卷口鱼耗氧规律的研究

谢 刚; 许淑英; 祁宝崙; 叶 星; 《大连水产学院学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：卷口鱼(Ptychidio jordani)的耗氧量随着体重的增长而增加,关系式为 Y=0.3539X0.5645。耗氧率却随着体重的增长而减少,关系式为 Y=0．3519X-0．4340。水温和水流量对耗氧率都有影响。在一定水温范围内,耗氧率随着水温的上升而增加,关系式为Y=0．0038X1．2711,水温24~30℃时耗氧率变幅较小,24℃以下、30℃以上时耗氧率变幅较大。在一定的水流量范围内,耗氧率随着流量的增大而增加,关系式为 Y=0．0012X0．5086。卷口鱼的呼吸耗氧率存在较明显的昼夜变化,耗氧高峰出现在每日10:00~13:00和20:00~23:00,白天的耗氧率均大于晚上。

关键词： 卷口鱼 耗氧量 耗氧率

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南方鲇生长激素完整cDNA的克隆及其DNA序列分析

宋平; 向筑; 潘云峰; 胡隐昌; 胡珈瑞; 《水生生物学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：采用RT-PCR法和3'、5'RACE(Rapid amplification of cDNA ends)法从南方鲇脑垂体RNA克隆出生长激素(Growth hormone,GH)cDNA。此cDNA全长1087nt(含 Poly(A)》,其5'端非编码区长52nt、阅读框(Open reading frame,ORF)长603nt、3'端非编码区长415nt。其推导的GH由200个氨基酸组成,其中前24个氨基酸为信号肽部分。氨基酸序列比较表明,南方鲇GH与Pangasianodongigas、Ictaluruspunctatus和Heteropneustes fossilis三种鲇类的同源性分别为97.5%和95.0%,与鲢、鳙、草、鲤和鲫鱼的GH同源性达76.0%以上,而与人的GH(Ⅰ、Ⅱ)同源性最低为31.0%和29.5%.

关键词： 生长激素 cDNA RT-PCR 南方鲇

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鲢生长激素cDNA表达载体构建及在大肠杆菌中的表达

陈松林; M.Schartl; 《水产学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：应用RT—PCR技术从白鲢垂体mRNA中扩增出GH全长cDNA片段 ,长度 1.2kb。将 1.2kb白鲢GHcDNA克隆到载体质粒pBluescriptKSII +(pBSKSII +)中 ,构建了pBS -scGHcDNA克隆 ;通过含有NdeI酶切位点的特异引物扩增出不含信号肽序列的cDNA片段 ,将其重组到pRSET5b载体质粒中 ,构建了白鲢GHcDNA表达质粒pRSET -scGH。将此表达质粒转化BL2 1(DE3)大肠杆菌 ,经IPTG诱导后 ,在转化的大肠杆菌中检测到GH蛋白的存在。Western印迹表明该蛋白带与草鱼GH单克隆抗体具有强烈的免疫反应。

关键词： 鲢 生长激素cDNA 表达载体 大肠杆菌

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青鳉p53基因克隆、结构分析及同源重组载体构建

陈松林; HONG Yun-Han; Manfred SCHARTL; 《动物学报 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：应用“Long PCR”技术 ,用 6对 p5 3引物从青胚胎干细胞基因组DNA中扩增出 6个相互重叠的片段 ,其中最大的片段长达 4 5kb ,这 6个PCR片段覆盖了整个 p5 3基因。序列分析表明青p5 3基因长约 8 7kb ,由 11个外显子和 10个内含子组成。结构比较表明 ,青 p5 3基因在大小上与人和小鼠 p5 3基因存在较大差异。青p5 3基因的内含子 1仅为 0 85kb ,而人和小鼠p5 3基因的内含子 1则分别长达 10kb和 6kb ;青 p5 3基因的外显子 3(86bp)明显大于人和小鼠 p5 3基因的外显子 3(2 2bp) ;外显子 4 (170bp)比人 (2 80bp)和小鼠 (2 6 0bp)的外显子 4小 ;内含子 10 (3 5kb)则比人和小鼠内含子 10 (0 7kb和 0 9kb)大得多。用SVTK neo基因作正选择标记基因 ,用SVTK tk基因作负选择标记基因 ,用青 p5 3基因组片段作同源序列 ,构建了鱼类 p5 3基因同源重组载体。将此载体转染青胚胎干细胞 ,并经G4 18和Ganc药物选择后证明上述正、负选择标记基因在干细胞中能够有效表达 ,并提供对G4 18的抗性和对Ganc的敏感性。

