科研产出
产蛋循环过程中TRPV6、CaBP-D_(28K)和PMCA 1b在蛋壳腺的动态表达
《中国兽医学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：将40羽220日龄ISA蛋鸡分为5组,于产蛋后0、2、4.5、8、16h断头处死,采集蛋壳腺组织,运用Real-time PCR和Western-blot方法检测产蛋循环过程中瞬时性受体单位香草精受体6(Transient receptor potential vanilloid receptor 6,TRPV6)、钙结合蛋白(calbindin D28K,CaBP-D28K)、质膜钙离子ATP酶1b(plasma membrane Ca2+-ATPase 1b,PMCA 1b)mRNA和蛋白浓度的动态变化。结果显示,卵子未进入蛋壳腺前(产蛋后0~4.5h),蛋壳腺内TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1bmRNA表达水平较低,随后表达量逐渐升高,在蛋壳钙化过程中达到最大值(产蛋后16h),与0h相比,TRPV6和CaBP-D28KmRNA表达差异均极显著(P<0.01);另外,产蛋循环过程中,TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1b蛋白浓度变化与mRNA变化一致,产蛋后16h到达最大值,其中CaBP-D28K蛋白浓度与0h相比,差异显著(P<0.05)。结果表明,产蛋循环可调控蛋壳腺内TRPV6、CaBP-D28K和PMCA 1b的表达,并提示钙离子跨细胞转运途径在钙离子进入蛋壳腺形成蛋壳过程中发挥重要作用。
关键词： 蛋壳腺 TRPV6 CaBP-D28K PMCA 1b 产蛋循环
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瓜类黄化褪绿病毒上海分离物外壳蛋白的原核表达及其抗血清的制备
《中国农学通报 》 2014 CSCD
摘要：利用RT-PCR技术扩增得到瓜类黄化褪绿病毒(cucurbit chlorotic yellows virus,CCYV)上海市嘉定分离物的外壳蛋白(coat protein,cp)。序列分析结果表明,cp基因的核苷酸序列长度为753 bp,编码250个氨基酸,与已报道的CCYV其他分离物的cp核苷酸相似性均高于95%。将此基因克隆到原核表达载体pET32a(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)后IPTG进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blotting分析表明,CCYV cp在大肠杆菌中可表达出含有6-His标签的分子量约46 kDa的蛋白。纯化表达蛋白后免疫家兔制备抗血清,间接酶联免疫吸附测定(ID-ELISA)结果显示,制备的抗血清可用于检测田间感病样品中的CCYV。
关键词： CCYV 外壳蛋白 原核表达 间接酶联免疫吸附测定
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根际温度对黄瓜幼苗生长及生理生化指标的影响
《西北植物学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：采用营养液栽培法,以‘春秋王2号’黄瓜为实验材料,研究了4个根际温度梯度处理(20℃、25℃、30℃、35℃)对其幼苗生长,地上部、地下部生理生化指标的影响,探讨根际温度对黄瓜幼苗生长的影响机理。结果显示:(1)黄瓜幼苗的株高、茎粗、叶面积和地上地下生物量在25℃处理下都明显大于其他3个处理,而在35℃处理下均显著降低。(2)20℃、25℃处理下,黄瓜幼苗叶片的净光合速率(Pn)均较大,此时其叶片与根系中的淀粉、蔗糖、总糖含量较高且明显高于30℃处理,35℃根际温度处理下叶片Pn严重下降。(3)根际30℃、35℃高温使得黄瓜幼苗叶片和根系中的POD活性升高,CAT活性降低;而叶片中SOD、APX活性均随根际温度的升高而增大,根系中则表现出了逐渐下降趋势。(4)叶片和根系的电解质渗漏率、丙二醛(MDA)含量在25℃下最低,而在35℃处理下最高;叶片中脯氨酸及可溶性蛋白含量在35℃处理下最高,但此时根系中含量显示最低。研究表明,4个根际温度中,25℃最适合黄瓜幼苗的生长,35℃高温直接作用部位(根系)的2种主要渗透调节物质脯氨酸及可溶性蛋白含量下降,此时叶片和根系中抗氧化酶活性的变化使得细胞膜受到了明显的过氧化伤害,根系受伤害程度加重,从而抑制了植株整体的生长。
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日粮添加碳酸氢钠对蛋鸡肠道菌群多样性的影响
