科研产出
猪源结肠小袋纤毛虫培养、分子鉴定和显微观察
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：小袋纤毛虫病是一种人畜共患寄生虫病。本研究从浙江地区病猪盲肠内分离到了一株结肠小袋纤毛虫,通过RPMI1640培养基对其进行了体外培养,结肠小袋纤毛虫在28℃和37℃均能良好生长,在培养后第5天和第4天分别达到高峰值,虫体密度分别为1.60×104和2.31×104个·m L-1。显微镜下滋养体胞口、胞肛和食物泡结构明显,DAPI染色后大核明显呈哑铃型,且滋养体有大小差别明显的2种类型。18S r RNA基因PCR扩增、测序和聚类分析结果显示,猪源结肠小袋纤毛虫分离株存在2条明显不同的18S r RNA基因序列,序列间趋异性为0.6%,且该分离株序列与国外分离株间存在显著差异,在进化树上形成一独立的亚枝。在高倍显微镜下,滋养体内常见有许多生物活动,种类不明,16S r RNA基因PCR扩增到3条未知细菌序列,未知细菌16S r RNA基因序列与结肠小袋纤毛虫内微生物间的确切关系有待研究。
关键词： 结肠小袋纤毛虫 体外培养 18S r RNA基因
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IL8基因3'UTR SNPs与中国荷斯坦牛泌乳性状的关联分析
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为明确白细胞介素8基因(IL8)在浙江省内不同牛种群体间的遗传变异情况,应用PCR-SSCP技术检测了中国荷斯坦牛、温岭高峰牛和温州水牛IL8基因3'UTR的多态性。PCR-SSCP和测序结果表明,中国荷斯坦牛和温岭高峰牛在IL8基因3'非翻译区存在3个完全连锁的SNP(g.2831A/G,g.2904 T/C,g.3030 G/A)构成的单倍域,温州水牛在这些位点均表现为突变纯合型。利用一般线性模型分析IL8基因3'UTR的3个SNPs对中国荷斯坦牛305 d校正产奶量、乳脂量、乳蛋白率及体细胞评分的影响,发现这些SNPs可显著影响中国荷斯坦牛305 d校正产奶量(P<0.01)和乳脂率(P<0.05)。
关键词： IL8 3'UTR SNPs 中国荷斯坦牛 温岭高峰牛 温州水牛
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草莓主要污染微生物类群抑菌清洗方法研究
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为寻找新型安全的草莓抑菌清洗剂及其清洗方法,选用自来水、0.02%次氯酸钠、2.0%乳酸、2.0%苹果酸、2.0%柠檬酸、0.1%亚氯酸钠和0.1%酸化亚氯酸钠(p H 2.3)分别浸泡清洗草莓2和10 min,检测其对草莓表面菌落总数、大肠杆菌、酵母、霉菌和鼠伤寒沙门氏菌的去除效果。然后根据各抑菌清洗剂对草莓表面微生物的去除效果,获得最佳的草莓抑菌清洗方法。研究结果表明,0.1%酸化亚氯酸钠清洗2 min抑菌效果最佳,其次为2.0%乳酸、2.0%苹果酸和2.0%柠檬酸清洗10 min,柠檬酸酸化亚氯酸钠为草莓及其同类果蔬抑菌清洗的最佳候选方法之一。
关键词： 草莓 菌落总数 霉菌 酵母 大肠杆菌 鼠伤寒沙门氏菌
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N_2预处理结合MAP复合保鲜处理对水蜜桃贮藏品质、活性氧代谢及能量状态的影响
《林业科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：【目的】水蜜桃采收后易后熟和衰老,贮藏期和货架期短。本研究为寻求安全有效的水蜜桃贮藏保鲜方式,并探究其保鲜机理。【方法】以"湖景蜜露"水蜜桃为试材,研究氮气预处理结合自发气调(MAP)复合保鲜处理对果实低温贮藏及货架期间营养品质、活性氧代谢及能量水平的影响。果实经100%N2处理6 h后,用厚度0.02 mm的聚乙烯薄膜袋密封包装,对照组不做任何处理。所有果实均置于(1±1)℃相对湿度85%~90%保鲜库中,贮藏30天后,从薄膜袋取出,置于(25±1)℃下模拟货架期。测定低温贮藏及货架期间水蜜桃果实腐烂指数、硬度、可溶性固形物(TSS)、维生素C(Vc)和过氧化氢(H2O2)含量、超氧阴离子(O2.