科研产出
猕猴桃溃疡病病原菌分子鉴定与抗性材料初选
《核农学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为明确我国南方猕猴桃细菌性溃疡病频发区其致病菌的种类与特征,初选出抗性种质材料,以猕猴桃主栽品种红阳、徐香和金丰的溃疡病感病枝条为材料,采用KB培养基、平板划线和梯度稀释法分离病原菌,利用基于细菌16S-23S rDNA内转录间隔区序列设计的特异性鉴别引物,对分离得到的6个代表菌株进行PCR扩增和测序,获得了大小约为280bp的特异性片段,其测序结果与登录号为D86357和AY342165的Pseudomonas syringae pv.Actinidia的序列完全一致。采用离体叶片注射接种、离体枝条针刺接种和活体枝杆针刺接种3种方法鉴定了18份种质材料的抗性。分析结果表明,红阳等中华猕猴桃最感,布鲁诺实生优株13-3、13-4等最抗,美味猕猴桃海沃德居中。本试验所分离的菌株均为丁香假单胞杆菌猕猴桃致病变种(Pseudomonas syringae pv.Actinidia),筛选出2份高抗溃疡病的种质材料。为进一步开展猕猴档细菌性溃疡病防治研究奠定基础。
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水稻卷叶突变体rl15(t)的生理学分析及基因定位
《中国农业科学 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：【目的】对环境诱导卷叶突变体开展生理学特性分析,并对候选的突变基因开展初步定位,为下一步的基因克隆与功能分析提供研究基础。【方法】用60Coγ射线诱变粳稻品种日本晴(Nipponbare)种子,发现了一份叶片在晴朗天的正午时分高度内卷的突变体,命名为rl15(t)(rolled leaf 15)。通过田间种植鉴定,对该突变体进行表型观察及主要农艺性状调查。采用不同温度和相对湿度处理rl15(t)和野生型,以揭示影响突变体叶片卷曲的环境因素。试验设置3个处理温度(24℃、29℃、34℃)和2个相对湿度(RH=60%或95%),在人工气候箱处理抽穗期的rl15(t)和野生型,以处理1.5 h后的剑叶测定叶片卷曲度(RLI)。自清晨6:00时至下午18:00时,每隔2 h用便携式气体交换系统Li-6400测定rl15(t)和野生型剑叶的净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)和气孔导度(Gs)等指标,同时用WP4露点水势仪测定剑叶的叶片水势,分析并比较突变体和野生型的上述生理表现的异同。将rl15(t)与野生型日本晴杂交,观察F1植株和F2群体的叶片表型,对F2表型分离进行χ2测验,分析突变体的遗传行为。以rl15(t)×珍汕97B的F2群体为材料,利用BSA法对候选基因进行定位。【结果】与野生型亲本日本晴相比,rl15(t)突变体植株变矮、分蘖减少、穗长变短、籽粒变小、生育期延迟;rl15(t)突变体叶片短窄且在阴雨天气或晴天的清晨和黄昏时表现为正常的平展或轻微内卷,但在晴朗天的正午时分表现高度内卷。温度和湿度梯度处理试验表明,rl15(t)突变体叶片卷曲行为受环境诱导,湿度是诱导突变体叶片卷曲的主要因素,高温可促进该表型的表现。rl15(t)突变体剑叶的净光合速率、蒸腾速率和气孔导度等光合参数以及叶片水势在清晨和黄昏同野生型亲本较接近,但在正午时分均显著低于野生型;而rl15(t)突变体剑叶的水分利用效率(WUE)在清晨、正午时分和黄昏与野生型接近,但在其他时段显著高于野生型。rl15(t)与野生型亲本日本晴的F1表现叶片正常的平展,F2群体中平展叶与卷叶表型株符合3﹕1分离比,表明rl15(t)突变体的卷叶突变性状受1对隐性核基因控制。RL15(t)初步定位于水稻第10染色体长臂端SSR标记RM25302和RM25343之间,与两标记的遗传距离分别为0.8和2.0 cM。【结论】突变体rl15(t)的卷叶表型是受环境诱导的,候选基因定位于SSR标记RM25302和RM25343之间,该区段内未见同类表型基因的报道,推测RL15(t)可能是一个新的卷叶调控基因。
