科研产出
柴胡新品种'郑柴胡3号'
《园艺学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：‘郑柴胡3号’是从河南登封农家种的变异群体经过通过系统选育的柴胡新品种。主根明显,圆锥形,上端膨大,表面浅黄色,断面黄白色,具菊花心,皮部和木部易分离;茎表面粗糙有细纵槽纹棱,半中空;叶披针形,灰绿色;花期较早。田间表现良好,适合河南及相近生态区域种植。
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猪伪狂犬病病毒gE蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
《河南农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为了开发检测猪伪狂犬病病毒（PRV）的免疫诊断试剂，使用HEK293F细胞表达的gE重组蛋白免疫BALB/c小鼠。将免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞融合，应用酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）方法筛选阳性杂交瘤细胞株，以期获得对PRV反应性良好的抗gE重组蛋白单克隆抗体。结果显示，获得2株（2B5和8F7）稳定分泌抗PRV gE蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其腹水单克隆抗体的ELISA效价均为1∶1 000000；单克隆抗体亚型鉴定结果表明，2株单克隆抗体的重链均为IgG1亚型，轻链均为Kappa链。单克隆抗体特异性测定结果显示，2株单克隆抗体仅与PRV反应，不与其他常见病毒发生反应；SDS-PAGE结果显示，纯化后的单克隆抗体均在约50 ku和25 ku处有纯度较高的特异性条带；间接免疫荧光试验（IFA）结果表明，制备的2株单克隆抗体与转染gE质粒的293T细胞发生特异性反应。根据Western blot结果，筛选获得的2株单克隆抗体均在120 ku附近出现特异条带，表明这2株单克隆抗体均能特异性识别PRV。综上，成功制备了2株特异性强、效价高的抗gE蛋白单克隆抗体，为后期PRV诊断试剂盒的制备提供重要的生物材料。
关键词： 猪伪狂犬病病毒 gE蛋白 单克隆抗体 间接免疫荧光试验
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胶冻样芽孢杆菌对革兰氏阴性菌的抑菌活性及其抗菌次级代谢产物分析
《河南农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为筛选对革兰氏阴性菌抑菌活性较好的药用植物芍药的内生菌，采用表面消毒法和平板对峙法分离筛选对大肠杆菌和沙门氏菌有拮抗作用的芍药内生菌，对其进行形态学和分子生物学鉴定，并通过全基因组学分析探究其抗菌活性物质。结果表明，从芍药根、茎、叶等不同组织分离得到20株内生菌。采用平板对峙法抑菌试验，从20株内生菌中获得1株抗菌效果较好的革兰氏阴性内生菌HNYJ291，经形态学和分子方法鉴定为胶冻样芽孢杆菌（Paenibacillus kribbensis），该菌能有效抑制大肠杆菌和沙门氏菌。对该菌进行全基因组测序分析，HNYJ291的基因组大小为5 609 136 bp,G+C含量为45.48%，预测其编码基因个数为4 805个。分别有4 779、3 678、4 027、3 941、2 994、2 700个基因被NR、Swiss-Prot、Pfam、COG、GO、KEGG数据库注释，通过antiSMASH预测到与次级代谢产物合成相关的10个基因簇，主要次级代谢产物有环脂肽类抗生素（Fusaricidin B）、细菌素（Paenilan）、抗菌脂肽（Tridecaptin）、多黏菌素（Polymyxin）和抗菌肽（Paenicidin A）等。从其基因组中含有的抗菌活性物质相关基因簇可以预测出，该菌株具有开发新药和作为可饲用微生物的潜力。
关键词： 胶冻样芽孢杆菌 芍药 内生菌 沙门氏菌 大肠杆菌 抑菌效果 抗菌活性物质
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高粱LBD基因家族的鉴定及苗期干旱胁迫表达分析
《西南农业学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究LBD（Lateral organ boundaries domain）基因家族在调控高粱干旱胁迫中的作用，为高粱（Sorghum bicolor）耐旱分子育种提供依据。【方法】利用生物信息学的方法鉴定高粱基因组中的LBD基因家族，对其理化性质、染色体分布、系统进化、基因结构、保守基序、顺式调控元件以及组织表达模式进行分析。【结果】鉴定出32个LBD基因，不均匀地分布在除6号染色体外的9条染色体上；系统发育树分析将其分为Class I和Class II两组，均含有CX2CX6CX3C结构域，其中Class I有25个家族成员，含有相对完整的GAS和LX6LX3LX7L结构域，Class II有7个家族成员，甘氨酸组成的保守序列均为GRA,LX6LX3LX7L结构域不完整。同一组内的成员保守结构域蛋白序列一致性更高，基因结构和保守基序高度相似；系统进化分析发现高粱LBD蛋白与单子叶植物的同源性大于双子叶植物；顺式调控元件分析发现，SbLBD启动子序列中光响应元件G-box、脱落酸响应元件ABRE数量最多，其次是茉莉酸甲酯响应元件CGTCA-motif和厌氧诱导响应元件ARE,另外检测到低温响应元件LTR和干旱诱导元件MBS。表达分析发现，Class II中的7个成员和Class I中的SbLBD24在高粱各生育期和多数组织中表达量均较高。在模拟干旱处理下，高粱幼苗中SbLBD6下调表达，SbLBD26上调表达。【结论】不同组SbLBD基因保守序列存在差异。高粱LBD家族基因可响应低温、干旱、光强和光周期等多种逆境条件，且具有组织表达特异性。SbLBD6和SbLBD26可能在高粱干旱胁迫响应中具有重要作用。
