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双酶分步水解法制备棉籽多肽的蛋白酶筛选

中国粮油学报 2012 北大核心 CSCD

摘要:本研究利用6种蛋白酶对棉籽蛋白进行单酶和双酶组合水解,测定水解过程中棉籽蛋白的水解度,同时对酶解产物的多肽得率进行了分析比较。结果表明,为了高效制备棉籽多肽,可先用Alacalase水解蛋白酶对棉籽蛋白进行水解,再利用Flavourzyme风味蛋白酶继续酶解,最终产物的水解度可达到36.58%,多肽得率达到71.32%,相比单独应用Alcalase水解蛋白酶,水解度提高了91.32%,多肽得率提高5.88%。

关键词: 棉籽蛋白 双酶分步酶解 水解度 多肽得率

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不同辐射剂量下秀珍菇营养价值效应的主成分分析

热带作物学报 2012 CSCD

摘要:应用多元统计成分分析法,对不同辐射剂量下秀珍菇蛋白质营养价值的6个主要营养指标进行相关及主成分分析。结果表明:化学评分与氨基酸评分呈极显著正相关,与必需氨基酸指数、生物价和氨基酸比值系数分呈显著正相关。氨基酸评分与必需氨基酸指数和生物价呈极显著正相关,与氨基酸比值系数分呈显著正相关。必需氨基酸指数与生物价呈极显著正相关。主成分分析显示,可将原6个营养指标综合为2个主成分,其累积贡献率可达98.28%。根据主成分对原性状的综合能力进行营养价值分析,2个主成分可分别解释为氨基酸评分和化学评分效应因子及营养指数效应因子,并建立了主成分方程。据此计算出各剂量的主成分得分和综合得分,排序第一、二的分别为1.00、1.25 kGy的剂量,因而被列为较佳的辐射剂量。

关键词: 秀珍菇 营养价值 相关分析 主成分分析

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响应面法优化枇杷花总黄酮超声波辅助提取工艺的研究

热带作物学报 2012 CSCD

摘要:采用超声波辅助提取枇杷花中的总黄酮,研究超声波功率、乙醇浓度、提取温度、提取时间、液料比及提取次数对总黄酮提取得率的影响。根据单因素试验,选择在超声波功率80 W、一次浸提条件下优化提取工艺;采用Box-Behnken中心组合试验设计原理,设计4因素3水平试验,以响应面分析法优化乙醇浓度、提取温度、提取时间及液料比4个因素对总黄酮提取得率的影响。结果表明:当超声波功率为80 W时,枇杷花中总黄酮超声波辅助提取的优化工艺参数为:乙醇浓度47.33%、提取温度58.42℃、提取时间12.01 min、液料比(mL∶g)45.56∶1,在此条件下枇杷花总黄酮一次浸提的提取得率可达10.48%。

关键词: 枇杷花 总黄酮 超声波提取 响应面分析

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草莓9–顺式–环氧类胡萝卜素双加氧酶基因FaNCED的克隆及表达分析

园艺学报 2012 北大核心 CSCD

摘要:采用RT-PCR和RACE技术从草莓果实中克隆ABA合成途径中关键基因FaNCED,该cDNA全长2228bp,具有完整的开放阅读框(ORF),共1827个碱基,编码609个氨基酸。序列分析表明,FaNCED编码的氨基酸序列与其他植物的NCED蛋白有很高的同源性。系统进化树分析显示,草莓NCED与同为蔷薇科的湖北海棠聚为一类,与橙、柠檬、温州蜜柚、葡萄等非跃变型果实NCED蛋白亲缘关系较近。实时荧光定量PCR分析发现,FaNCED基因在草莓根、茎、叶、花萼和果实中都有表达;在果实成熟过程中FaNCED的表达出现两次高峰,分别在大白果期和红果期,且在红果期表达量最高,并与ABA积累相吻合;FaNCED在果实采后1d表达略有下降,之后急剧上升,ABA含量变化与FaNCED基因的表达基本一致。FaNCED可能参与调控ABA的合成并在草莓成熟中起一定作用。