关键词： 水稻(Oryza sativa L.) 卷叶性状 生理学特性 基因定位 环境诱导
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超声波提取杨梅疏果核仁中苦杏仁苷工艺研究
《浙江农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了明确杨梅疏果核仁中苦杏仁苷的提取方法,采用丁岙种杨梅的疏果为原料,以苦杏仁苷提取率为响应值,在超声波提取单因素试验和二水平试验的基础上,选择乙醇浓度、料液比、提取温度作为试验因子,利用Design-Expert 8.0软件进行三因素三水平的响应面试验设计,并建立二次回归方程的预测模型。试验确定了杨梅疏果核仁中苦杏仁苷的最佳提取工艺条件:乙醇浓度27%,料液比1∶45(m/V),提取时间20 min,提取温度44℃,超声功率250 W。在该条件下苦杏仁苷理论提取率为94.03%,实际提取率为93.80%,与模型预测值基本相符。
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顶空固相微萃取-气相色谱-质谱法对柑橘蜜中挥发性组分的定性和半定量分析
《理化检验(化学分册) 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：采用顶空固相微萃取与气相色谱-质谱法结合进行柑橘蜜中挥发性组分的定性和半定量分析。取柑橘蜜4.00g与水1.00g置于顶空瓶中,用DVB/CAR/PDMS纤维头作萃取头,将顶空瓶密封,在50℃水浴中搅拌10min,萃取50min。取出萃取头,插入气相色谱仪中于255℃解吸3.5min,经TG-5MS毛细管柱分离,质谱测定采用电子轰击离子化方式。用此方法分析了4种柑橘蜜样品,鉴定了72种挥发性组分,主要有醇、烃、酮、醛及酯类化合物,并确定柠檬烯、反式和顺式氧化芳樟醇、β-芳樟醇以及柠檬醛为其特征性成分。按方法对8种样品进行分析,测得各特征性成分的绝对峰面积的相对标准偏差(n=5)在2.9%~20%之间。
关键词： 顶空固相微萃取 气相色谱-质谱法 柑橘蜜 挥发性组分
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水稻抗白叶枯病相关基因的亚细胞定位
《浙江农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：利用亚细胞定位技术对水稻抗白叶枯病相关基因的表达产物进行了分析,为基因功能分析提供了重要信息。通过前期基因芯片筛选、半定量/定量PCR的验证及基因功能注释,从高抗白叶枯病水稻品种Y73中筛选了18个潜在的与抗白叶枯病相关的基因,并在烟草叶片细胞中进行亚细胞定位分析。通过观察融合有绿色荧光标记(sGFP)的表达产物,初步了解这些基因在烟草细胞中的表达位置。经过激光共聚焦显微镜观察后发现:其中4个基因的sGFP融合蛋白定位于细胞核上,可能发挥了转录因子的功能;4个基因的sGFP融合蛋白定位于细胞质膜上,推测可能与细胞质膜的稳定或控制蛋白转运相关;4个基因的sGFP融合蛋白同时定位于细胞核和细胞质膜上;另有6个基因的sGFP融合表达后没有观察到明显的定位信号。
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水稻千粒重QTLqtgw1基因的精细定位
《核农学报 》 2014 CSCD
摘要：粒重是水稻产量性状的主要构成因子及影响稻米品质的重要因素之一。本研究针对第1染色体上对千粒重具有重要作用的QTL进行精细定位。利用从珍汕97/密阳46重组自交系高代群体中挑选出在第1染色体短臂RM151-RM10404、RM151-RM10425和RM1344-RM5359区间呈杂合而背景基本纯合的5个剩余杂合体(ResidualHeterozygousLine,RHL),衍生5个F2:3群体(RHL群体),对千粒重QTL进一步分析,在RM151-RM1344区间检测到控制千粒重的QTLqtgw1,其增效等位基因均来自母本珍汕97。应用SSR标记检测,从其中一个RHL衍生群体中筛选到分离...
