5.43,且编码蛋白N端有信号肽序列,靠近C端有ZP结构域,无跨膜结构域,其二级结构由α-螺旋(14.3%)、无规则卷曲(54.5%)和延伸链(31.2%)构成.多序列比对和系统发育树分析显示,白斑狗鱼zpax4蛋白与其他几种鱼类的zpax4蛋白氨基酸序列相似性为54.85%,功能结构域位置相对保守.实时荧光定量PCR检测结果显示,白斑狗鱼zpax4基因在肠道、肌肉、鳃、头肾、肾脏、肝脏和精巢中基本无表达,而在3个时期的卵巢中均呈极显著表达(P<0.01),且卵巢中相对表达量在126、180和320 d 3个时期呈先增后减的变化趋势,180 d相对表达量最高;此外,在320 d雄鱼的脑组织中也有一定量的表达.利用CRISPR/Cas9技术筛选得到合适的sgRNA,并成功建立白斑狗鱼zpax4基因敲除模型,得到多种突变类型个体,缺失碱基数分别为1、4、7和8,均不为3的倍数.对F0代嵌合体鱼苗进行整鱼切片分析,并未发现明显的性腺及其他部位的表型异常.[结论]利用CRISPR/Cas9技术对白斑狗鱼zpax4基因进行敲除,成功构建了敲除模型,获得白斑狗鱼zpax4基因敲除嵌合体,并筛选出更优的sgRNA靶点序列.zpax4基因可能在白斑狗鱼卵巢发育的前中期发挥重要作用.
关键词： 白斑狗鱼 zpax4基因 表达特征 基因敲除 CRISPR/Cas9
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