关键词: 草莓 9–顺式–环氧类胡萝卜素双加氧酶 NCED 脱落酸 ABA 基因 表达

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副猪嗜血杆菌肽聚糖相关脂蛋白(PalA)的序列分析及三维结构建模

畜牧兽医学报 2012 北大核心 CSCD

摘要:为深入研究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,Hps)肽聚糖相关脂蛋白(Peptidoglycan-associated lipo-protein,palA)的生物学特性,设计了一对特异性引物,应用PCR方法来扩增Hps palA的全基因序列,进行克隆和测序。采用生物信息学方法,对Hps的palA基因核苷酸及其编码氨基酸序列进行比对,选取其中的血清学5型分离株,对其PalA蛋白的分子结构、理化性质及结构功能域、蛋白质二级结构等重要参数进行了预测和分析,并对PalA蛋白的三级结构进行了同源建模。结果显示,PCR扩增出462bp的目的片段;测序结果显示出不同血清型Hps之间palA基因核苷酸序列相似性有一定的差异,而所对应的氨基酸序列却差异很小;密码子偏爱性分析表明palA基因主要偏好GCA和AAA;PalA蛋白的理论等电点为6.28,偏弱酸性;PalA蛋白的二级结构以α螺旋、不规则卷曲和延伸链为主要构件;Hps的PalA蛋白的氨基酸序列与流感嗜血杆菌Pal蛋白的相似性为71.97%,以Pal蛋白结构为模板成功构建了Hps的PalA蛋白三维结构分子模型,该PalA蛋白三维结构与Pal蛋白相似,也含有肽聚糖结合口袋区,主要由第80位的酪氨酸(Tyr)、第39位的苯丙氨酸(Phe)和第84位的亮氨酸(Leu)组成。Hps的PalA蛋白的成功建模为PalA蛋白功能的深入研究提供了参考依据。

关键词: 副猪嗜血杆菌 肽聚糖相关脂蛋白 序列分析 同源建模

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猪流行性腹泻病毒SYBRⅠ实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

中国兽医科学 2012 北大核心 CSCD

摘要:参考GenBank上登录的猪流行性腹泻病毒(PEDV)株的ORF3基因序列保守型片段设计特异性引物,建立了检测PEDV的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法。在4.32×102~4.22×107copies范围内,它有很好的线性关系,其扩增相关系数为0.999,扩增效率为99%,扩增产物的熔解曲线只出现1个特异峰,无引物二聚体,熔解温度为82.23℃±0.19℃。它对传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪细小病毒、猪流感病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪瘟病毒均检测不到荧光信号,表明其特异性强。该方法的组内变异系数为0.05%~0.87%,组间变异系数为0.32%~1.24%,重复性好。结果表明,建立的SYBRⅠ实时荧光定量RT-PCR为PEDV早期感染的诊断及定量分析提供了新的方法。

关键词: 猪流行性腹泻病毒 SYBR GreenⅠ 荧光定量RT-PCR

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闽产李果实氨基酸组成及其营养分析

热带亚热带植物学报 2012 北大核心 CSCD

摘要:为了弄清闽产李(Prunus salicina)果实的氨基酸含量、组成及营养价值,采用氨基酸自动分析仪对李果实的各种氨基酸含量进行了检测和比较分析。结果表明,李果实含有18种蛋白质氨基酸和3种非蛋白质氨基酸。‘田黄’李的牛磺酸含量与蛋白质氨基酸含量均最高,分别为26.54 mg(100 g)-1和496.14 mg(100 g)-1‘;皇后’李的鸟氨酸、药用氨基酸、酸味氨基酸含量以及特殊功效蛋白质氨基酸的比例均最高,分别为0.36 mg(100 g)-1、364.67 mg(100 g)-1、298.28 mg(100 g)-1和73.45%;早熟‘胭脂’李的γ-氨基丁酸含量最高,为7.98 mg(100 g)-1‘;大胭脂’李的支链氨基酸含量最高,为46.77 mg(100 g)-1。李果实中的氨基酸种类齐全,含量存在一定的差异,具有很大的开发利用价值。