关键词： 高粱 LBD基因家族 全基因组鉴定 干旱胁迫 表达分析
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马立克病病毒特超强变异株meq基因缺失株构建及作为疫苗候选株的鉴定
《病毒学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：马立克病（Marek’s disease, MD）是一种严重危害家禽健康养殖的免疫抑制病与肿瘤病，由致病性的血清1型MDV(Marek’s disease virus serotype 1, MDV-1)毒株感染引起。近年来，即使在已接种疫苗的鸡群中，MD病例的发生及危害在全球范围内仍呈不断上升趋势。此前研究发现，经典的MD疫苗已不能很好保护当前流行的MDV特超强毒株，尤其是新出现的特超强MDV(Hypervirulent MDV, HV-MDV)变异株，这意味着新一代高效的MD疫苗亟待研发。本研究中，以近期最新分离鉴定的HV-MDV变异株SDCW01为亲本毒株，首先将其在鸡胚成纤维细胞（Chicken embryo fibroblast, CEF）上连续传代以降低对宿主潜在的免疫抑制性，然后利用基于CRISPR/Cas9系统的基因编辑技术敲除致瘤基因meq，构建meq基因编辑缺失的疫苗候选毒株。经过PCR扩增鉴定、病毒克隆纯化、DNA测序、间接免疫荧光试验（IFA）、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及病毒体外增殖曲线测定等试验，证实获得一株meq基因完全缺失的MDV毒株，命名为SD01△meq。进一步传代培养及PCR鉴定结果显示，SD01△meq传代稳定性良好，meq基因的编辑缺失未发生回复突变，且不影响其它MDV基因的表达及体外复制能力。1日龄SPF鸡攻毒实验结果显示，与亲本毒株SDCW01相比，SD01△meq完全丧失了对宿主的免疫抑制和致病性，其诱导的MD发病率、致死率及肿瘤率均为0%。上述数据表明，本研究成功构建获得了一株meq基因编辑缺失疫苗候选毒株SD01△meq，为后续新型高效MD疫苗的研发奠定了重要基础。
关键词： 马立克病病毒 meq基因 CRISPR/Cas9 基因编辑 新型疫苗
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响应面法优化香菇片硬化保脆工艺
《食品与机械 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：[目的]抑制以鲜香菇为主要原料的产品在加工及贮藏过程中的质构劣变。[方法]以硬度为主要指标，通过单因素试验和响应面试验分析硬化保脆剂及其添加量对香菇片质构特性的影响。[结果]最佳的硬化保脆条件为氯化钙0.15%，海藻酸钠0.11%，葡萄糖酸-δ-内酯2.0%，复合溶液中浸渍时间为100 min；适宜的灭菌条件为105℃灭菌25 min。[结论]优化后的工艺条件可以显著改善香菇片的质构特性，37℃下贮藏45 d，其口感硬脆、菇味浓郁，色泽与鲜香菇接近，且符合国家卫生标准。
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猪流行性腹泻病毒基因组和诊断方法研究进展
《河南农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea,PED），是一种急性、高度接触性、高发病率和高致死率的猪肠道传染病，给全球养猪业造成了巨大的经济损失。深入了解PEDV的基因组结构和功能是研制高效安全疫苗的关键。通过解析PEDV的基因组结构、编码的蛋白质以及其与宿主细胞的相互作用，研究人员可以设计出更具针对性的疫苗候选物。诊断技术的进步对于PED的早期诊断及免疫后应答水平监测和评估至关重要。因此，综述了PEDV的基因组结构与功能（包括S、E、M、N、辅助蛋白和非结构蛋白）、血清学以及分子诊断方法[如酶联免疫吸附试验（ELISA）、聚合酶链式反应（PCR）、环介导等温扩增（LAMP）、病毒中和（VN）和间接免疫荧光测定（IFA）、免疫层析试验（ICA）、荧光微球免疫测定（FMIA）、序列测定和聚类规则间隔短回文重复序列（CRISPR）-CRISPR相关蛋白（Cas）]的最新进展，旨在为建立快速有效的PEDV检测方法提供思路，并为临床上有效防控PED提供参考。
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新时期我国主销区粮食安全的认识维度、矛盾诊断和破解路径