饲粮胆碱水平对绍兴鸭脂质代谢的影响
《畜牧兽医学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：本试验旨在研究饲粮不同胆碱水平对绍兴鸭脂质代谢的影响,并探究产蛋鸭最佳的日粮胆碱水平。采用单因子随机分组试验设计,在玉米-豆粕型基础饲粮中分别添加5个胆碱水平(0、250、500、750、1 000mg·kg-1),探讨饲粮中添加不同水平胆碱对绍兴鸭脂质代谢的影响。试验选用刚进入产蛋期的绍兴鸭540只,分为5组,每组6个重复,每重复18只,饲养20周。结果表明:1)与对照组相比,饲粮添加胆碱显著降低了试验鸭肝和胸肌中粗脂肪和胆固醇的含量(P<0.05),各组间肝体比和胸体比无显著差异(P>0.05)。2)随着饲粮胆碱水平的提高蛋中胆固醇的含量显著降低(P<0.05),粗脂肪含量显著升高(P<0.05)。3)饲粮添加胆碱显著降低了试验鸭肝和胸肌中饱和脂肪酸(SFA)的比例(P<0.01),显著升高了试验鸭肝和胸肌中单不饱和脂肪酸(MUFA)和多不饱和脂肪酸(PUFA)的比例(P<0.01)。4)饲粮不同胆碱水平对绍兴鸭血浆中胆碱(Ch)含量、脂肪酶活力(LPS)、极低密度脂蛋白(VLDL)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、甘油三酯(TG)、血清磷脂(PL)、游离脂肪酸(NEFA)、总胆固醇含量(T-CHO)、碱性磷酸酶活性(AKP)没有显著影响。由此可知,基础饲粮中添加一定量的胆碱可降低蛋鸭肝和胸肌中胆固醇和粗脂肪的含量,降低蛋中胆固醇的含量,影响肝和胸肌中不同脂肪酸的比例。
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转基因植物中删除选择标记基因的研究进展
《浙江农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：选择标记基因广泛应用于植物转基因工程中,然而这些基于除草剂和抗生素类抗性选择标记基因的利用,在转基因筛选和鉴定完成后功能多余。当前转基因植物的标记基因及相关产物对环境污染和食用安全的潜在影响,已经引起了人们的广泛关注。随着转基因技术的不断发展和人们对转基因植物和食品安全性的关注,删除转基因植物中的选择标记基因非常重要。文章着重讨论了植物转基因过程中,选择标记基因的利用,删除选择标记基因的几种方法,包括共转化法、位点特异性重组、染色体内重组、转座子介导的重组、删除叶绿体转化中选择标记基因,以及无选择标记基因植株的直接再生等。同时,还对这些技术的发展作了展望。
关键词： 选择标记基因 共转化 位点特异性重组 转座子 叶绿体转化
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硝化抑制剂DMPP应用研究进展及其影响因素
《农业环境科学学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：硝化作用是土壤氮素转化的关键过程之一,利用化学氮肥添加硝化抑制剂可有效调控土壤氮素的转化,提高农产品产量和品质,同时降低氮肥损失对大气和水体造成的污染。3,4-二甲基吡唑磷酸盐(3,4-dimethypyrazole phosphate,DMPP)是一种对植物及土壤无毒无害的高效硝化抑制剂。在现有相关研究的基础上,结合国内外研究进展,回顾了国内外硝化抑制剂DMPP的研究历史与特性,通过综述DMPP对土壤硝化抑制作用的机理,全面评述了施用DMPP的环境效应和农学效应,重点阐述了影响DMPP在土壤中硝化抑制效果的影响因素,归纳了国内外当前的研究热点及取得的科研成果,并对未来的研究方向予以展望。
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