-)产生速率、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和脂氧合酶(LOX)活性、膜透性、丙二醛(MDA)含量、腺苷三磷酸(ATP)、腺苷二磷酸(ADP)和腺苷磷酸(AMP)含量及能荷(EC)值。【结果】结果表明:随着冷藏及常温货架存放时间的延长,对照组水蜜桃果实组织中的ATP,ADP含量和能荷低温贮藏10天后即开始出现明显降低,SOD和CAT在整个贮藏过程中均呈现明显的下降趋势,H2O2和O2.-的含量明显增加,而MDA含量与膜透性则呈大幅度的上升,导致膜脂过氧化程度的增加和膜完整性的破坏。N2预处理结合MAP复合保鲜处理可有效降低水蜜桃果实低温贮藏过程中的腐烂指数,当果实转到25℃放置4天,处理组水蜜桃的果实腐烂指数仅为对照组果实的55.56%。同时,N2预处理结合MAP复合保鲜处理能有效地维持果实TSS及Vc含量,较好保持了营养品质。进一步研究发现,N2预处理结合MAP复合保鲜处理能维持果实中较高的ATP,ADP含量及能荷值,提高SOD及CAT活性,进而抑制H2O2积累及O2.-的产生,降低MDA含量及膜透性的升高。相关性分析表明,在贮藏过程中,能荷值与O2.-产生速度(R2=0.971 2)、H2O2含量(R2=0.974 6)及膜透性(R2=0.967 8)具有显著负相关性。【结论】N2预处理结合MAP复合保鲜处理延缓水蜜桃后熟衰老可能与提高果实组织能量水平及抗氧化水平,维持活性氧代谢的平衡,保持膜的完整性有关。
关键词： 水蜜桃 充氮处理 自发气调包装 营养品质 活性氧代谢 能量
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酶联免疫法(ELISA)测定瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：采用酶联免疫法对瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1含量进行测定,并对该方法的线性、灵敏度、回收率和重现性进行验证,同时对如何预防瓶装黄酒中黄曲霉毒素B1污染进行讨论.黄曲霉毒素B1标准品在0.1~2.0μg·L-1范围内线性良好,y=-0.4679x +0.3132,R2=0.998 2,该方法对黄曲霉毒素B1的最低检出浓度为0.05 μg·kg-1,不同浓度添加回收试验所得回收率为90.2% ~ 106.0%,重复性好,精密度为3.5%.通过对26个不同产品特性黄酒样品中黄曲霉毒素B1的测定,发现所有样品均有检出,但黄曲霉毒素B1的含量均小于2.0μg·kg-.酶联免疫检测方法研究结果表明,该方法测定快速,定量准确,重现性好,可高效率地定量检测大量市售黄酒样品中黄曲霉毒素B1的含量.
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四种灌溉模式对双季茭白(秋茭)生长和产量的影响
《灌溉排水学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为了进一步明确双季茭白(秋茭)的节水灌溉技术,采用大田试验研究了4种灌溉方式(处理Ⅰ:1~2cm水位干湿交替;处理Ⅱ:1~2cm水位长期灌溉;处理Ⅲ:4~5cm水位干湿交替;处理Ⅳ:4~5cm水位长期灌溉)对双季茭白(秋茭)生长和产量的影响。结果表明,处理Ⅰ和处理Ⅱ的株高显著低于处理Ⅲ和处理Ⅳ,前2个处理间差异显著,其中处理Ⅰ的茭白株高显著低于处理Ⅱ;后2个处理间株高差异不显著。4个处理的分蘖数变化不同,其中处理Ⅱ的分蘖数增加最多,其次是处理Ⅲ,最少的是处理Ⅰ;与处理Ⅳ比较,处理Ⅰ和处理Ⅱ的叶片数增加较多。4种灌溉模式对茭白的经济指标(壳茭质量、净茭质量、净茭长度和净茭宽度)以及茭白的采收始期、采收高峰期和采收末期均无显著影响。处理Ⅰ和处理Ⅱ的茭白产量远低于处理Ⅲ和处理Ⅳ的产量,其中处理Ⅲ茭白产量最高。灌溉水位4~5cm进行干湿交替灌溉模式下茭白产量不受影响,灌溉水位1~2cm模式下茭白产量显著减少。
关键词： 双季茭白(秋茭) 灌溉模式 干湿交替 生长特性 产量
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水稻9311及其突变体响应白叶枯病菌的活性氧变化