《广东农业科学 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为提升重大突发公共安全事件下主销区粮食安全保障能力，厘清产销区省域粮食生产能力与空间变迁情况，进一步提升新时期全国统一大市场背景下国家粮食安全治理能力和长效机制。利用ArcGIS技术结合统计分析方法，以全国粮食主产区、主销区、产销平衡区为研究对象，对新中国成立以来粮食产量和面积进行空间演化分析，并对2011—2023年主产区粮食调出率进行计算。结果发现，全国粮食净调出地更加集中于黑龙江、河南、山东、安徽四省，而作为传统粮食调出大省的四川、江苏、湖北、湖南粮食调出率却不断下降，甚至出现“销区化”倾向。我国粮食安全局面存在“区域非均衡加强”“产销错配”“粮饲错配”等结构性问题，产销跨省域运距过长及常态化成本较高，物流通道之间基本相互独立、互通性和连接性较差。鉴于此，提出应在大食物观下，进一步压实主销区保障一定自给率要求，重点提高主销区粮食生产和应急储备能力，建立粮食“产销”跨区域协作长效保障机制；提升主销区粮食主体内生积极性，规避“运动式”的生产方式。
关键词： 粮食安全 空间非均衡 粮食主销区 产需平衡 粮食流通 粮食储备
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429份玉米种质籽粒物理及品质性状综合评价
《干旱地区农业研究 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为科学评价不同玉米自交系的育种应用潜力，测定了429份玉米自交系的10个籽粒农艺性状表型值，并采用相关性分析、主成分分析、聚类分析和逐步回归分析构建不同玉米自交系综合评价模型，筛选优异种质材料。结果表明：10个农艺性状的变异系数范围为3.6%～40.4%。籽粒质量和淀粉含量与籽粒营养含量呈负相关。主成分分析将10个农艺性状转化为4个主成分，累计贡献率为79.8%,第1主成分为籽粒大小因子、第2主成分为营养因子、第3主成分为质量因子、第4主成分为赖氨酸因子。聚类分析将429份玉米自交系划分为5类，其中自交系W284被单独聚为一类，其物理性状为5个类群中的最高值，在籽粒大小方面表现突出；类群3具有油脂、蛋白质、赖氨酸含量高的特点。将综合得分排名前50位的玉米自交系再次聚类划分成具有不同种质特性的5个类群，得到在品质质量方面有较大遗传优势的DY358F自交系和6个质量好、丰产性高的优质玉米种质(PHV53、DK625F、HM2F、P267-4、Hong 2、B1M-6-PMO/4CV-31-1)。逐步回归分析表明，粒面积、百粒重、容重3个性状可作为玉米籽粒质量综合评价的关键指标。
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施硅提高小麦防御孢囊线虫病的组成型和诱导型抗性机制
《植物营养与肥料学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】孢囊线虫病在我国广泛存在，危害粮食安全与环境健康，严重影响了农业的可持续发展。硅作为一种诱导因子，在植物抗病性方面具有重要的作用，研究施用硅肥诱导小麦防御孢囊线虫病的作用机制对环境保护和小麦生长具有十分重要的意义。【方法】以菲利普孢囊线虫(Heterodera filipjevi)为供试孢囊线虫，首先开展硅肥施用水平盆栽试验，在不接虫和接虫条件下，分别设置5个硅肥施用水平：0、0.25、0.5、1、2 g/kg。在小麦接虫后2个月，取样测定小麦单株孢囊量、植株生长指标，筛选出最优硅肥施用浓度。以最优施硅水平继续进行施硅与接虫2×2双因素盆栽试验，共4个处理：不施硅不接虫(CK)、施硅不接虫(Si)、不施硅接虫(Cyst)、施硅接虫(Si×Cyst)。接虫2个月后，取样分析小麦硅、营养物质(可溶性糖、可溶性蛋白和游离氨基酸)、次生代谢物质(木质素和总酚)以及活性氧(过氧化氢)含量，将未接虫处理小麦的相关成分含量定义为组成型抗性，接虫前后的各成分差值定义为诱导型抗性，探究施硅提高小麦防御孢囊线虫能力的组成型和诱导型抗性机制。【结果】浓度为0.5 g/kg的硅肥处理使小麦单株孢囊量显著减少了67.74%，且显著提高了小麦地上部鲜重、株高、叶绿素相对含量(SPAD)、地下部鲜重、根总长、根表面积、根尖数和根系活力。与不施硅处理(Si 0 g/kg)相比，施硅处理(Si 0.5 g/kg)的组成型地上和地下部硅含量分别显著提高76.50%和116.60%，诱导型地下部硅含量显著下降；施硅显著提高了营养物质中组成型可溶性糖和可溶性蛋白含量，组成型游离氨基酸含量显著降低了33.10%，增加了诱导型可溶性糖和游离氨基酸含量；施硅后的组成型木质素、总酚含量分别显著增加37.98%和35.55%，诱导型含量均显著减少；诱导型过氧化氢含量在施硅后显著降低了25.39%。PCA与相关性分析结果表明，地上部鲜重及株高、组成型游离氨基酸含量、诱导型地上部硅含量及过氧化氢含量与小麦防御孢囊线虫病能力的关系最为紧密。【结论】施用硅肥通过对小麦硅含量、营养物质、次生代谢物质以及活性氧的影响，从小麦的组成型抗性和诱导型抗性方面提高了小麦对孢囊线虫病的抗性。
关键词： 小麦 硅肥 菲利普孢囊线虫 组成型抗性 诱导型抗性
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