关键词： 青鳉 p53基因 结构 同源重组载体 胚胎干细胞

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用显微注射技术导入外源DNA对鲤鱼和虹鳟鱼受精卵孵化率的影响

闫学春; 孙效文; 梁利群; 曹鼎臣; 《水产学杂志 》 2002

摘要：本文报道了利用显微注射技术导入外源基因分别对鲤鱼和虹鳟鱼授精卵孵化率影响的研究。从 1993年— 1996年 4年中 ,我们用显微注射方法 ,将全鱼生长激素基因导入虹鳟鱼授精卵 (包括囊胚期卵 ) 5 ,6 76粒 ,孵出鱼苗 36 4尾 ,孵化率为 6 .4 % (4年平均 ,虹鳟鱼正常孵化率为 80 % ) ;而用这种方法 ,将全鱼生长激素基因导入鲤鱼授精卵 12 ,196粒 ,孵出鱼苗 4 ,2 90 ,孵化率为 34.0 % (4年平均 ,鲤鱼正常孵化率为 70 %左右 )。实验结果 :显微注射技术在虹鳟鱼和鲤鱼两种受精卵上的效果明显不同 ,斑点杂交和SouthernBlot杂交结果相近

关键词： 显微注射 转基因鱼 孵化率

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蓄水塘养殖斑点叉尾Hui成鱼试验

刘志刚; 张春; 《淡水渔业 》 2002 北大核心

关键词： 蓄水塘 斑点叉尾Hui 成鱼养殖

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生物技术在水产养殖中的应用

夏德全; 《科学养鱼 》 2002

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1种可用于检测WSSV蛋白酶的微量酶活测定技术

刘庆慧; 黄倢; 宋晓玲; 刘莉; 《中国水产科学 》 2002 北大核心 CSCD

摘要：以酪蛋白为底物 ,对常规蛋白酶检测方法进行改进并与偶氮酪蛋白法进行比较 ,建立适应病毒微量蛋白酶的快速检测方法。结果表明 ,改进的微量蛋白酶检测方法具有微量、快速、灵敏度高的特点 ,适于病毒微量蛋白酶的检测。蛋白酶的最低检出量可达ng级。

关键词： WSSV 微量测定 蛋白酶

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剑尾鱼线粒体细胞色素b基因的序列分析

叶星; 白俊杰; 劳海华; 简清; 吴淑勤; 《中国实验动物学报 》 2002

摘要：目的　克隆和测定剑尾鱼 (Xiphophorushelleri)线粒体细胞色素b基因 (cytb)的全序列。方法　提取剑尾鱼肝脏的总DNA。设计合成特异引物进行PCR扩增。扩增产物经琼脂糖电泳检测、纯化后克隆到pGEM Teasyvectorsystem中的T载体上 ,筛选转化子 ,提取质粒 ,酶切鉴定。挑取重组质粒pGEM T xhcytb 11进行序列测定。结果　获得了剑尾鱼线粒体cytb基因的全序列 ,共 114 0bp。结论　用BLAST与GenBank中的线粒体DNA序列进行比较 ,显示剑尾鱼与其他鱼类的cytb基因具有较高的同源性 ;根据剑尾鱼与其他 13种鱼的cytb基因序列同源性所建立的进化树 ,与传统的分类地位基本吻合

关键词： 剑尾鱼 线粒体 细胞色素b 基因

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成鳖池套养黄颡鱼试验

刘志刚; 张春; 叶雄平; 程宝林; 《淡水渔业 》 2002 北大核心

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