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鸡胚血液原始生殖细胞的分离纯化及鉴定

农业生物技术学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:家禽的原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)是形成精子和卵子的前体细胞,可在性成熟的家禽体内生成精子和卵子,因此家禽PGCs可应用于以PGCs为基础的现代保种技术、转基因技术以及家禽的发育生物学等研究领域,具有重要的科研与应用价值。本研究使用Nycodenz密度梯度离心法在孵化至13~15期的鸡(Gallus gallus)胚血液中分离纯化鸡胚的PGCs,经显微注射针分拣后,PGCs的纯度可达99%以上,细胞直径主要集中于13~15μm;将所分离纯化的PGCs分别通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)染色、高碘酸希夫氏(periodic acid-schiff,PAS)染色及阶段特异性胚胎表面抗原-1(stagespecific embryonic antigens-1,SSEA-1)免疫化学染色进行鉴定,染色结果均出现PGCs所特有的反应;使用活细胞荧光染料PKH26对分离纯化的PGCs进行标记,成功标记的PGCs在荧光显微镜下可观测到红色荧光,将约200个标记后的PGCs,通过腹主动脉注入孵化至14~16期的受体鸡胚中,在孵化至第8天的鸡胚性腺冷冻切片中,可检测到供体PGCs的存在,这一结果表明,所分离纯化的PGCs可定植于受体鸡胚的性腺中。本研究为以PGCs为基础的种质资源保存研究以及转基因技术研究提供了基础资料。

关键词: 原始生殖细胞 分离纯化 密度梯度离心 性腺嵌合体

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猪胰高血糖素样肽-2对结肠炎小鼠肠道损伤的保护作用研究

畜牧兽医学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:猪胰高血糖素样肽-2(porcine glucagon-like peptide-2,pGLP-2)能够特异性地促进肠黏膜生长与损伤后修复,本试验研究了葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)致小鼠结肠炎模型下pGLP-2对肠道损伤的修复效果,为其治疗各种因素引起的仔猪肠道损伤和功能紊乱提供了试验依据。18只BALB/c小鼠随机分为3组,DSS组小鼠饮用3%DSS建立小鼠结肠炎模型,DSS+pGLP-2组饮用3%DSS且连续7d腹膜外注射pGLP-2,饮水组小鼠正常饮水。试验期10d。结果表明,与饮水组相比,DSS组小鼠体重、结肠紧密连接闭锁小带(zonula occludens-1,ZO-1)基因的相对表达量显著降低,注射pGLP-2能够显著抑制体重降低和增加ZO-1的表达量;与饮水组相比,DSS组显著增加了结肠炎性评分、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)和干扰素-γ(interferon-γ,INF-γ)的相对表达量,注射pGLP-2极显著降低了结肠炎性评分、MPO活性和IL-6、IL-10和IFN-γ的表达量。结果提示,pGLP-2可抑制结肠炎小鼠的炎性病变,为其治疗肠道疾病提供了试验依据。

关键词: pGLP-2 DSS 结肠炎 小鼠

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抗流胶病中熟桃新品种‘东溪小仙’

园艺学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:‘东溪小仙’是从自然实生后代中选育出的抗流胶病中熟水蜜桃新品种。果实扁圆,果顶凹陷;平均单果质量155.0 g,最大果210.0 g;果皮底色白,完熟后果面呈红色或深红色,易剥皮;果肉红色素中等,软溶质,粘核;浓甜多汁,香气浓郁,可溶性固形物13.5%~15.2%。自花结实,果实发育期约120 d,抗逆性强,丰产。流胶病发病率和病情指数低,分别为‘湖景蜜露’桃的19.6%和17.8%。

关键词: 抗流胶病 品种

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新型番鸭呼肠孤病毒σC蛋白的原核表达及其抗原特性

浙江农业学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:新型番鸭呼肠孤病毒是近年来新发现的一种引起鸭严重疾病的病原,该病毒与经典MDRV主要在病毒宿主范围、体外培养特性、临床致病性和免疫保护特性上存在显著的差异。通过RT-PCR扩增新型呼肠孤病毒σC基因,经NcoⅠ和XhoⅠ双酶切处理,插入到p ET-28a(+)原核表达载体,获得重组质粒p ET-28a(+)-σC。将重组阳性质粒转化至BL21(DE3)感受态细胞,诱导表达后经SDS-PAGE电泳对σC蛋白进行初步分析,蛋白分子量约为36 k Da。重组蛋白经纯化后免疫实验兔,获得抗σC蛋白的高效免疫血清。通过Western Blot与间接免疫荧光实验初步表明,新型鸭呼肠孤病毒σC蛋白具有良好的反应活性。

关键词: 新型呼肠孤病毒 σC基因 原核表达 兔抗血清

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小菜蛾系统调查及抗药性监测方法

应用昆虫学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:小菜蛾Plutella xylostella(L.)是十字花科作物重要害虫。其种群消长受地理条件、气候变化和耕作方式等多种因素的影响。小菜蛾也是抗药性最强的害虫,几乎对所有杀虫剂产生了抗药性。针对小菜蛾的生活习性和抗药性,统一规范了田间种群系统调查和抗药性监测方法,为其种群动态及抗药性监测提供技术支撑。