《中国兽医学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：900羽21周龄海兰褐蛋鸡随机分成5组,每组6个重复,每个重复30羽。分别在基础日粮中添加0、0.1%、0.5%、2.5%、5%NaHCO3,持续10周。结果显示,与对照组相比,0.1%组蛋鸡盲肠乳酸菌数量增加,大肠杆菌数量降低,菌群多样性指数提高(P>0.05)。0.5%组蛋鸡粪便pH值显著提高(P<0.05),乳酸菌数量增加,菌群多样性指数提高(P>0.05)。2.5%、5%组蛋鸡粪便pH值、水分含量极显著高于其他组(P<0.01)。同时,2.5%、5%组盲肠乳酸杆菌数量降低(P>0.05或P<0.05),大肠杆菌数量增高(P>0.05或P<0.05),5%组菌群多样性指数亦显著降低前3组(P<0.05)。结果表明,日粮添加NaHCO3超过2.5%,蛋鸡腹泻严重,肠道菌群平衡严重破坏。而当NaHCO3的添加量低于0.5%时,肠道有益菌数量和菌群多样性指数呈增加趋势,蛋鸡生产性能维持正常。因此,本试验提示蛋鸡生产中饲料添加剂NaHCO3最高耐受量为0.5%。
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厚皮甜瓜嫁接苗亲和性及保护酶活性变化研究
《上海农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：以南瓜品种‘壮士'为砧木,嫁接‘85-1'和‘B717'2个甜瓜品种,在设施栽培条件下研究不同嫁接苗亲和性及保护酶活性变化。结果表明:南瓜砧木‘壮士'与‘85-1'的嫁接成活率高达96.7%,坐果率95.0%,生长势较强,亲和力较好;嫁接后各植株保护酶活性明显提高,嫁接15 d、30 d和45 d后,嫁接植株保护酶SOD活性呈现先降低后增高的趋势,POD则正好相反,且均与自根苗差异显著;CAT活性无明显变化。研究结果表明:利用‘壮士'南瓜作砧木,对‘85-1'嫁接效果较好。
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大肠埃希菌不耐热肠毒素双突变体的表达及活性研究
《西北农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：为了使大肠埃希菌不耐热肠毒素(LT)的毒性丧失或减弱的同时仍保留其较强的免疫原性,通过PCR和重叠—延伸PCR扩增突变体LTK63/G192基因片段,IPTG诱导表达目的蛋白,经Western免疫印迹检测目的蛋白,在HPLC系统上纯化目的蛋白,经ADP-核酸转移酶试验及Patent-mouse毒性试验检测其酶活性与毒性,纯化的目的蛋白与鸡新城疫病毒弱毒疫苗联合一起经滴鼻免疫鸡。结果表明:制备的突变体LTK63/G192的基因片段经酶切和测序发现,所构建的表达载体pLTK63/G192阅读框架正确,且相应位点氨基酸获得了替换;经SDS-PAGE电泳检测,野生型LT及双突变体均表达出约33.0ku和13.0ku的两条蛋白带,与LTA、LTB亚基分子质量相吻合;经Western bolt检测,两个蛋白亚基均可与His抗体发生特异性反应;双突变蛋白的酶活性和毒性与野生型LT相比酶活性和毒性都有所降低;突变体LTK63/G192能辅助新城疫疫苗在血清和黏膜中产生较高抗新城疫病毒的IgG和IgA。说明LTK63/G192是一个良好的免疫佐剂。
关键词： 大肠埃希菌不耐热肠毒素 免疫原性 ADP-核酸转移酶
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甜瓜N、P、K配方施肥数学模型构建的研究
《中国农学通报 》 2014 CSCD
摘要：为了探讨氮磷钾肥料配施对甜瓜主要经济性状的影响,采用3因素5水平2次正交旋转组合设计,研究N、P、K配施对甜瓜产量的影响,构建肥料配施的数学模型,并对最优施肥量、单因子效应及互作效应进行分析。结果表明:N与P、N与K、P与K之间存在明显的互作效应,且适宜的施肥配比可以提高甜瓜的产量;当N、P、K配比为2.03:1:3.36,即氮(N)、磷(P2O5)、钾(K2O)用量分别为157.5、77.4、260.38 kg/hm2时,甜瓜的最高产量可达51893.205 kg/hm2。
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灵芝基因组SSR位点分布与分析
《上海农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：旨在通过对灵芝基因组SSR位点的统计分析,为担子菌基因组的特征描述、遗传分析及分子标记的筛选提供基础信息。基于数据库中灵芝基因组数据,通过SSR Hunter 1.3软件并结合人工查找的方式分析其SSR数量、组成和位点分布等情况。结果表明:灵芝基因组序列总长度为4.19×107bp,13条染色体共存在3 502个SSR位点,SSR碱基总长度为6.92×104bp,占基因组总数的0.17%,平均每隔11.96 kb存在1个SSR位点,三碱基和六碱基SSR所占比例最大,占基因组内SSR位点总数的74.62%,出现较多的基序为(G)n、(C)n、(GA)n、(CT)n、(GAC)n、(TCG)n、(TAATC)n和(GATGAG)n;三核苷酸、五核苷酸和六核苷酸SSR在染色体水平上分布较均匀,而单核苷酸、二核苷酸和四核苷酸SSR分布差异较大。灵芝基因组内SSR分布呈现一定的规律性,基于基因组数据发掘的SSR位点能够为SSR分子标记的开发提供信息,并有助于灵芝高密度遗传图谱的构建、重要功能基因克隆及基因功能的研究等。
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