关键词: 蛋白质氨基酸 非蛋白质氨基酸

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蔬菜氮磷钾三元肥效模型的MonteCarlo建模法

土壤通报 2012 北大核心 CSCD

摘要:应用"3414"设计的田间肥料试验结果,探讨蔬菜氮磷钾三元肥效模型的Monte Carlo建模法。莴苣试验结果表明,采用最小二乘法回归建模,NP、NK二元肥效模型属于非典型式,PK二元和NPK三元肥效模型属于典型式;而改用MonteCarlo建模法,NP、NK和PK二元肥效模型以及NPK三元肥效模型均属于典型式。采用最小二乘法回归建模,不同蔬菜作物建立的34个三元肥效模型的典型式出现机率为41.2%,而Monte Carlo建模法的典型式出现机率为91.2%,提高了2.2倍。Monte Carlo建模法是适当放弃数学上偏差平方和最小的最优性,使待估参数达到专业上最优而数学上较优,从而提高典型肥效模型的出现机率。对莴苣氮钾非典型肥效模型的推荐施肥表明,Monte Carlo法的结果明显优于产量频率分析法。因此,Monte Carlo建模法为建立蔬菜多元肥效模型和推荐施肥提供了一种有效方法。

关键词: 蔬菜 氮磷钾 肥效模型 建模 MonteCarlo法 推荐施肥

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鸭黄病毒的分离鉴定

动物医学进展 2012 北大核心 CSCD

摘要:从临床表现为产蛋下降、头颈歪斜、软脚为主要特征的发病蛋鸭卵巢、脑浆、肝、脾等组织中分离到1株病毒。分离毒能致死番鸭胚和鸡胚,人工感染产蛋期的蛋鸭能导致体温升高、产蛋急速下降,卵泡出血和萎缩;分离毒不能凝集鸡和鸽红细胞,能被鸡黄病毒高免血清特异中和;用禽黄病毒特异引物扩增为阳性。上述结果证实分离毒是黄病毒科黄病毒属的鸭黄病毒,是导致蛋鸭产蛋下降的病原。

关键词: 蛋鸭 产蛋下降 鸭黄病毒 分离与鉴定

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清香型乌龙茶品质形成中游离氨基酸指纹图谱变化规律

农业工程学报 2012 EI 北大核心 CSCD

摘要:为探明游离氨基酸在茶树新梢生育过程的代谢变化及清香型乌龙茶制作工艺对其指纹图谱化学模式的影响,分别以铁观音、黄棪、金观音和黄观音品种春茶新梢为供试材料,对其新梢生育及乌龙茶制作过程中的游离氨基酸进行高效液相色谱-AQC(6-氨基喹啉基-N-羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯)柱前衍生化检测分析。结果表明,18种已标定游离氨基酸指纹峰面积经标准化(尤其是自然对数变换)数据预处理后,再进行相似度分析(夹角余弦)、聚类分析法(欧氏距离-近邻法)和主成分分析,均可获得较为一致的可视化模式识别结果。4个茶树品种可划分为铁观音和黄棪、金观音和黄观音2个类群,不同生育期芽叶与清香型乌龙茶在制品可进行较好区分。茶氨酸、甘氨酸、谷氨酸等8种主要游离氨基酸在茶树新梢生育过程中发生较为明显的增减变化,且在中、小开面2~4叶中的含量相对较低;在清香型乌龙茶制作过程中,各主要游离氨基酸含量发生小幅变化,毛茶成品中略有增加。由此可见,游离氨基酸在茶树新梢生育过程中含量及组成的动态变化较清香型乌龙茶制作工艺的影响更为明显。该研究结果可为清香型乌龙茶鲜叶原料选取和品质工艺控制提供参考。

关键词: 氨基酸 模式识别 主成分分析 乌龙茶 指纹图谱

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