关键词: 小菜蛾 抗药性 调查 监测

设施农业环境智能监控管理平台设计与实现

浙江农业学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:为了提高设施农业生产管理的精细化、自动化、智能化水平,在设施环境监控硬件架构设计与开发的基础上,融合作物模型与农业专家知识,采用模块化设计与B/S(Browser/Server)架构,研制了设施农业环境智能监控管理平台,该平台实现了大棚内温、光、水、肥等环境数据和现场视频图像信息的远程实时监测、智能处理、预测预警、远程调控、辅助管理等功能。实例应用表明,现场传感器及执行设备选择自由、安装方便,传输数据稳定,设备执行可靠,业务平台统一,系统操作简单,可满足高中低不同类型农业设施环境智能监控管理的需求,具有良好的应用前景。

关键词: 设施农业 环境 物联网 智能监控 管理平台

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真空冷冻和热风干燥对蓝莓品质的影响

食品科学 2014 北大核心 CSCD

摘要:研究真空冷冻干燥和热风干燥处理对蓝莓品质的影响。采用电阻法测定蓝莓的共晶点和共熔点,并绘制了蓝莓冻干曲线;从干燥后蓝莓的微观结构、复水比、色泽、质构、VC、总花色苷和总酚等指标比较真空冷冻和热风干燥蓝莓产品的品质。结果表明:蓝莓的共晶点为-33℃,共熔点为-30℃;真空冷冻干燥蓝莓复水性好,且果实中VC、总花色苷和总酚的含量分别为5.52 mg/100 g、1.55 mg/g和3.55 mg/g,显著高于热风干燥的产品。因此,真空冷冻干燥在保持蓝莓复水性、感官品质和活性成分等方面比热风干燥具有明显优势。

关键词: 蓝莓 真空冷冻干燥 冻干曲线 共晶点 共熔点

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转Bt基因及其亲本水稻上褐飞虱对三唑磷和溴氰菊酯的反应

应用生态学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:以转Bt基因抗虫水稻T1C-19(含cry1C基因)和T2A-1(含cry2A基因)及其亲本水稻MH63为材料,用20和40 mg·L-1的三唑磷以及1、3和6 mg·L-1的溴氰菊酯喷雾分别处理稻株上的3龄褐飞虱若虫,研究了两种农药对转Bt基因抗虫水稻上褐飞虱再猖獗的影响.结果表明:三唑磷处理对褐飞虱的若虫历期无显著性影响,溴氰菊酯则能显著降低若虫历期,但随着两种药剂处理浓度的升高,若虫的存活率降低、成虫的产卵量增加.在同一浓度农药药剂处理下,3个水稻品种上的褐飞虱若虫发育历期、若虫存活率、初羽雌成虫体质量、产卵量和卵孵化率等生态学参数均没有显著差异.表明褐飞虱在两种转Bt水稻上对三唑磷和溴氰菊酯诱导再猖獗的反应能力与其亲本水稻MH63没有差异.

关键词: 转Bt水稻 褐飞虱 三唑磷 溴氰菊酯 再猖獗

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不同土壤改良措施对冷浸田温室气体排放的影响

农业环境科学学报 2014 北大核心 CSCD

摘要:以临安山区典型的冷浸田为试验对象,通过开展田间水稻种植试验,探究生石灰、水稻秸秆和竹质生物炭对冷浸田温室气体(GHG)排放、作物产量和土壤理化性质的影响,旨在为改良冷浸田,实现水稻高产的同时,通过相关措施为实现稻田温室气体减排提供理论依据和技术支撑。结果表明,不同土壤改良处理对水稻产量和土壤肥力都有所提高,其中秸秆还田处理增产效果最显著,产量高达7 728.25 kg·hm-2,而施用生物炭对土壤中全氮、有效磷和速效钾含量的提高效果最明显,增幅分别为15.1%、49.0%和22.1%。与常规施肥处理相比,生石灰处理CH4累积排放量提高了21.9%,而生物炭处理CH4累积排放量降低了33.3%。试验各处理氧化亚氮排放通量和累积排放量都较低,其原因可能是各处理稻田土壤一直处于冷水浸润状态,施用生石灰提高了冷浸田土温,激发了微生物的活动,从而导致CH4大量排放,而施用生物炭改善了稻田土壤通气状况,增强甲烷氧化菌活性,进而导致CH4排放量降低。

关键词: 冷浸田 生物炭 温室气体 排放量

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一个抗病性增强的水稻类病变突变体的蛋白质组学研究

中国水稻科学 2014 北大核心 CSCD

摘要:水稻类病变突变体chl1具有抗病性增强的类病变表型,对水稻白叶枯病和稻瘟病都具有很强的抗性。利用蛋白质组学技术分析chl1与其野生型之间的差异表达蛋白,探讨chl1类病变表型的形成和抗病反应的分子机制。利用荧光双向差异凝胶电泳(two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis,2D-DIGE)技术和质谱分析,chl1中共鉴定到70个差异表达的蛋白点,包括46个上调蛋白点和24个下调蛋白点。这些蛋白点参与不同的生物过程,包括防御相关、光合作用、氧化还原、氨基酸/蛋白质代谢、分子伴侣、碳水化合物代谢。对这些差异表达蛋白进行生物信息分析,推测它们所在的复杂调控网络可能参与chl1叶片细胞程序性死亡(programmed cell death,PCD)及其抗病性的调控。

关键词: 水稻 类病变突变体 细胞程序性死亡 抗病性 荧光双向差异凝胶电脉

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