科研产出
小麦黄花叶病毒P2蛋白原核表达、抗血清制备及其在感病小麦细胞中的定位
《浙江农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：通过RT-PCR获得小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)扬州分离物P2基因,并进行序列分析。P2基因编码区含有2 635个核苷酸,编码一个由875个氨基酸组成的分子量72 kDa的蛋白。在原核表达体系中,该基因的全长表达较困难,因此将P2基因的5'端和3'端各设计大约1 kb亚克隆到原核表达载体pMAL-C2X中构建重组表达载体MBP-P2N,MBP-P2C,经IPTG诱导在大肠杆菌BL21(DE3)中表达MBP-P2N和MBP-P2C融合蛋白。MBP-P2C融合蛋白经大量诱导、纯化、制备相应抗血清。用制备的抗血清可以有效检测WYMV病叶中的P2蛋白。免疫胶体金标记实验表明在感病WYMV的小麦叶片细胞膜状内含体结构中发现有大量胶体金颗粒特异性分布,表明P2蛋白可能与膜状内含体结构有关。
关键词： 小麦黄花叶病毒 P2基因 原核表达 抗血清制备 免疫胶体金标记
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小麦黄花叶病毒编码VPg蛋白N端结构是VPg与核仁蛋白Fibrillarin互作区域
《浙江农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)属于马铃薯Y病毒科大麦黄花叶病毒属成员,其基因组是由两条正义单链RNA组成,共编码10个蛋白。其中,VPg(Viral protein genome-linked)作为病毒末端结合蛋白,与病毒基因组RNA 5’端共价连接。利用软件分析WYMV VPg蛋白氨基酸序列发现其N端具有核定位信号(NLS)序列,C端具有核输出信号(NES)序列。通过激光共聚焦显微镜观察VPg与GFP融合蛋白在烟草细胞中的表达情况发现,GFP-VPg主要定位于细胞核中。利用eYFP(n)标记核仁结构蛋白Fibrillarin与VPg进行双分子荧光互补实验发现,VPg与Fibrillarin互作且定位于细胞核中。根据VPg结构特点构建一系列缺失突变体与Fibrillarin的互作实验验证了它们之间的互作区域发生在N端NLS区域。
关键词： 小麦黄花叶病毒 VPg蛋白 细胞核定位 Fibrillarin蛋白 蛋白质互作
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利用空间诱变技术进行早籼稻新品种的改良
《核农学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：利用卫星搭载2个早籼稻品系浙105和浙207干种子,进行空间诱变处理。回收后SP2~SP7逐代选择,以主要农艺经济性状改良为目标,结合稻瘟病和白叶枯病抗性筛选,获得一批突变品系;选用72对分布于水稻12条染色体上的SSR引物对5个变异株系与原种对照进行DNA分子检测。结果表明:空间诱变对水稻品种产生了不同程度的生理损伤,SP1表型不分离,SP2出现不同程度的变异,SP3起逐代选择获得农艺经济性状、稻瘟病和白叶枯病抗性变异株,从中选出得到明显改良的新品系;5个变异株系与原种之间均存在着不同程度的SSR多态性差异。
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不同竹炭施用量对稻田甲烷和氧化亚氮排放的影响
《农业环境科学学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：以来源于竹材废弃物的生物炭为试验材料,采集宁绍平原典型稻田土壤进行水稻盆栽试验,探究不同竹炭施用量条件下生物炭对稻田温室气体排放的影响。研究结果表明:与空白对照处理相比,来源于竹材废弃物的生物质经炭化后还田对稻田温室气体CH4和N2O排放有显著的抑制作用,且减排效果随着竹炭施用量的增加而增强,生物炭处理的水稻产量亦比空白和常规施肥处理有所提高。施用竹炭条件下,CH4和N2O季节累积排放量比对照处理分别降低了58.2%~91.7%和25.8%~83.8%;相对常规施肥处理而言,降低幅度分别高达64.3%~92.9%和72.3%~93.9%。这可能是由于竹炭所包含的有机碳高度芳香化而具有生物化学和热稳定性,同时竹炭有很大的比表面积和表面吸附能,竹炭的施用可能改善了水稻土理化特性并抑制相关微生物的活性,从而降低了稻田温室气体排放。
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设施大棚铺设银色反光膜栽培杨梅试验研究
《中国农学通报 》 2014 CSCD
摘要：在设施大棚杨梅园铺设银色反光膜,试验研究大棚铺设反光膜对‘临海早大梅’物候期、果实品质及效益的影响。以大树移植3年的11年生‘临海早大梅’为试材,2013年1月11日对其进行大棚覆盖,并于2月13日大棚内铺设银色反光膜,以不盖为对照,观察记载棚内外温湿度、杨梅物候期的变化,测定果实单果质量、可溶性固形物含量和每公顷产量。大棚杨梅园铺设反光膜可显著增加棚内的温度和相对湿度,使杨梅的物候期显著提早,开花期提早16天,果实成熟期提早21天,果实单果质量增加10%,可溶性固形物含量增加2.1个百分点,每公顷产量提高45.6%,净增产值1265610元。设施大棚铺设反光膜栽培杨梅,可以显著提早成熟期,显著提高单果质量和可溶性固形物含量。
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紫杉醇在鸡肉中的沉积及对Bcl-2基因表达的影响
《浙江农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：试验旨在研究不同红豆杉添加水平对肉鸡鸡肉紫杉醇含量及组织Bcl-2 mRNA表达水平的影响,以确定红豆杉在肉鸡饲粮中的适宜添加水平。试验选取日龄、体重相近(819±50)g且健康状况良好的生长肉鸡180只,随机分为3组:对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮的基础上分别添加1%,3%红豆杉枝叶干粉。试验期为67天,结果表明:1)饲喂红豆杉前期(第1~30天),3%红豆杉极显著降低了肉鸡平均日增重及平均日采食量(P<0.01);但在后期(第31~60天),1%(P<0.05)、3%(P<0.01)红豆杉显著提高了肉鸡平均日增重与平均日采食量;从整个采食期来看,肉鸡平均日增重、平均日采食量随红豆杉添加剂量的增加分别呈升高、降低趋势,但影响不显著(P>0.05)。饲料增重比随红豆杉添加剂量的增加呈降低趋势,但在不同时期各组之间均表现差异不显著(P>0.05)。2)肉鸡采食红豆杉后,红豆杉中的紫杉醇可以沉积到鸡肉中,由原来的0水平上升到0.62 ng·g-1。3)3%红豆杉添加水平可使肉鸡肝脏Bcl-2 mRNA表达量显著升高(P<0.01),肺脏Bcl-2 mRNA表达量显著降低(P<0.01),对脾脏无显著影响(P>0.05)。由此可见,饲粮红豆杉中的紫杉醇能够沉积到鸡肉中,但沉积量很低;该试验条件下,红豆杉适宜添加水平为3%。
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