《核农学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为筛选水稻白叶枯病敏感型突变体材料,并确定其与白叶枯病菌互作早期活性氧代谢规律及其与抗病性的关系,用11个白叶枯病菌小种于分蘖期对野生型9311及其10个辐射突变体进行抗性评价,以接种后的病斑长度为依据,聚类分析发现突变体189抗病性与野生型差异最大,进而以突变体189为材料,比较研究接种P6小种后的活性氧变化。结果显示:接种后24 h,9311的O2·-和H2O2释放量达峰值,分别为突变体的120%和134%,差异达极显著水平;P6菌在189和9311叶中的生长趋势基本相同。推测9311可能是因高积累的活性氧分子抑制了白叶枯病菌在叶片中的扩展,从而限制了病斑长度。
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水稻叶片早衰突变体osled的生理特征与基因定位
《作物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：叶片早衰直接影响作物的产量与品质,因此,研究叶片早衰的分子与生理机制对于作物遗传改良具有重要的意义。本研究利用60Co-γ辐射诱变水稻品种93-11获得突变体osled,其从分蘖期叶片就开始早衰,最先表现为叶尖和叶边缘变褐,并伴有红褐色斑点。在苗期经模拟干旱胁迫处理后,突变体不仅早衰,而且植株变矮以及根系变短。生理分析表明,野生型剑叶、倒二叶和倒三叶的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及过氧化物酶(POD)活性基本不变,但突变体则显著升高且倒二叶和倒三叶极显著高于野生型;突变体和野生型三片叶的可溶性蛋白含量、过氧化氢酶(CAT)活性及叶绿素总含量均表现下降,但突变体倒二叶和倒三叶的含量或活性均显著低于野生型。叶片经台盼蓝、二氨基联苯胺(DAB)及四唑硝基蓝(NBT)等细胞组织化学染色及透射电镜分析表明,osled叶片细胞膜系统已破坏,H2O2和O2-积累,叶绿体已开始解体。遗传分析表明,osled受1对隐性基因控制,借助图位克隆技术将该基因定位于第3染色体长臂的RM15528与RM15553两个标记之间,遗传距离均为0.7 c M,该结果为进一步克隆Os LED基因并研究其功能奠定了基础。
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水稻早衰突变体lst的生理分析与基因定位
《核农学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：本研究报道了一个来自EMS诱变优良恢复系浙恢7954的新水稻早衰突变体lst(Leaf senescence at tillering stage),其最主要的表型特点是叶片上出现锈色衰老斑,通过荧光共聚焦倒置显微镜观察和透射电子显微镜镜观察表明lst的叶绿素荧光减弱,叶绿体结构异常。生理生化分析发现lst突变体剑叶在早衰性状出现时,与野生型相比,其叶绿素和类胡萝卜素含量显著降低;O2-、H2O2、MDA含量升高,保护酶系统SOD和CAT活性降低。遗传分析表明,该突变体受1对隐性核基因控制,利用200株日本晴/lst的F2隐性定位群体,最终将LST基因定位在第3染色体SSR标记RM3646和InDel标记IAC120537-1,2之间,共171kb,含两个BAC,30个基因,这为基因的克隆和功能研究奠定了基础。
关键词： 水稻(Oryza sativa L) 早衰 基因定位 生理分析
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高效液相色谱光化学在线衍生技术在11种磺胺药物残留检测中的应用
《分析化学 》 2014 SCI 北大核心 CSCD
摘要：建立了磺胺药物残留的高效液相色谱-光化学在线衍生-荧光检测方法,并应用于猪肉的检测。样品经过乙腈提取,色谱柱分离后,通过在线光化学衍生后,用荧光检测器进行直接检测。优化后的色谱条件:Eclipse Plus C18柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),流动相为均含0.2%甲酸的乙腈、甲醇和水梯度洗脱,检测激发波长为248 nm,发射波长为350和412 nm。各种磺胺在各自浓度范围内线性相关系数R2>0.999,回收率在85.7%~101.1%之间,RSD为1.9%~6.6%(n=6),各磺胺的检出限(S/N=3)为0.2~3.0μg/kg,定量限(S/N=10)为0.5~10.0μg/kg。
关键词： 光化学在线衍生 高效液相色谱荧光检测法 磺胺
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